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噬菌体库筛选猕猴神经干细胞表面标记物

摘要第1-3页
Abstract第3-8页
第1章 引言第8-20页
   ·胚胎干细胞研究进展第8-17页
     ·胚胎干细胞特征第9-10页
     ·灵长类胚胎干细胞的培养第10-11页
     ·胚胎干细胞的自我更新机制第11-15页
     ·胚胎干细胞定向分化的研究进展第15-17页
   ·噬菌体展示技术第17-18页
   ·量子点技术在细胞培养中的使用第18-19页
   ·研究目的和意义第19-20页
第2章 猕猴胚胎干细胞的培养及向神经干细胞的定向分化第20-37页
   ·实验材料第21-23页
     ·药品及生化试剂第21-22页
     ·试剂盒第22页
     ·仪器设备第22-23页
     ·细胞株和菌株来源第23页
   ·实验方法第23-28页
     ·原代小鼠胚成纤维细胞PMEF 的制备第23-24页
     ·猕猴胚胎干细胞R366.4 的培养第24-25页
     ·猕猴胚胎干细胞未分化特征的检测第25-27页
     ·猕猴胚胎干细胞向神经干细胞定向分化第27-28页
   ·结果第28-35页
     ·未分化猕猴胚胎干细胞的形态学鉴定第28-30页
     ·碱性磷酸酶的检测第30页
     ·猕猴神经干细胞定向诱导第30-35页
   ·讨论第35-37页
第3章 猕猴神经干细胞表面特异标记物的寻找第37-53页
   ·实验材料第37-41页
     ·药品及生化试剂第37-38页
     ·主要试剂配制第38-40页
     ·仪器设备第40-41页
   ·实验方法第41-45页
     ·猕猴胚胎干细胞,神经干细胞及神经干细胞外围细胞的制备第41页
     ·噬菌体库的筛选第41-42页
     ·噬菌体克隆的挑选第42页
     ·得到的噬菌体克隆的检测和鉴定第42-44页
     ·合成多肽的竞争性抑制检测第44页
     ·量子点标记HGE 多肽第44页
     ·量子点标记HGE 多肽与免疫荧光检测第44-45页
     ·蛋白免疫印迹(Western Blot)检测第45页
   ·结果第45-51页
     ·利用噬菌体库反/正向筛选的筛选效率第45-46页
     ·单克隆挑选及初步鉴定第46-47页
     ·全细胞ELISA 检测第47-48页
     ·ICC 检测第48-49页
     ·免疫荧光检测第49-50页
     ·量子点标记多肽与神经干细胞的免疫荧光检测第50页
     ·蛋白质印迹检测第50-51页
   ·讨论第51-53页
第4章 APW 在细胞培养中的作用及生物信息学研究第53-62页
   ·实验材料第53-54页
     ·药品及生化试剂第53页
     ·试剂盒第53页
     ·仪器设备第53-54页
   ·方法第54-55页
     ·MTT 实验(以96 孔板为例)第54-55页
     ·流式细胞术检测细胞毒性实验(PI/Hoechst 33342 双染)第55页
     ·流式细胞术检测细胞周期第55页
   ·结果第55-62页
     ·APW 对未分化猕猴胚胎干细胞的细胞毒性检测第55-59页
       ·MTT 法检测 APW 对胚胎干细胞的凋亡的影响?第55-56页
       ·PI/Hoechst 33342 双染实验第56-58页
       ·流式细胞术检测 APW 对猕猴胚胎干细胞的细胞周期的影响?第58-59页
     ·生物信息学分析APW 的性质第59-62页
第5章 讨论第62-63页
参考文献第63-69页
致谢第69-70页
 个人简历第70页

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