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APOBEC3H蛋白对SVA反转座作用的调控机制研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
中英文缩略词表第8-9页
第1章 绪论第9-25页
    1.1 逆转录转座子简介第9-13页
        1.1.1 DNA转座子第9页
        1.1.2 逆转录转座子第9-13页
    1.2 逆转录转座子对人类的影响第13-16页
        1.2.1 逆转录转座子对基因组的影响第13-14页
        1.2.2 SVA与人类疾病第14-15页
        1.2.3 逆转录转座子的宿主防御机制研究进展第15-16页
    1.3 APOBEC蛋白简介第16-23页
        1.3.1 APOBEC功能介绍第17-19页
        1.3.2 APOBEC结构特点第19-23页
    1.4 主要研究内容及意义第23-25页
第2章 材料和方法第25-41页
    2.1 材料、试剂与仪器第25-29页
        2.1.1 菌株和细胞系第25页
        2.1.2 质粒构建第25-26页
        2.1.3 引物的合成及测序第26页
        2.1.4 相关试剂配方第26-29页
    2.2 实验方法第29-41页
        2.2.1 一般扩增PCR反应第29页
        2.2.2 定点突变PCR反应第29-30页
        2.2.3 快速琼脂糖凝胶DNA回收第30页
        2.2.4 感受态细胞的转化第30-31页
        2.2.5 质粒提取(以无内毒素小提试剂盒为例)第31页
        2.2.6 细胞培养及传代第31-32页
        2.2.7 细胞冻存及复苏第32页
        2.2.8 贴壁细胞转染第32-33页
        2.2.9 蛋白质免疫印迹(western blot)第33-34页
        2.2.10 Trizol法提取RNA(以12 孔板为例)第34-35页
        2.2.11 反转录第35-36页
        2.2.12 实时荧光定量PCR第36-37页
        2.2.13 逆转录转座子活性实验第37-38页
        2.2.14 蔗糖密度梯度离心实验第38页
        2.2.15 免疫荧光第38-39页
        2.2.16 统计学分析第39-41页
第3章 结果与讨论第41-57页
    3.1 APOBEC3H抑制SVA逆转座活性第41-42页
    3.2 APOBEC3H_HapⅡ截短体、突变体的构建及其对SVA的调控作用第42-48页
        3.2.1 APOBEC3H_HapⅡ胞嘧啶脱氨酶结构域和RNA-binding结构域对SVA逆转座的影响第42-44页
        3.2.2 不同A3H_HapⅡ截短体对APOBCE3H_HapⅡ抑制SVA逆转座能力的影响第44-46页
        3.2.3 锌指结构对APOBEC3H蛋白抑制SVA逆转座能力的影响第46-47页
        3.2.4 A3H_HapⅡ其他位点对SVA逆转座能力的影响第47-48页
    3.3 APOBEC3H_HapⅡ结合SVA RNA第48-50页
    3.4 APOBEC3H_HapⅡ促进应激颗粒形成第50-52页
    3.5 MG132对APOBEC3H不稳定亚型抑制SVA逆转座活性的调节作用第52-55页
    3.6 讨论第55-57页
第4章 结论第57-59页
参考文献第59-67页
附录第67-71页
发表论文及参加科研情况第71-73页
致谢第73页

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