胭脂鱼胰蛋白酶的分离纯化与化学修饰研究
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-12页 |
| 1 绪论 | 第12-17页 |
| ·胰蛋白酶化学修饰研究现状 | 第12-17页 |
| ·胰蛋白酶的固定技术 | 第12-13页 |
| ·大分子结合修饰 | 第13-15页 |
| ·定点改造和体外定向进化 | 第15-17页 |
| 2 胭脂鱼胰蛋白酶的纯化 | 第17-26页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-20页 |
| ·胰蛋白酶粗酶的提取 | 第17-19页 |
| ·胭脂鱼胰蛋白酶纯化 | 第19-20页 |
| ·结果与分析 | 第20-23页 |
| ·考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的标准曲线 | 第20页 |
| ·硫酸铵盐析最佳浓度的确定 | 第20-21页 |
| ·胭脂鱼胰蛋白酶分离纯化结果 | 第21-23页 |
| ·讨论 | 第23-26页 |
| ·粗胰蛋白酶的提取 | 第23页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第23-24页 |
| ·亲和层析 | 第24页 |
| ·离子交换层析 | 第24-26页 |
| 3 胭脂鱼胰蛋白酶的化学修饰 | 第26-32页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-27页 |
| ·右旋糖苷对胰蛋白酶修饰条件的优化 | 第26-27页 |
| ·胰蛋白酶修饰化度的衡量与修饰酶保留酶活的测定 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-29页 |
| ·修饰反应最佳pH 的确定 | 第27-28页 |
| ·右旋糖苷氧化反应中 NaIO_4用量的优化 | 第28页 |
| ·修饰剂与蛋白酶的反应例 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-32页 |
| ·右旋糖苷的活化 | 第29页 |
| ·影响修饰反应的因素 | 第29-30页 |
| ·修饰化度与酶活保留的衡量 | 第30-31页 |
| ·多糖修饰蛋白质酶的优缺点 | 第31-32页 |
| 4 修饰酶与自然酶的性质研究 | 第32-44页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-35页 |
| ·胰蛋白酶及修饰酶分子量的测定与比较 | 第32页 |
| ·胰蛋白酶与修饰酶动力学常数（Km）的测定比较 | 第32-33页 |
| ·胰蛋白酶修饰前后最适温度的测定比较 | 第33-34页 |
| ·胰蛋白酶修饰前后最适pH 的测定比较 | 第34页 |
| ·胰蛋白酶修饰前后酸碱稳定性的比较 | 第34页 |
| ·热失活动力学与失活热力学分析 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-39页 |
| ·胰蛋白酶修饰前后的分子量 | 第35页 |
| ·胰蛋白酶修饰前后的动力学常数 | 第35-36页 |
| ·胰蛋白酶修饰前后的最适温度 | 第36-37页 |
| ·胰蛋白酶修饰前后的最适pH | 第37页 |
| ·胰蛋白酶修饰前后的酸碱稳定性 | 第37页 |
| ·热失活动力学与热力学分析 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-44页 |
| ·胰蛋白酶修饰前后分子量的比较 | 第39-40页 |
| ·胰蛋白酶修饰前后Km 值的比较 | 第40页 |
| ·胰蛋白酶修饰前后的最适温度、最适pH | 第40-41页 |
| ·修饰前后酸碱稳定性的变化 | 第41页 |
| ·热失活动力学和热力学研究 | 第41-44页 |
| 5. 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 缩写词 | 第51-52页 |
| 附录 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
