摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩略语 | 第10-13页 |
1 前言 | 第13-14页 |
2 材料和方法 | 第14-24页 |
2.1 实验材料 | 第14-16页 |
2.1.1 细胞系 | 第14页 |
2.1.2 菌株、质粒、shRNA干扰序列、siRNA干扰序列,萤光素酶报告基因质粒、探针 | 第14页 |
2.1.3 试剂及耗材 | 第14-15页 |
2.1.4 实验仪器 | 第15-16页 |
2.2 主要实验方法 | 第16-24页 |
2.2.1 培养基、胰蛋白酶、PBS配置 | 第16页 |
2.2.2 细胞复苏及传代 | 第16-17页 |
2.2.3 细胞转染和干扰 | 第17页 |
2.2.4 稳转细胞系的建立 | 第17页 |
2.2.5 裸鼠成瘤实验 | 第17-18页 |
2.2.6 MTS实验 | 第18页 |
2.2.7 基质胶侵袭实验 | 第18页 |
2.2.8 细胞周期 | 第18-19页 |
2.2.9 RNA的提取 | 第19页 |
2.2.10 RT-qPCR | 第19页 |
2.2.11 萤光素酶报告基因 | 第19-20页 |
2.2.12 凝胶迁移实验 | 第20-21页 |
2.2.13 染色质共沉淀及测序 | 第21页 |
2.2.14 全蛋白提取、测定及配样 | 第21-22页 |
2.2.15 蛋白免疫印迹 | 第22-24页 |
3 结果 | 第24-39页 |
3.1 ZNF326在体内外均具有促进非小细胞肺癌增殖的作用 | 第24-27页 |
3.1.1 ZNF326促进非小细胞肺癌细胞裸鼠皮下成瘤 | 第24页 |
3.1.2 ZNF326促进非小细胞细胞的增殖能力 | 第24-25页 |
3.1.3 ZNF326促进非小细胞细胞的迁移侵袭能力 | 第25-26页 |
3.1.4 ZNF326蛋白的高表达与非小细胞肺癌的低分化和高pTNM分期密切相关 | 第26-27页 |
3.2 ERCC1是ZNF326的靶基因 | 第27-30页 |
3.2.1 ZNF326其可能调控的靶基因 | 第27-29页 |
3.2.2 ERCC1为ZNF326的靶基因 | 第29-30页 |
3.3 ZNF326与ERCC1启动子区的(-875bp~-883bp)序列结合 | 第30-32页 |
3.3.1 ZNF326与ERCC1启动子区的AP1序列结合 | 第30-31页 |
3.3.2 转录激活结构域和C2H2结构域是ZNF326激活ERCC1转录所必须的 | 第31-32页 |
3.4 ZNF326通过ERCC1调节细胞周期蛋白表达促进G2向M期转换 | 第32-36页 |
3.4.1 ZNF326影响非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的相关蛋白表达 | 第32-33页 |
3.4.2 ZNF326通过ERCC1正向调控细胞周期蛋白CyclinB1 | 第33-35页 |
3.4.3 ZNF326通过ERCC1促进非小细胞肺癌的增殖 | 第35-36页 |
3.5 ERCC1通过Chk1促进CyclinB1蛋白合成 | 第36-39页 |
3.5.1 ZNF326通过ERCC1调控Chk1的表达 | 第36-37页 |
3.5.2 Chk1促进CyclinB1蛋白合成 | 第37-39页 |
4 讨论 | 第39-43页 |
5 结论 | 第43-44页 |
本研究性创新性自我评价 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
综述 ZNF326结构及功能的研究进展 | 第48-57页 |
参考文献 | 第53-57页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
个人简历 | 第59页 |