| 摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩略语 | 第12-16页 |
| 第一部分 ECRG4在胃癌中低表达,并与组织分化及淋巴结转移密切相关 | 第16-34页 |
| 1 前言 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-25页 |
| 2.1 材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第18页 |
| 2.1.2 试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-25页 |
| 2.2.1 GSE62254差异基因分析 | 第20页 |
| 2.2.2 组织RNA抽提及逆转录 | 第20-21页 |
| 2.2.3 实时定量PCR | 第21-22页 |
| 2.2.4 免疫组织化学方法染色 | 第22-23页 |
| 2.2.5 细胞培养及RNA提取 | 第23-24页 |
| 2.2.6 WesternBlot(细胞)：采用免疫印迹技术检测ECRG4蛋白表达水平 | 第24-25页 |
| 2.2.7 统计学处理 | 第25页 |
| 3 实验结果 | 第25-31页 |
| 3.1 数据集GSE62254中差异基因表达情况 | 第25页 |
| 3.2 胃癌细胞株中ECRG4表达情况 | 第25页 |
| 3.3 ECRG4在胃癌组织和癌旁正常组织中的表达情况 | 第25页 |
| 3.4 胃癌组织ECRG4表达水平与肿瘤病理特征的关系 | 第25-31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| 5 结论 | 第33-34页 |
| 第二部分 抑制ECRG4表达可促进胃癌细胞增殖、侵袭能力 | 第34-43页 |
| 1 前言 | 第34-35页 |
| 2 材料与方法 | 第35-38页 |
| 2.1 材料 | 第35页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第35页 |
| 2.1.2 试剂 | 第35页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第35页 |
| 2.2 方法 | 第35-38页 |
| 2.2.1 细胞培养与转染 | 第35-36页 |
| 2.2.2 CCK-8法检测细胞活力 | 第36页 |
| 2.2.3 侵袭实验(Transwellassay) | 第36-37页 |
| 2.2.4 统计学处理 | 第37-38页 |
| 3 实验结果 | 第38-40页 |
| 3.1 siRNA-ECRG4可显著抑制BGC823细胞株中ECRG4的表达 | 第38页 |
| 3.2 转染至ECRG4表达沉默后对BGC823细胞增殖力的影响 | 第38页 |
| 3.3 转染至ECRG4表达沉默后对BGC823细胞侵袭能力的影响 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 第三部分 胃癌中ECRG4表达下调与其启动子区甲基化的初步研究 | 第43-58页 |
| 1 前言 | 第43-44页 |
| 2 材料与方法 | 第44-50页 |
| 2.1 材料 | 第44-45页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第44页 |
| 2.1.2 试剂 | 第44-45页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第45页 |
| 2.2 方法 | 第45-50页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第45页 |
| 2.2.2 MSP(甲基化特异性PCR)检测ECRG4启动子区甲基化状态 | 第45-47页 |
| 2.2.3 药物处理 | 第47页 |
| 2.2.4 RNA抽提及逆转录 | 第47-48页 |
| 2.2.5 qRT-PCR | 第48-49页 |
| 2.2.6 Westernblot | 第49页 |
| 2.2.7 统计学处理 | 第49-50页 |
| 3 实验结果 | 第50-54页 |
| 3.1 启动子异常甲基化导致胃癌细胞ECRG4表达水平下调 | 第50页 |
| 3.2 胃癌细胞株5-Aza-dC去甲基化处理前后的ECRG4基因表达分析 | 第50-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 综述 | 第66-74页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 在学期间科研成绩 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 个人简介 | 第76页 |
