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转录因子ZNF326调控ERCC1表达促进非小细胞肺癌的增殖

摘要第4-7页
Abstract第7-9页
英文缩略语第10-13页
1 前言第13-14页
2 材料和方法第14-24页
    2.1 实验材料第14-16页
        2.1.1 细胞系第14页
        2.1.2 菌株、质粒、shRNA干扰序列、siRNA干扰序列,萤光素酶报告基因质粒、探针第14页
        2.1.3 试剂及耗材第14-15页
        2.1.4 实验仪器第15-16页
    2.2 主要实验方法第16-24页
        2.2.1 培养基、胰蛋白酶、PBS配置第16页
        2.2.2 细胞复苏及传代第16-17页
        2.2.3 细胞转染和干扰第17页
        2.2.4 稳转细胞系的建立第17页
        2.2.5 裸鼠成瘤实验第17-18页
        2.2.6 MTS实验第18页
        2.2.7 基质胶侵袭实验第18页
        2.2.8 细胞周期第18-19页
        2.2.9 RNA的提取第19页
        2.2.10 RT-qPCR第19页
        2.2.11 萤光素酶报告基因第19-20页
        2.2.12 凝胶迁移实验第20-21页
        2.2.13 染色质共沉淀及测序第21页
        2.2.14 全蛋白提取、测定及配样第21-22页
        2.2.15 蛋白免疫印迹第22-24页
3 结果第24-39页
    3.1 ZNF326在体内外均具有促进非小细胞肺癌增殖的作用第24-27页
        3.1.1 ZNF326促进非小细胞肺癌细胞裸鼠皮下成瘤第24页
        3.1.2 ZNF326促进非小细胞细胞的增殖能力第24-25页
        3.1.3 ZNF326促进非小细胞细胞的迁移侵袭能力第25-26页
        3.1.4 ZNF326蛋白的高表达与非小细胞肺癌的低分化和高pTNM分期密切相关第26-27页
    3.2 ERCC1是ZNF326的靶基因第27-30页
        3.2.1 ZNF326其可能调控的靶基因第27-29页
        3.2.2 ERCC1为ZNF326的靶基因第29-30页
    3.3 ZNF326与ERCC1启动子区的(-875bp~-883bp)序列结合第30-32页
        3.3.1 ZNF326与ERCC1启动子区的AP1序列结合第30-31页
        3.3.2 转录激活结构域和C2H2结构域是ZNF326激活ERCC1转录所必须的第31-32页
    3.4 ZNF326通过ERCC1调节细胞周期蛋白表达促进G2向M期转换第32-36页
        3.4.1 ZNF326影响非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的相关蛋白表达第32-33页
        3.4.2 ZNF326通过ERCC1正向调控细胞周期蛋白CyclinB1第33-35页
        3.4.3 ZNF326通过ERCC1促进非小细胞肺癌的增殖第35-36页
    3.5 ERCC1通过Chk1促进CyclinB1蛋白合成第36-39页
        3.5.1 ZNF326通过ERCC1调控Chk1的表达第36-37页
        3.5.2 Chk1促进CyclinB1蛋白合成第37-39页
4 讨论第39-43页
5 结论第43-44页
本研究性创新性自我评价第44-45页
参考文献第45-48页
综述 ZNF326结构及功能的研究进展第48-57页
    参考文献第53-57页
攻读学位期间取得的研究成果第57-58页
致谢第58-59页
个人简历第59页

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