| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 综述 | 第14-28页 |
| ·人表皮细胞生长因子 | 第14-21页 |
| ·人表皮细胞生长因子的特性 | 第14-17页 |
| ·人表皮细胞生长因子的生物生理活性及其应用 | 第17-19页 |
| ·人表皮细胞生长因子的制备 | 第19-20页 |
| ·EGF 的发展前景 | 第20-21页 |
| ·油体及油体膜蛋白 | 第21-23页 |
| ·植物油体及油体膜蛋白的形态学和功能 | 第21-22页 |
| ·油体的形成过程 | 第22-23页 |
| ·油体及油体蛋白的应用 | 第23-28页 |
| ·油体用作乳化剂 | 第23-24页 |
| ·植物油体表达体系 | 第24-25页 |
| ·人工油体技术 | 第25-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-37页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·植物材料、载体与菌株 | 第28页 |
| ·试剂盒 | 第28-29页 |
| ·药品试剂 | 第29页 |
| ·实验仪器 | 第29页 |
| ·引物 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-37页 |
| ·非融合蛋白原核表达载体的构建 | 第29-32页 |
| ·原核油体蛋白融合表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·带有重组质粒的 E.coli 菌株的获得 | 第33页 |
| ·在大肠杆菌中的诱导表达 | 第33-34页 |
| ·融合蛋白的 Western 分析 | 第34页 |
| ·不含油体蛋白的重组hEGF 的纯化 | 第34页 |
| ·油菜油体提取与人工油体的构建 | 第34-35页 |
| ·EGF 的生物活性分析 | 第35页 |
| ·OLEOSIN-hEGF 融合蛋白植物表达载体的构建与转化 | 第35-37页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第37-69页 |
| ·HEGF 的 E.COLI 表达载体的构建 | 第37-43页 |
| ·CBD 基因的扩增与pCBDT 的构建 | 第39-41页 |
| ·hEGF 的 E.coli 表达载体的构建 | 第41-43页 |
| ·OLEOSIN-HEGF 的 E.COLI 表达载体的构建 | 第43-53页 |
| ·E.coli 表达载体 OLEOSIN-hEGF/pET32a 的构建 | 第43-49页 |
| ·E.coli 表达载体 OLEOSIN-hEGF/pET28a 的构建 | 第49-53页 |
| ·原核表达载体的诱导表达 | 第53-55页 |
| ·hEGF 在大肠杆菌中诱导表达 | 第53页 |
| ·OLEOSIN-hEGF 在大肠杆菌中诱导表达 | 第53-54页 |
| ·目标蛋白存在形式的分析 | 第54-55页 |
| ·融合蛋白的生物信息学分析 | 第55页 |
| ·HEGF 目的蛋白的亲和纯化 | 第55-56页 |
| ·融合蛋白的 WESTERN 分析 | 第56-57页 |
| ·重组油体的构建 SDS-PAGE 分析及镜检 | 第57-58页 |
| ·融合蛋白人工油体的构建 | 第57页 |
| ·人工油体的显微镜分析 | 第57-58页 |
| ·生物活性分析 | 第58-59页 |
| ·OLEOSIN-HEGF 融合蛋白的植物表达载体的构建与遗传转化 | 第59-66页 |
| ·植物油体表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·植物油体表达载体的遗传转化 | 第60-66页 |
| ·讨论 | 第66-69页 |
| ·基因设计和载体构建 | 第66页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第66-67页 |
| ·利用表达的融合蛋白在体外重组形成人工油体 | 第67页 |
| ·重组人工油体在包涵体复性领域的应用 | 第67-69页 |
| 第四章 全文结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简历 | 第77页 |
