摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第11-24页 |
1.1 动态突变疾病简介 | 第11-12页 |
1.2 肿瘤标志物简介 | 第12-13页 |
1.3 生物质谱技术简介 | 第13-19页 |
1.3.1 电喷雾电离质谱(ESI-MS) | 第15-16页 |
1.3.2 基质辅助激光解吸电离质谱(MADLI-MS) | 第16-17页 |
1.3.3 生物质谱技术的应用 | 第17-19页 |
1.4 聚合酶链式反应与电泳技术 | 第19-21页 |
1.4.1 聚合酶链式反应(PCR) | 第19-20页 |
1.4.2 凝胶电泳技术 | 第20-21页 |
1.5 磁珠与纳米材料在生化分析的应用 | 第21-22页 |
1.5.1 生物磁珠技术 | 第21页 |
1.5.2 脂质体 | 第21-22页 |
1.5.3 纳米金颗粒(AuNPs) | 第22页 |
1.6 本论文研究意义与研究内容 | 第22-24页 |
第2章 基于生物质谱(ESI-MS)法的动态突变相关疾病分析方法研究 | 第24-38页 |
2.1 引言 | 第24-25页 |
2.2 实验部分 | 第25-29页 |
2.2.1 试剂与材料 | 第25-26页 |
2.2.2 实验仪器 | 第26页 |
2.2.3 PCR扩增体系及电泳表征 | 第26-27页 |
2.2.4 目标DNA的捕获及水解 | 第27页 |
2.2.5 质谱实验条件 | 第27-28页 |
2.2.6 基因组DNA的纯化提取 | 第28-29页 |
2.3 结果与讨论 | 第29-37页 |
2.3.1 实验原理 | 第29-30页 |
2.3.2 PCR扩增反应结果表征 | 第30页 |
2.3.3 水解酸的选择 | 第30-31页 |
2.3.4 实验可行性分析验证 | 第31-32页 |
2.3.5 质谱条件和溶剂优化 | 第32-34页 |
2.3.6 标准曲线的建立 | 第34-36页 |
2.3.7 基因组DNA纯度测定 | 第36页 |
2.3.8 实际样品的测定 | 第36-37页 |
2.4 小结 | 第37-38页 |
第3章 基于生物质谱法(MADLI-MS)的肿瘤标志物的分析方法研究 | 第38-50页 |
3.1 引言 | 第38-39页 |
3.2 实验部分 | 第39-41页 |
3.2.1 试剂与材料 | 第39-40页 |
3.2.2 实验仪器 | 第40页 |
3.2.3 脂质体-AuNPs-检测抗体复合物的制备表征 | 第40页 |
3.2.4 磁珠-捕获抗体复合物的制备 | 第40页 |
3.2.5 目标蛋白的捕获及磷脂-免疫复合物的形成 | 第40-41页 |
3.2.6 MADLI-TOF-MS质谱检测 | 第41页 |
3.3 结果与讨论 | 第41-49页 |
3.3.1 实验原理 | 第41-42页 |
3.3.2 脂质体-AuNPs复合物的表征 | 第42-44页 |
3.3.3 实验条件的优化 | 第44-45页 |
3.3.4 方法可行性分析 | 第45-47页 |
3.3.5 标准曲线的建立 | 第47-48页 |
3.3.6 临床样品检测 | 第48-49页 |
3.4 小结 | 第49-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-60页 |
附录A 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |