| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第11-29页 |
| 1.1 植物表皮毛研究的意义 | 第11-12页 |
| 1.2 单细胞表皮毛形成的研究进展 | 第12-17页 |
| 1.2.1 拟南芥表皮毛形成的研究进展 | 第12-16页 |
| 1.2.2 棉花纤维形成的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3 多细胞表皮毛形成的研究进展 | 第17-21页 |
| 1.3.1 番茄表皮毛形成的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3.2 其他多细胞表皮毛形成的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.4 图位克隆技术 | 第21-26页 |
| 1.4.1 基因克隆的意义 | 第21页 |
| 1.4.2 基因克隆的常用方法 | 第21-22页 |
| 1.4.3 图位克隆的简介 | 第22-23页 |
| 1.4.4 图位克隆的操作过程 | 第23-25页 |
| 1.4.5 图位克隆技术的优点和局限性 | 第25-26页 |
| 1.4.6 图位克隆技术在番茄基因克隆中的应用 | 第26页 |
| 1.5 C2H2锌指蛋白的研究 | 第26-27页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| 2 材料和方法 | 第29-38页 |
| 2.1 番茄材料 | 第29-30页 |
| 2.2 DNA样品的采集 | 第30页 |
| 2.3 分子标记的获得 | 第30-31页 |
| 2.4 粗定位和精细定位 | 第31-32页 |
| 2.5 表达载体的构建和遗传转化 | 第32-34页 |
| 2.5.1 自带启动子表达载体的构建 | 第32页 |
| 2.5.2 超量表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 2.5.3 干涉载体的构建 | 第33页 |
| 2.5.4 遗传转化 | 第33-34页 |
| 2.6 转基因植株的检测 | 第34-35页 |
| 2.6.1 转基因植株的PCR阳性检测 | 第34页 |
| 2.6.2 转基因植株中目标基因的表达量检测 | 第34-35页 |
| 2.7 扫描电子显微镜 | 第35页 |
| 2.8 双突变体的构建 | 第35-36页 |
| 2.8.1 双突变体的构建 | 第35-36页 |
| 2.8.2 双突变体基因型的检测 | 第36页 |
| 2.9 酵母双杂交实验 | 第36-37页 |
| 2.9.1 酵母转化载体的构建 | 第36页 |
| 2.9.2 转化酵母AH109的基本流程 | 第36-37页 |
| 2.10 GST-pull down | 第37-38页 |
| 2.10.1 载体构建 | 第37页 |
| 2.10.1.1 Wo蛋白接His标签载体的构建 | 第37页 |
| 2.10.1.2 H蛋白接GST标签载体的构建 | 第37页 |
| 2.10.2 蛋白的表达以及鉴定 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-67页 |
| 3.1 H基因的克隆 | 第38-46页 |
| 3.1.1 番茄表皮毛形成关键基因的全基因组关联分析(GWAS) | 第38-39页 |
| 3.1.2 遗传群体的构建及遗传规律的分析 | 第39-41页 |
| 3.1.3 分子标记的开发 | 第41-42页 |
| 3.1.4 H基因的精细定位 | 第42-43页 |
| 3.1.5 H基因的候选基因 | 第43-44页 |
| 3.1.6 ORF3多态性分析 | 第44-46页 |
| 3.2 H候选基因的功能验证 | 第46-48页 |
| 3.2.1 转基因植株的获得和表达量检测 | 第46-47页 |
| 3.2.2 转基因植株的表型观察 | 第47-48页 |
| 3.3 H基因主要调控I型腺毛的形成 | 第48-50页 |
| 3.4 H基因在不同组织中的表达量分析 | 第50页 |
| 3.5 H基因在茄科物种中的同源基因 | 第50-54页 |
| 3.5.1 H基因在烟草中异位表达 | 第51页 |
| 3.5.2 H基因在辣椒中的同源基因 | 第51-53页 |
| 3.5.3 H基因在烟草和土豆等其他茄科作物中的同源基因 | 第53-54页 |
| 3.6 H基因调控I型腺体毛形成的机理研究 | 第54-59页 |
| 3.6.1 h对Wo具有隐性上位效应 | 第54-55页 |
| 3.6.2 Wo基因正调控H基因的表达 | 第55-56页 |
| 3.6.3 H通过与Wo互作来调控I型腺体毛的形成 | 第56-57页 |
| 3.6.4 H, Wo,CycB2三者之间的关系 | 第57-59页 |
| 3.7 dl基因的图位克隆 | 第59-67页 |
| 3.7.1 LA3724的表型分析 | 第59-60页 |
| 3.7.2 遗传群体的构建及dl基因遗传规律的分析 | 第60-61页 |
| 3.7.3 分子标记的开发 | 第61-62页 |
| 3.7.4 dl基因的粗定位 | 第62-63页 |
| 3.7.5 dl基因的精细定位 | 第63-64页 |
| 3.7.6 dl基因的候选基因 | 第64-67页 |
| 4 讨论 | 第67-71页 |
| 4.1 dl基因的候选基因 | 第67-68页 |
| 4.2 IL10-2不能正常形成I型腺体毛 | 第68-69页 |
| 4.3 在茄科作物中表皮毛的形成可能具有相似的调控途径 | 第69-70页 |
| 4.4 H基因调控番茄表皮毛形成的机理研究 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-85页 |
| 附录A | 第85-100页 |
| 附录B | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
