摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-30页 |
1.1 引言 | 第13页 |
1.2 肌肉的结构特征及生长发育研究进展 | 第13-17页 |
1.2.1 肌肉的基本结构特征 | 第13-14页 |
1.2.2 骨骼肌生长发育的特点 | 第14页 |
1.2.3 影响骨骼肌生长发育的因素 | 第14-17页 |
1.3 肌卫星细胞研究进展 | 第17-18页 |
1.4 肌纤维的特征与分类 | 第18-20页 |
1.4.1 肌纤维类型的分类 | 第18-19页 |
1.4.2 不同肌纤维类型的特征 | 第19-20页 |
1.5 肌纤维类型对肉质的影响 | 第20-21页 |
1.6 调控肌纤维类型转化的机制 | 第21-24页 |
1.6.1 生肌调节因子家族 | 第21-22页 |
1.6.2 钙调磷酸酶-活性T细胞核因子(CaN-NFAT) | 第22-23页 |
1.6.3 胰岛素样生长因子(IGFs) | 第23-24页 |
1.6.4 过氧化物酶体增殖受体γ辅激活因子α(Peroxisome proliferative activated receptor-γ activation of auxiliary factor 1 Alpha,PGC-1α) | 第24页 |
1.7 FHL(four and a half LIM domain)基因家族的研究进展 | 第24-29页 |
1.7.1 FHL基因家族的结构特征与生物学特性 | 第24-27页 |
1.7.2 FHL3基因的生物学功能和调控机制 | 第27-29页 |
1.8 本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
第二章 材料和方法 | 第30-52页 |
2.1 试验材料 | 第30-34页 |
2.1.1 试验动物 | 第30页 |
2.1.2 主要仪器和设备 | 第30-31页 |
2.1.3 主要试剂与试剂盒 | 第31-32页 |
2.1.4 常用试剂及配制 | 第32-34页 |
2.1.5 应用的生物信息学网站及分析软件 | 第34页 |
2.2 试验方法 | 第34-52页 |
2.2.1 转基因小鼠的饲养 | 第34页 |
2.2.2 鼠尾DNA提取 | 第34-35页 |
2.2.3 转基因小鼠的PCR检测 | 第35页 |
2.2.4 转基因小鼠的Southern Blot鉴定 | 第35-39页 |
2.2.5 转基因小鼠的形态学检测 | 第39-42页 |
2.2.6 小鼠肌肉拉力和耐疲劳能力的测定 | 第42页 |
2.2.7 小鼠体重检测与生长曲线绘制 | 第42-43页 |
2.2.8 原代肌卫星细胞的分离和纯化 | 第43-44页 |
2.2.9 原代肌卫星细胞的增殖培养 | 第44页 |
2.2.10 细胞的冻存 | 第44页 |
2.2.11 细胞的复苏 | 第44-45页 |
2.2.12 细胞免疫荧光 | 第45页 |
2.2.13 流式细胞仪分析细胞周期 | 第45-46页 |
2.2.14 RTCAxCELLigence系统细胞增殖实时监测 | 第46页 |
2.2.15 细胞及组织中RNA的提取和cDNA制备 | 第46-48页 |
2.2.16 Quantitative real-time PCR分析 | 第48-49页 |
2.2.17 Western blotting分析 | 第49-52页 |
第三章 结果与分析 | 第52-78页 |
3.1 转FHL3基因小鼠的鉴定 | 第52-54页 |
3.1.1 转FHL3基因小鼠的PCR鉴定结果 | 第52页 |
3.1.2 转FHL3基因小鼠的Southern Blot鉴定结果 | 第52-54页 |
3.2 转FHL3基因小鼠的遗传稳定性分析 | 第54-55页 |
3.3 转FHL3基因小鼠的遗传性能的分析 | 第55-56页 |
3.4 FHL3基因在转基因小鼠不同组织中的表达情况 | 第56-58页 |
3.4.1 FHL3基因在转基因小鼠的不同组织中mRNA表达水平 | 第56-57页 |
3.4.2 FHL3基因在转基因小鼠的不同组织中的蛋白表达水平 | 第57-58页 |
3.5 转FHL3基因小鼠体重的变化比较 | 第58-59页 |
3.6 过表达FHL3基因对小鼠心脏组织的影响 | 第59-60页 |
3.7 转FHL3基因小鼠肌肉组织形态学变化 | 第60页 |
3.8 过表达FHL3基因提高转基因小鼠的肌肉量 | 第60-61页 |
3.9 过表达FHL3基因对小鼠肌纤维特征的影响 | 第61-68页 |
3.9.1 转FHL3基因小鼠的肌肉组织HE染色 | 第61-63页 |
3.9.2 转FHL3基因小鼠的肌肉组织免疫荧光 | 第63-65页 |
3.9.3 转FHL3基因小鼠的肌肉组织ATP酶染色 | 第65-66页 |
3.9.4 转FHL3基因小鼠的肌肉组织免疫组化 | 第66-68页 |
3.10 转FHL3基因小鼠的肌肉拉力与耐疲劳能力的分析 | 第68-69页 |
3.11 转FHL3基因小鼠腓肠肌中肌纤维类型标志基因的mRNA表达情况 | 第69-70页 |
3.12 转FHL3基因小鼠腓肠肌中肌纤维类型标志基因的蛋白表达情况 | 第70-71页 |
3.13 转FHL3基因小鼠的腓肠肌中其他相关基因的表达情况 | 第71-74页 |
3.14 转FHL3基因小鼠肌卫星细胞的分离鉴定及增殖能力分析 | 第74-78页 |
第四章 讨论 | 第78-84页 |
4.1 关于转基因动物的鉴定 | 第78页 |
4.2 转基因小鼠中FHL3基因的组织表达特异性分析 | 第78-79页 |
4.3 过表达FHL3基因对肌肉生长发育的影响 | 第79-82页 |
4.4 过表达FHL3基因对肌纤维类型的影响 | 第82-84页 |
第五章 小结 | 第84-85页 |
5.1 主要研究结果 | 第84页 |
5.2 下一步计划 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-100页 |
在读期间发表的文章 | 第100页 |
专利 | 第100-101页 |
致谢 | 第101-103页 |