| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 引言 | 第12-25页 |
| 1.1 巴西橡胶树乳管分化研究现状 | 第12-15页 |
| 1.1.1 乳管简介 | 第12页 |
| 1.1.2 乳管的分类及分化 | 第12-14页 |
| 1.1.3 橡胶树乳管分化研究模型的建立,为揭开乳管分化的分子机理奠定基础 | 第14-15页 |
| 1.2 乳管分化及其分子机理研究进展 | 第15页 |
| 1.3 植物响应胁迫应答的调控因子 | 第15-21页 |
| 1.3.1 植物中的NAC转录因子 | 第16-18页 |
| 1.3.2 NAC类转录因子在非生物胁迫中的功能 | 第18-20页 |
| 1.3.3 橡胶树NAC转录因子研究进展 | 第20-21页 |
| 1.4 LEA蛋白的研究进展 | 第21-23页 |
| 1.4.1 LEA蛋白概述 | 第21页 |
| 1.4.2 脱水素简介 | 第21-23页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 1.6 技术路线 | 第24-25页 |
| 2 实验材料与方法 | 第25-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 载体质粒和菌株 | 第25页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第25页 |
| 2.1.4 实验仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-51页 |
| 2.2.1 实时定量PCR分析橡胶乳管分化相关基因的表达 | 第26-28页 |
| 2.2.2 组织切片分析脱水对橡胶乳管分化的影响 | 第28-29页 |
| 2.2.3 巴西橡胶树脱水素基因HbDHN1和HbDHN2的克隆 | 第29页 |
| 2.2.4 巴西橡胶树HbDHN1和HbDHN2的生物信息学分析 | 第29-30页 |
| 2.2.5 巴西橡胶树HbNAC1,HbDHN1和HbDHN2基因不同组织表达模式分析 | 第30页 |
| 2.2.6 不同非生物胁迫下巴西橡胶树HbNAC1,HbDHN1和HbDHN2基因的表达模式分析 | 第30-31页 |
| 2.2.7 启动子顺式作用元件分析 | 第31页 |
| 2.2.8 巴西橡胶树HbNAC1,HbDHN1和HbDHN2的亚细胞定位 | 第31-34页 |
| 2.2.9 HbNAC1蛋白与胁迫相关顺式作用元件的互作验证 | 第34-36页 |
| 2.2.10 EMSA验证HbNAC1与NACRS序列互作 | 第36-40页 |
| 2.2.11 HbNAC1与HbSRPP promoter的互作验证 | 第40-44页 |
| 2.2.12 过表达HbNAC1转基因烟草在干旱物胁迫中的功能分析 | 第44-48页 |
| 2.2.13 过表达HbDHN1和HbDHN2转基因拟南芥的在非生物胁迫中的功能分析 | 第48-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-98页 |
| 3.1 橡胶乳管分化相关基因的表达 | 第51-53页 |
| 3.2 组织切片分析脱水对橡胶乳管分化的影响 | 第53-54页 |
| 3.3 橡胶树脱水素基因HbDHN1和HbDHN2的克隆及生物学分析 | 第54-59页 |
| 3.3.1 橡胶树RNA提取 | 第54页 |
| 3.3.2 橡胶树脱水素基因HbDHN1和HbDHN2的克隆 | 第54-55页 |
| 3.3.3 橡胶树脱水素基因HbDHN1和HbDHN2的生物信息学分析 | 第55-56页 |
| 3.3.4 HbDHN1和HbDHN2蛋白跨膜结构分析 | 第56-57页 |
| 3.3.5 HbDHN1和HbDHN2蛋白亲水性/疏水性分析 | 第57页 |
| 3.3.6 HbDHN1和HbDHN2蛋白的结构域分析 | 第57-58页 |
| 3.3.7 HbDHN1和HbDHN2蛋白的进化树分析 | 第58-59页 |
| 3.4 巴西橡胶树不同组织中HbNAC,HbDHN1和HbDHN2基因的表达模式分析 | 第59-66页 |
| 3.4.1 RNA及cDNA检测 | 第59-60页 |
| 3.4.2 巴西橡胶树不同组织中HbNAC1,HbDHN1和HbDHN2基因的表达规律 | 第60-61页 |
| 3.4.3 HbNAC1,HbDHN1和HbDHN2启动子的功能元件分析 | 第61-62页 |
| 3.4.4 HbNAC1,HbDHN1和HbDHN2在不同非生物胁迫下的表达量差异分析 | 第62-66页 |
| 3.5 HbNAC1的转录因子验证 | 第66-68页 |
| 3.5.1 HbNAC1的亚细胞定位 | 第66-68页 |
| 3.5.2 HbNAC1转录激活活性分析 | 第68页 |
| 3.6 HbNAC1与橡胶树胶乳合成相关基因的表达调控 | 第68-77页 |
| 3.6.1 HbNAC1蛋白与顺式作用元件酵母单杂互作验证 | 第68-70页 |
| 3.6.2 EMSA验证HbNAC1与顺式作用元件(NACRS)互作 | 第70-72页 |
| 3.6.3 HbNAC1蛋白与胶乳合成相关基因启动子互作验证 | 第72-73页 |
| 3.6.4 烟草中HbNAC1与HbSRPP promoter的互作验证 | 第73-77页 |
| 3.7 过表达HbNAC1转基因烟草增强抗旱性 | 第77-81页 |
| 3.7.1 转基因烟草抗旱型表型及生理分析 | 第77-81页 |
| 3.7.2 过表达HbNAC1转基因烟草抗逆相关基因表达分析 | 第81页 |
| 3.8 HbDHN1和HbDHN2的亚细胞定位 | 第81-84页 |
| 3.8.1 定位表达载体的构 | 第81-82页 |
| 3.8.2 亚细胞定位分析 | 第82-84页 |
| 3.9 HbDHN1和HbDHN2基因的在非生物胁迫中的功能分析 | 第84-98页 |
| 3.9.1 橡胶树脱水素HbDHN1在非生物胁迫下增强转基因拟南芥抗逆性 | 第84-90页 |
| 3.9.2 橡胶树脱水素HbDHN2在非生物胁迫下增强转基因拟南芥抗逆性 | 第90-98页 |
| 4 讨论 | 第98-101页 |
| 5 结论 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-109页 |
| 缩略语表 | 第109-110页 |
| 附表 | 第110-113页 |
| 在读傅士期间科研成果 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
