摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
缩略语表 | 第15-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-38页 |
·前言 | 第17-18页 |
·蛋白质组学概念及其分类 | 第18-19页 |
·蛋白质组学概念 | 第18-19页 |
·蛋白质组学分类 | 第19页 |
·蛋白质组学研究技术 | 第19-30页 |
·双向电泳技术 | 第20-24页 |
·高效液相色谱(HPLC) | 第24页 |
·毛细管电泳(CE) | 第24-25页 |
·同位素编码亲和标签(ICAT) | 第25页 |
·蛋白质芯片(Protein chip) | 第25-26页 |
·生物质谱技术(MS) | 第26-28页 |
·生物信息学 | 第28-30页 |
·蛋白质组学在肉质科学研究中的应用 | 第30-36页 |
·骨骼肌蛋白质表达谱 | 第31-33页 |
·遗传因素引起的蛋白质组变化 | 第33-34页 |
·屠宰后的代谢变化 | 第34-35页 |
·宰前条件变化引起的蛋白质组改变 | 第35页 |
·与肉质性状有关的蛋白质组变化 | 第35-36页 |
·肽的质谱分析(MS) | 第36页 |
·展望 | 第36-38页 |
第二章 猪肌肉组织双向电泳分离技术的建立及优化 | 第38-52页 |
·前言 | 第38页 |
·材料与方法 | 第38-43页 |
·实验材料 | 第38页 |
·主要实验仪器 | 第38页 |
·主要化学药品及试剂 | 第38-39页 |
·主要溶液配方 | 第39-40页 |
·肌肉组织蛋白样品的制备 | 第40-41页 |
·蛋白质定量 | 第41页 |
·双向电泳分析(2-DE) | 第41-43页 |
·图像扫描及分析 | 第43页 |
·结果与分析 | 第43-50页 |
·不同提取方法对双向电泳结果的影响 | 第43-45页 |
·不同上样量的双向电泳结果比较 | 第45-46页 |
·不同pH值胶条的双向电泳结果比较 | 第46页 |
·不同二向胶浓度的双向电泳结果比较 | 第46-47页 |
·不同染色方法的双向电泳结果比较 | 第47-48页 |
·三块胶的重复性比较 | 第48-49页 |
·双向电泳中常见问题分析 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-52页 |
·关于肌肉组织蛋白的提取 | 第50-51页 |
·影响猪肌肉组织样品双向电泳分离效果的关键因素 | 第51-52页 |
第三章 梅山猪与大白猪肌肉组织差异蛋白质组学研究 | 第52-73页 |
·前言 | 第52页 |
·材料与方法 | 第52-58页 |
·实验材料 | 第52-53页 |
·主要实验仪器 | 第53页 |
·主要化学药品及试剂 | 第53页 |
·主要溶液配方 | 第53页 |
·双向电泳相关溶液 | 第53页 |
·琼脂糖凝胶电泳相关缓冲液 | 第53页 |
·肌肉组织蛋白样品的制备 | 第53-54页 |
·蛋白质定量 | 第54页 |
·双向电泳分析 | 第54-55页 |
·图像扫描及分析 | 第55页 |
·蛋白质鉴定 | 第55-56页 |
·实时荧光定量PCR | 第56-58页 |
·结果与分析 | 第58-67页 |
·蛋白质定量 | 第58-59页 |
·梅山猪与大白猪背最长肌差异蛋白质组学分析 | 第59-66页 |
·部分差异蛋白点在mRNA水平表达情况 | 第66页 |
·肌球蛋白重链分布分析 | 第66-67页 |
·讨论 | 第67-71页 |
·关于银染 | 第67-68页 |
·关于不同品种猪肌纤维类型的分布 | 第68页 |
·关于代谢相关差异表达蛋白 | 第68-70页 |
·关于肌纤维结构相关差异表达蛋白 | 第70-71页 |
·关于防御与应激相关差异表达蛋白 | 第71页 |
·关于其他未分类差异表达蛋白 | 第71页 |
·小结 | 第71-73页 |
第四章 梅山猪不同发育时期肌肉组织差异蛋白质组学研究 | 第73-101页 |
·前言 | 第73-75页 |
·材料与方法 | 第75-77页 |
·实验材料 | 第75页 |
·主要实验仪器 | 第75页 |
·主要化学药品及试剂 | 第75页 |
·主要溶液配方 | 第75-76页 |
·肌肉组织蛋白样品的制备 | 第76页 |
·蛋白定量 | 第76页 |
·双向电泳分析(2-DE) | 第76页 |
·图像扫描及分析 | 第76页 |
·蛋白质鉴定 | 第76页 |
·实时荧光定量PCR | 第76页 |
·Western Blotting分析 | 第76-77页 |
·结果与分析 | 第77-94页 |
·蛋白质定量 | 第77-78页 |
·梅山猪不同发育时期背最长肌肌球蛋白重链分布分析 | 第78-79页 |
·梅山猪不同发育时期背最长肌差异蛋白质组学分析 | 第79-91页 |
·部分差异蛋白点的Western Blotting验证分析 | 第91-92页 |
·差异表达蛋白翻译水平与转录水平比较分析 | 第92-94页 |
·讨论 | 第94-101页 |
第五章 部分差异蛋白基因水平的进一步研究分析 | 第101-124页 |
·前言 | 第101页 |
·材料与方法 | 第101-107页 |
·实验材料与性状测定 | 第101-102页 |
·主要药品及试剂 | 第102页 |
·缓冲液和常用试剂的配制 | 第102-103页 |
·总RNA的提取及cDNA第一链合成 | 第103页 |
·猪基因组DNA的提取及检测 | 第103页 |
·猪ATP5B、ATP5A、14-3-3ζ基因的分离 | 第103-105页 |
·猪ATP5B、ATP5A、14-3-3ζ基因时空表达分析 | 第105页 |
·DNA序列的生物信息学分析 | 第105页 |
·ATP5B和14-3-3ζ基因的多态性检测 | 第105-106页 |
·多态标记与性状的关联分析方法 | 第106-107页 |
·结果与分析 | 第107-119页 |
·总RNA的提取和检测结果 | 第107页 |
·猪ATP5B、ATP5A和14-3-3ζ基因的克隆和序列分析 | 第107-112页 |
·猪ATP5B、ATP5A和14-3-3ζ基因的时空表达分析 | 第112-116页 |
·猪ATP5B和14-3-3ζ基因多态性检测与性状关联分析 | 第116-119页 |
·讨论 | 第119-124页 |
·关于猪ATP5B和ATP5A基因 | 第119-121页 |
·关于猪14-3-3ζ基因 | 第121-124页 |
第六章 结论 | 第124-127页 |
·主要研究结果 | 第124-125页 |
·主要创新点 | 第125-126页 |
·本研究的不足之处 | 第126页 |
·值得进一步研究的相关问题 | 第126-127页 |
参考文献 | 第127-144页 |
附录 | 第144-152页 |
在读期间发表文章情况 | 第152-153页 |
致谢 | 第153-154页 |