| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-30页 |
| 1.1 农抗120 背景介绍 | 第12-15页 |
| 1.1.1 农抗120 用途 | 第12页 |
| 1.1.2 农抗120 的活性组分 | 第12-15页 |
| 1.2 茴香霉素的研究进展 | 第15-21页 |
| 1.2.1 茴香霉素的发现 | 第15-16页 |
| 1.2.2 茴香霉素的生物活性 | 第16-18页 |
| 1.2.3 茴香霉素的生物合成及化学合成研究 | 第18-21页 |
| 1.3 含吡咯环化合物的生物合成研究进展 | 第21-28页 |
| 1.3.1 吡咯环从头合成的研究 | 第22-24页 |
| 1.3.2 由脯氨酸和色氨酸衍生的吡咯类化合物的研究 | 第24-26页 |
| 1.3.3 灵菌红素中吡咯环的生物合成研究 | 第26-28页 |
| 1.4 本课题的研究意义和目的 | 第28-30页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第30-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-41页 |
| 2.1.1 本研究所用的菌株 | 第30-33页 |
| 2.1.2 本研究所用的质粒 | 第33-35页 |
| 2.1.3 本研究所用的引物 | 第35-40页 |
| 2.1.4 本研究所用的培养基 | 第40-41页 |
| 2.1.5 本研究所用的试剂 | 第41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-51页 |
| 2.2.1 实验室通用方法 | 第41页 |
| 2.2.2 本研究所用实验方法 | 第41-51页 |
| 第三章 茴香霉素生物合成基因簇的克隆及相关中间产物的鉴定 | 第51-68页 |
| 3.1 前言 | 第51页 |
| 3.2 实验结果 | 第51-65页 |
| 3.2.1 S.hygrospinosus var.beijingensis基因组文库的构建 | 第51-53页 |
| 3.2.2 高通量结合转移、发酵及生物活性的测定 | 第53-54页 |
| 3.2.3 S.hygrospinosus var.beijingensis基因组扫描及序列分析 | 第54-55页 |
| 3.2.4 茴香霉素生物合成基因簇的定位 | 第55-58页 |
| 3.2.5 茴香霉素生物合成必需基因的确定 | 第58-61页 |
| 3.2.6 构建表达宿主ZXQ | 第61-63页 |
| 3.2.7 单基因缺失突变株发酵液检测及中间产物的结构鉴定 | 第63-65页 |
| 3.3 讨论 | 第65-68页 |
| 第四章 茴香霉素结构中吡咯环合成机制的研究 | 第68-77页 |
| 4.1 前言 | 第68页 |
| 4.2 实验结果 | 第68-75页 |
| 4.2.1 aniN的生物信息学分析 | 第68-69页 |
| 4.2.2 aniN体内功能的研究 | 第69-70页 |
| 4.2.3 AniN蛋白的体外功能研究 | 第70-75页 |
| 4.3 讨论 | 第75-77页 |
| 第五章 茴香霉素基因簇中aniQ的功能研究 | 第77-89页 |
| 5.1 前言 | 第77页 |
| 5.2 实验结果 | 第77-86页 |
| 5.2.1 茴香霉素中N原子来源的探索 | 第77-78页 |
| 5.2.2 aniQ体内功能的研究 | 第78-79页 |
| 5.2.3 AniQ蛋白的体外功能研究 | 第79-86页 |
| 5.3 讨论 | 第86-89页 |
| 第六章 茴香霉素基因簇中aniO的功能研究 | 第89-108页 |
| 6.1 前言 | 第89页 |
| 6.2 实验结果 | 第89-105页 |
| 6.2.1 aniO体内功能的研究 | 第89-90页 |
| 6.2.2 AniO蛋白体外功能的研究 | 第90-98页 |
| 6.2.3 隐藏糖基化反应原因的探索 | 第98-100页 |
| 6.2.4 糖基化对茴香霉素生物合成途径的影响分析 | 第100-105页 |
| 6.3 讨论 | 第105-108页 |
| 第七章 茴香霉素基因簇中修饰基因的功能研究 | 第108-116页 |
| 7.1 前言 | 第108-109页 |
| 7.2 实验结果 | 第109-113页 |
| 7.2.1 糖基水解反应的研究 | 第109-112页 |
| 7.2.2 AniK催化甲基转移反应的研究 | 第112-113页 |
| 7.3 讨论 | 第113-116页 |
| 第八章 总结与展望 | 第116-126页 |
| 8.1 本研究工作总结 | 第116-117页 |
| 8.2 本研究主要创新点 | 第117-118页 |
| 8.3 研究展望 | 第118-126页 |
| 8.3.1 AniQ和 AniN的蛋白结构解析 | 第118页 |
| 8.3.2 转酮酶AniP的体外生化研究 | 第118-121页 |
| 8.3.3 其他微生物中吡咯烷生物碱生物合成基因簇的挖掘 | 第121页 |
| 8.3.4 中间产物立体结构的确定 | 第121页 |
| 8.3.5 其他基因的功能研究 | 第121-126页 |
| 参考文献 | 第126-138页 |
| 附录 | 第138-182页 |
| 攻读学位期间发表学术论文及科研成果 | 第182-185页 |
| 致谢 | 第185-188页 |
