| 摘要 | 第4-10页 |
| Abstract | 第10-18页 |
| 中英文缩略词表 | 第22-23页 |
| 引言 | 第23-26页 |
| 第一部分 miR-21在人羊膜间充质干细胞以及AD病鼠中的表达及意义研究 | 第26-42页 |
| 1 前言 | 第26页 |
| 2 实验材料 | 第26-28页 |
| 2.1 标本、细胞和实验动物来源 | 第26-27页 |
| 2.2 实验试剂 | 第27页 |
| 2.3 实验器材 | 第27-28页 |
| 2.4 实验主要配制试剂 | 第28页 |
| 3 实验方法 | 第28-32页 |
| 3.1 人羊膜间充质干细胞hAM-MSCs的分离培养 | 第28-29页 |
| 3.2 hAM-MSCs的鉴定 | 第29-30页 |
| 3.3 qRT-PCR检测miR-21在羊膜上皮细胞与hAM-MSCs中的表达情况 | 第30-31页 |
| 3.4 qRT-PCR检测miR-21在正常小鼠与AD病鼠海马组织中的表达情况 | 第31-32页 |
| 3.5 数据分析 | 第32页 |
| 4 结果 | 第32-35页 |
| 4.1 人羊膜间充质干细胞hAM-MSCs的分离和培养 | 第32页 |
| 4.2 流式细胞术鉴定hAM-MSCs表面标志物 | 第32-33页 |
| 4.3 免疫荧光检测hAM-MSCs表面抗原Vimentin和SSEA-4的表达 | 第33-34页 |
| 4.4 qRT-PCR检测miR-21在人羊膜上皮细胞(hAEC)与hAM-MSCs中的表达情况 | 第34页 |
| 4.5 qRT-PCR检测miR-21在正常小鼠与AD病鼠海马组织中的表达情况 | 第34-35页 |
| 5 讨论 | 第35-36页 |
| 6 结论 | 第36-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 第二部分 miR-21对hAM-MSCs生物学特性以及免疫调节作用的影响研究 | 第42-70页 |
| 1 前言 | 第42-43页 |
| 2 实验材料 | 第43-45页 |
| 2.1 标本来源 | 第43页 |
| 2.2 实验试剂 | 第43-44页 |
| 2.3 实验器材 | 第44页 |
| 2.4 实验主要配制试剂 | 第44-45页 |
| 3 实验方法 | 第45-54页 |
| 3.1 miR-21过表达慢病毒载体的构建 | 第45-48页 |
| 3.2 构建miR-21干扰慢病毒载体 | 第48-50页 |
| 3.3 慢病毒包装和滴定 | 第50-51页 |
| 3.4 LV-miR-21和LV-anti-miR-21、LV-vector分别感染hAM-MSCs | 第51-52页 |
| 3.5 CCK-8检测细胞增殖情况 | 第52页 |
| 3.6 流式细胞术检测细胞周期情况 | 第52页 |
| 3.7 流式细胞术检测细胞凋亡情况 | 第52-53页 |
| 3.8 人外周血单个核细胞的分离 | 第53页 |
| 3.9 hAM-MSCs与人外周血单个核细胞共培养 | 第53页 |
| 3.10 ELISA检测共培养上清中TNF-α、MCP-1和IL-10的含量 | 第53-54页 |
| 3.11 数据分析 | 第54页 |
| 4 结果 | 第54-63页 |
| 4.1 miR-21过表达慢病毒载体的构建 | 第54-55页 |
| 4.2 miR-21干扰慢病毒载体 | 第55-56页 |
| 4.3 慢病毒包装和滴定结果 | 第56-57页 |
| 4.4 慢病毒感染hAM-MSCs效率结果 | 第57页 |
| 4.5 各组hAM-MSCs细胞中miR-21的表达情况 | 第57-58页 |
| 4.6 miR-21对hAM-MSCs细胞增殖能力的影响 | 第58-59页 |
| 4.7 miR-21对hAM-MSCs细胞周期的影响 | 第59-60页 |
| 4.8 miR-21对hAM-MSCs细胞凋亡的影响 | 第60页 |
| 4.9 hAM-MSCs与人外周血单个核细胞共培养细胞形态学观察 | 第60-61页 |
| 4.10 miR-21介导hAM-MSCs对人外周血单个核细胞TNF-α、MCP-1和IL-10分泌的影响 | 第61-63页 |
| 5 讨论 | 第63-65页 |
| 6 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 第三部分 miR-21对hAM-MSCs在AD病鼠脑内迁移以及炎症因子表达的影响研究 | 第70-95页 |
| 1 前言 | 第70-71页 |
| 2 实验材料 | 第71-72页 |
| 2.1 细胞和动物来源 | 第71页 |
| 2.2 实验器材 | 第71-72页 |
| 2.3 实验试剂 | 第72页 |
| 3 实验方法 | 第72-77页 |
| 3.1 APP转基因鼠的鉴定 | 第72-73页 |
| 3.2 第三代hAM-MSCs的尾静脉移植 | 第73页 |
| 3.3 观测静脉移植后hAM-MSCs在小鼠脑部的归巢和存活 | 第73页 |
| 3.4 Morris水迷宫：定位航行和空间探索实验 | 第73-74页 |
| 3.5 免疫组化检测GFAP、Nestin和NSE的表达 | 第74页 |
| 3.6 qRT-PCR检测GFAP、Nestin和NSE的表达情况 | 第74-75页 |
| 3.7 Westernblot | 第75-77页 |
| 4 结果 | 第77-83页 |
| 4.1 APP转基因鼠的鉴定结果 | 第77页 |
| 4.2 hAM-MSCs尾静脉移植后在小鼠脑部的归巢和存活情况 | 第77-78页 |
| 4.3 各组小鼠学习和记忆能力的测定 | 第78-79页 |
| 4.4 AD病鼠海马组织中增殖(Ki67)及凋亡相关蛋白(Caspase-3、Bax、Bcl-2)的表达情况 | 第79-80页 |
| 4.5 免疫组化检测AD病鼠海马组织中GFAP、Nestin和NSE的表达情况 | 第80-81页 |
| 4.6 qRT-PCR和Western blot检测AD病鼠海马组织中GFAP、Nestin和NSE的表达情况 | 第81-82页 |
| 4.7 AD病鼠海马组织中TNF-α、MCP-1和IL-10的表达情况 | 第82-83页 |
| 5 讨论 | 第83-88页 |
| 6 结论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-95页 |
| 全文结论 | 第95-96页 |
| 综述 阿尔茨默病的研究进展 | 第96-119页 |
| 参考文献 | 第110-119页 |
| 个人简历 | 第119页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120页 |
