摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-22页 |
1.1 DHV发现历史与分布 | 第11-12页 |
1.2 病原学与分类 | 第12-13页 |
1.2.1 DHAV病毒学分类 | 第12页 |
1.2.2 DHAV的病原学特性 | 第12-13页 |
1.3 DHAV的分子生物学研究 | 第13-14页 |
1.3.1 DHAV基因组结构 | 第13-14页 |
1.3.2 DHAV蛋白的作用及特性 | 第14页 |
1.4 DHAV的流行病学研究 | 第14-15页 |
1.5 DHAV的诊断 | 第15-19页 |
1.5.1 根据临床症状进行初检 | 第15页 |
1.5.2 根据病理剖检变化进行诊断 | 第15-16页 |
1.5.3 病毒的分离 | 第16页 |
1.5.4 血清学诊断技术 | 第16-19页 |
1.6 DHAV的预防与治疗 | 第19页 |
1.6.1 预防 | 第19页 |
1.6.2 治疗 | 第19页 |
1.7 DHV单克隆抗体的制备及其应用 | 第19-20页 |
1.8 抗原表位的研究及应用 | 第20-21页 |
1.9 研究意义和目的 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-35页 |
2.1 材料 | 第22-24页 |
2.1.1 试验动物 | 第22页 |
2.1.2 毒株、菌株、抗体、载体及细胞 | 第22页 |
2.1.3 主要试剂 | 第22页 |
2.1.4 主要溶液的配制 | 第22-23页 |
2.1.5 主要仪器 | 第23-24页 |
2.2 方法 | 第24-35页 |
2.2.1 DHAV-3 VP1蛋白单克隆抗体的制备 | 第24-29页 |
2.2.2 DHAV-3 VP1蛋白单克隆抗体识别抗原优势区的鉴定 | 第29-32页 |
2.2.3 DHAV-3 VP1蛋白单克隆抗体亚型的鉴定 | 第32页 |
2.2.4 DHAV-3 VP1蛋白单克隆抗体反应性的鉴定 | 第32-35页 |
3 结果 | 第35-54页 |
3.1 DHAV-3 VP1蛋白单克隆抗体的制备 | 第35-41页 |
3.1.1 DHAV-3 VP1蛋白的原核表达及鉴定 | 第35-38页 |
3.1.2 小鼠的免疫 | 第38页 |
3.1.3 单克隆抗体I-ELISA检测方法的建立 | 第38-39页 |
3.1.4 阳性杂交瘤细胞株筛选及亚克隆 | 第39-40页 |
3.1.5 单抗细胞上清及小鼠腹水的效价 | 第40页 |
3.1.6 杂交瘤细胞染色体计数结果 | 第40页 |
3.1.7 杂交瘤细胞株的传代稳定性 | 第40-41页 |
3.2 DHAV-3 VP1蛋白单克隆抗体识别抗原优势区的鉴定 | 第41-48页 |
3.2.1 单克隆抗体识别抗原优势区的初步鉴定 | 第41-44页 |
3.2.2 单克隆抗体识别抗原优势区的进一步鉴定 | 第44-48页 |
3.3 DHAV-3 VP1蛋白单克隆抗体亚型的鉴定 | 第48-49页 |
3.4 DHAV-3 VP1蛋白单克隆抗体反应性鉴定 | 第49-54页 |
3.4.1 单克隆抗体与重组病毒rDEV-?Us10-3-VP1的Western blot鉴定 | 第49-50页 |
3.4.2 单克隆抗体与DHAV-1和DHAV-3的Western-blot鉴定 | 第50-51页 |
3.4.3 单克隆抗体的IFA试验 | 第51-53页 |
3.4.4 单克隆抗体的中和试验 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
4.1 DHAV-3 VP1蛋白单抗的制备 | 第54页 |
4.2 DHAV-3 VP1蛋白单抗的鉴定 | 第54页 |
4.3 DHAV-3 VP1蛋白单抗的中和试验 | 第54-55页 |
4.4 DHAV-3 VP1蛋白单抗识别抗原优势区的筛选 | 第55-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-64页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第64页 |