| 摘要 | 第12-13页 |
| Abstract | 第13-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-21页 |
| 第一章 硫氧还蛋白的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.1 Trx及Trx系统 | 第15-17页 |
| 1.1.1 Trx1基因 | 第15页 |
| 1.1.2 Trx1结构 | 第15-16页 |
| 1.1.3 Trx功能 | 第16-17页 |
| 1.2 寄生虫与Trx的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2.1 Trx与疟原虫 | 第17页 |
| 1.2.2 Trx与锥虫 | 第17-18页 |
| 第二章 弓形虫及其疫苗研究进展 | 第18-21页 |
| 2.1 灭活疫苗 | 第18页 |
| 2.2 弱毒活疫苗 | 第18-19页 |
| 2.3 基因工程亚单位疫苗和核酸疫苗 | 第19-21页 |
| 2.3.1 基因工程亚单位疫苗 | 第19页 |
| 2.3.2 DNA疫苗 | 第19-20页 |
| 2.3.3 RNA疫苗 | 第20-21页 |
| 第二篇 研究内容 | 第21-61页 |
| 第1章：弓形虫Thioredoxin-like蛋白质的生物信息学分析和cDNA的合成 | 第21-30页 |
| 1.1 材料 | 第21-22页 |
| 1.1.1 数据库 | 第21页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第21页 |
| 1.1.3 虫株和小鼠 | 第21页 |
| 1.1.4 主要试剂 | 第21页 |
| 1.1.5 主要溶液配制 | 第21-22页 |
| 1.2 方法 | 第22-24页 |
| 1.2.1 获取蛋白质序列 | 第22页 |
| 1.2.2 功能结构域以及保守性分析 | 第22页 |
| 1.2.3 蛋白质多序列比对 | 第22页 |
| 1.2.4 TGME49_209950蛋白质序列种糖胺聚糖结合基序 | 第22页 |
| 1.2.5 跨膜区域和信号肽的预测 | 第22-23页 |
| 1.2.6 刚地弓形虫ME49株的体内和体外培养 | 第23页 |
| 1.2.7 刚地弓形虫ME49速殖子的纯化 | 第23页 |
| 1.2.8 刚地弓形虫cDNA的提取 | 第23-24页 |
| 1.3 结果 | 第24-28页 |
| 1.3.1 TGME49_209950蛋白质序列特征 | 第24-26页 |
| 1.3.2 蛋白质多序列比对和进化树分析 | 第26-27页 |
| 1.3.3 总RNA提取结果 | 第27-28页 |
| 1.4 讨论 | 第28-29页 |
| 1.5 小结 | 第29-30页 |
| 第2章：TGME49_209950重组蛋白质的原核表达、纯化及多克隆抗体制备 | 第30-47页 |
| 2.1 材料 | 第30-34页 |
| 2.1.1 实验动物、载体和菌株 | 第30页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第30-31页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第31页 |
| 2.1.4 主要溶液的配制 | 第31-34页 |
| 2.2 方法 | 第34-40页 |
| 2.2.1 Vero细胞、弓形虫的体外培养 | 第34页 |
| 2.2.2 提取总RNA以及反转录成cDNA在第一章1.2.8内容中。 | 第34页 |
| 2.2.3 引物的设计与合成 | 第34-35页 |
| 2.2.4 目的片段的扩增 | 第35-36页 |
| 2.2.5 目的基因的表达 | 第36-39页 |
| 2.2.6 SDS-PAGE和Western-blot鉴定目的蛋白 | 第39页 |
| 2.2.7 小鼠的免疫和抗血清的制备 | 第39-40页 |
| 2.2.8 检测多克隆抗体的特异性 | 第40页 |
| 2.3 结果 | 第40-44页 |
| 2.3.1 TGME49_209950-N和TGME49_209950-C目的片段的扩增 | 第40-41页 |
| 2.3.2 目的片段的表达 | 第41-43页 |
| 2.3.3 检测小鼠抗血清效价 | 第43页 |
| 2.3.4 Western-blot检测多克隆抗体的特异性 | 第43-44页 |
| 2.4 讨论 | 第44-46页 |
| 2.4.1 蛋白质截断表达 | 第44-45页 |
| 2.4.2 蛋白质诱导表达系统和纯化 | 第45-46页 |
| 2.5 小结 | 第46-47页 |
| 第3章：刚地弓形虫TGME49_209950蛋白质在胞内的表达以及定位 | 第47-53页 |
| 3.1 材料 | 第47-48页 |
| 3.1.1 虫体 | 第47页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第47页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第47-48页 |
| 3.1.4 主要溶液的配制 | 第48页 |
| 3.2 方法 | 第48-50页 |
| 3.2.1 刚地弓形虫ME49虫株培养和纯化 | 第48页 |
| 3.2.2 虫体制样 | 第48-49页 |
| 3.2.3 Western-blot方法检测TGME49_209950在虫体内表达 | 第49页 |
| 3.2.4 TGME49_209950蛋白质在虫体内和虫体刚入侵细胞时的间接免疫荧光. | 第49页 |
| 3.2.5 Trx-like蛋白质与MIC2蛋白质免疫共定位 | 第49-50页 |
| 3.3 结果 | 第50-52页 |
| 3.3.1 Western-blot检测Trx-like蛋白质在虫体内表达 | 第50页 |
| 3.3.2 TGME49_209950蛋白质亚定位分析 | 第50-52页 |
| 3.4 讨论 | 第52页 |
| 3.5 小结 | 第52-53页 |
| 第4章: TGME49_209950蛋白质的功能研究 | 第53-61页 |
| 4.1 材料 | 第53-54页 |
| 4.1.1 虫株和细胞 | 第53页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第53页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第53页 |
| 4.1.4 主要试剂的配制 | 第53-54页 |
| 4.2 方法 | 第54-56页 |
| 4.2.1 TGME49_209950重组蛋白质与肝素的特异性结合实验 | 第54页 |
| 4.2.2 TGME49_209950重组蛋白质与细胞的黏附试验 | 第54页 |
| 4.2.3 TGME49_209950重组蛋白质与细胞黏附免疫荧光实验 | 第54-55页 |
| 4.2.4 TGME49_209950-N重组蛋白质的抗氧化实验 | 第55-56页 |
| 4.3 结果 | 第56-59页 |
| 4.3.1 TGME49_209950重组蛋白质与肝素特异性结合 | 第56页 |
| 4.3.2 TGME49_209950重组蛋白质与细胞黏附试验 | 第56-57页 |
| 4.3.3 TGME49_209950-N重组蛋白质与细胞黏附免疫荧光 | 第57-58页 |
| 4.3.4 弓形虫Trx-like蛋白质抗氧化实验 | 第58-59页 |
| 4.4 讨论 | 第59-60页 |
| 4.5 小结 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
