| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-16页 |
| ·植物抗病信号传递分子机制研究的重要意义 | 第10页 |
| ·植物抗病分子机制研究进展 | 第10-15页 |
| ·植物抗病反应 | 第10-11页 |
| ·植物抗病反应中的信号分子 | 第11-12页 |
| ·植物内源激素 SA、JA 介导的防御反应机制 | 第12-15页 |
| ·RNA 干扰 | 第15页 |
| ·本研究的内容和目标 | 第15-16页 |
| 2. 材料与方法 | 第16-20页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·水杨酸羟化酶和脂氧合酶基因的克隆方法 | 第16-20页 |
| ·含部分attB 位点的引物的设计及PCR 产物扩增 | 第16页 |
| ·nahG 和LOX 基因片段的扩增 | 第16-17页 |
| ·两步PCR 法加attB 接头 | 第17页 |
| ·gateway 位点特异性重组技术构建 LOX 基因 RNAi 载体和nahG 基因的超表达载体 | 第17-18页 |
| ·植物表达载体转化农杆菌感受态细胞以及PCR 鉴定 | 第18-19页 |
| 农杆菌感受态制作和植物表达载体转化农杆菌感受态方法见附录 | 第18-19页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第19-20页 |
| ·转基因苗的 PCR 检测 | 第20页 |
| ·RT-PCR 检测 | 第20页 |
| 3 结果与分析 | 第20-31页 |
| ·LOX 基因和nahG 基因的扩增 | 第20-21页 |
| ·LOX 基因和nahG 基因的序列分析 | 第21-26页 |
| ·入门载体的检测 | 第26页 |
| ·LR 反应获得表达载体 | 第26-28页 |
| ·农杆菌转化子的鉴定 | 第28-29页 |
| ·转基因苗的分子检测 | 第29-30页 |
| ·RT-PCR | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| ·载体构建 | 第31页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第31-32页 |
| ·RNA 干扰 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-37页 |
| 附录 | 第37-45页 |
| 附录1 缩略词及英汉对照 | 第37页 |
| 附录2 主要实验仪器和试剂盒 | 第37-38页 |
| 附录3 所用试剂与缓冲液的配制 | 第38-39页 |
| 附录4 培养基的配方 | 第39-40页 |
| 附录5:试验中所用到的质粒图谱 | 第40-41页 |
| 附录6 大肠杆菌细胞感受态的制备及转化 | 第41-42页 |
| 附录7：根癌农杆菌感受态细胞制备及质粒转化 | 第42-43页 |
| 附录8：烟草总RNA 提取见附录 | 第43-44页 |
| 附录9：本研究中所用的 DNA Marker | 第44页 |
| 附录10:烟草遗传转化过程 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45页 |
