| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-32页 |
| ·耐辐射微生物的概述 | 第14-17页 |
| ·耐辐射异常球菌 | 第17-20页 |
| ·D. radiodurans生长情况及细胞结构 | 第17-18页 |
| ·D. radiodurans的遗传学特性 | 第18页 |
| ·D. radiodurans辐射及其他胁迫抗性 | 第18-20页 |
| ·D. radiodurans的DNA损伤修复机制 | 第20-25页 |
| ·剪切修复 | 第21-22页 |
| ·错配修复 | 第22-23页 |
| ·重组修复 | 第23-25页 |
| ·D. radiodurans代谢系统 | 第25-27页 |
| ·糖类代谢 | 第25页 |
| ·氨基酸核酸代谢 | 第25-27页 |
| ·磷酸戊糖途径 | 第27-29页 |
| ·磷酸戊糖途径影响D. radiodurans辐射抗性相关研究基础 | 第29-30页 |
| ·立题依据及技术路线 | 第30-32页 |
| 第二章 PPP突变株的构建及表型鉴定 | 第32-57页 |
| ·材料与方法 | 第32-43页 |
| ·实验菌株与质粒来源 | 第32页 |
| ·酶、试剂盒及生化试剂 | 第32-33页 |
| ·主要仪器设备 | 第33页 |
| ·培养基及主要试剂溶液的配置 | 第33-34页 |
| ·细菌培养 | 第34页 |
| ·基因组DNA、质粒DNA的提取 | 第34-35页 |
| ·D. radiodurans线性转化 | 第35页 |
| ·E. coli感受态细胞的制备与热激转化 | 第35-36页 |
| ·PCR引物与反应条件 | 第36-37页 |
| ·DNA片段的回收、纯化、酶切与连接 | 第37-39页 |
| ·以Δtkt基因组为模板的real-time PCR反应引物、体系及反应条件 | 第39-40页 |
| ·细菌总RNA的提取及DNase的消化 | 第40-41页 |
| ·RNA反转录为cDNA | 第41-42页 |
| ·生长曲线的测定 | 第42页 |
| ·UV辐照存活曲线的测定 | 第42页 |
| ·伽马辐照存活曲线的测定 | 第42页 |
| ·D. radiodurans野生型及磷酸戊糖途径突变株代谢谱分析 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-55页 |
| ·D. radiodurans Δzwf, Δtal突变株阻断片段的构建 | 第43-46页 |
| ·D. radiodurans Δzwf, Δtal突变株的纯化与验证 | 第46-48页 |
| ·D. radiodurans Δtkt突变株阻断片段的构建 | 第48-50页 |
| ·D. radiodurans Δtkt 突变株的纯化及突变率测定 | 第50-51页 |
| ·生长曲线测定 | 第51-52页 |
| ·UV辐照存活率测定及存活曲线绘制 | 第52-53页 |
| ·伽马辐照存活率测定及存活曲线绘制 | 第53页 |
| ·突变株代谢谱分析 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| ·突变株的构建与验证 | 第55页 |
| ·突变株表型测定 | 第55-57页 |
| 第三章 磷酸戊糖途径突变对其他代谢通路的影响 | 第57-67页 |
| ·材料与方法 | 第57-60页 |
| ·酶、主要试剂及试剂盒 | 第57页 |
| ·实验仪器 | 第57页 |
| ·Real-time PCR引物、体系及反应条件 | 第57-58页 |
| ·UV辐照处理 | 第58页 |
| ·细菌细胞破碎及破碎效率测定 | 第58-59页 |
| ·高效液相色谱检测细胞内液中D-ribose含量 | 第59页 |
| ·细胞内液中NADPH含量测定 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-65页 |
| ·突变株PPP基因UV处理前后转录水平变化 | 第60-61页 |
| ·突变株中NER, MMR基因UV处理前后转录水平变化 | 第61-62页 |
| ·突变株中EMP, SAP基因UV处理前后转录水平变化 | 第62-63页 |
| ·D. radiodurans突变株细胞中D-ribose含量变化 | 第63-64页 |
| ·D. radiodurans突变株细胞内液中NADPH含量变化 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| ·zwf, tal, tkt基因的突变在UV辐照处理前后对PPP的影响 | 第65页 |
| ·PPP对于UV抗性的影响 | 第65-67页 |
| 第四章 结论 | 第67-68页 |
| 附录一 株耐辐射新菌的分离与鉴定 | 第68-75页 |
| 1 材料方法 | 第68-70页 |
| 2 结果与分析 | 第70-74页 |
| 3 讨论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 作者简介 | 第87页 |
