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FHL3基因调控肌肉生长和肌纤维类型转化的功能研究

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
缩略词表第12-13页
第一章 文献综述第13-30页
    1.1 引言第13页
    1.2 肌肉的结构特征及生长发育研究进展第13-17页
        1.2.1 肌肉的基本结构特征第13-14页
        1.2.2 骨骼肌生长发育的特点第14页
        1.2.3 影响骨骼肌生长发育的因素第14-17页
    1.3 肌卫星细胞研究进展第17-18页
    1.4 肌纤维的特征与分类第18-20页
        1.4.1 肌纤维类型的分类第18-19页
        1.4.2 不同肌纤维类型的特征第19-20页
    1.5 肌纤维类型对肉质的影响第20-21页
    1.6 调控肌纤维类型转化的机制第21-24页
        1.6.1 生肌调节因子家族第21-22页
        1.6.2 钙调磷酸酶-活性T细胞核因子(CaN-NFAT)第22-23页
        1.6.3 胰岛素样生长因子(IGFs)第23-24页
        1.6.4 过氧化物酶体增殖受体γ辅激活因子α(Peroxisome proliferative activated receptor-γ activation of auxiliary factor 1 Alpha,PGC-1α)第24页
    1.7 FHL(four and a half LIM domain)基因家族的研究进展第24-29页
        1.7.1 FHL基因家族的结构特征与生物学特性第24-27页
        1.7.2 FHL3基因的生物学功能和调控机制第27-29页
    1.8 本研究的目的和意义第29-30页
第二章 材料和方法第30-52页
    2.1 试验材料第30-34页
        2.1.1 试验动物第30页
        2.1.2 主要仪器和设备第30-31页
        2.1.3 主要试剂与试剂盒第31-32页
        2.1.4 常用试剂及配制第32-34页
        2.1.5 应用的生物信息学网站及分析软件第34页
    2.2 试验方法第34-52页
        2.2.1 转基因小鼠的饲养第34页
        2.2.2 鼠尾DNA提取第34-35页
        2.2.3 转基因小鼠的PCR检测第35页
        2.2.4 转基因小鼠的Southern Blot鉴定第35-39页
        2.2.5 转基因小鼠的形态学检测第39-42页
        2.2.6 小鼠肌肉拉力和耐疲劳能力的测定第42页
        2.2.7 小鼠体重检测与生长曲线绘制第42-43页
        2.2.8 原代肌卫星细胞的分离和纯化第43-44页
        2.2.9 原代肌卫星细胞的增殖培养第44页
        2.2.10 细胞的冻存第44页
        2.2.11 细胞的复苏第44-45页
        2.2.12 细胞免疫荧光第45页
        2.2.13 流式细胞仪分析细胞周期第45-46页
        2.2.14 RTCAxCELLigence系统细胞增殖实时监测第46页
        2.2.15 细胞及组织中RNA的提取和cDNA制备第46-48页
        2.2.16 Quantitative real-time PCR分析第48-49页
        2.2.17 Western blotting分析第49-52页
第三章 结果与分析第52-78页
    3.1 转FHL3基因小鼠的鉴定第52-54页
        3.1.1 转FHL3基因小鼠的PCR鉴定结果第52页
        3.1.2 转FHL3基因小鼠的Southern Blot鉴定结果第52-54页
    3.2 转FHL3基因小鼠的遗传稳定性分析第54-55页
    3.3 转FHL3基因小鼠的遗传性能的分析第55-56页
    3.4 FHL3基因在转基因小鼠不同组织中的表达情况第56-58页
        3.4.1 FHL3基因在转基因小鼠的不同组织中mRNA表达水平第56-57页
        3.4.2 FHL3基因在转基因小鼠的不同组织中的蛋白表达水平第57-58页
    3.5 转FHL3基因小鼠体重的变化比较第58-59页
    3.6 过表达FHL3基因对小鼠心脏组织的影响第59-60页
    3.7 转FHL3基因小鼠肌肉组织形态学变化第60页
    3.8 过表达FHL3基因提高转基因小鼠的肌肉量第60-61页
    3.9 过表达FHL3基因对小鼠肌纤维特征的影响第61-68页
        3.9.1 转FHL3基因小鼠的肌肉组织HE染色第61-63页
        3.9.2 转FHL3基因小鼠的肌肉组织免疫荧光第63-65页
        3.9.3 转FHL3基因小鼠的肌肉组织ATP酶染色第65-66页
        3.9.4 转FHL3基因小鼠的肌肉组织免疫组化第66-68页
    3.10 转FHL3基因小鼠的肌肉拉力与耐疲劳能力的分析第68-69页
    3.11 转FHL3基因小鼠腓肠肌中肌纤维类型标志基因的mRNA表达情况第69-70页
    3.12 转FHL3基因小鼠腓肠肌中肌纤维类型标志基因的蛋白表达情况第70-71页
    3.13 转FHL3基因小鼠的腓肠肌中其他相关基因的表达情况第71-74页
    3.14 转FHL3基因小鼠肌卫星细胞的分离鉴定及增殖能力分析第74-78页
第四章 讨论第78-84页
    4.1 关于转基因动物的鉴定第78页
    4.2 转基因小鼠中FHL3基因的组织表达特异性分析第78-79页
    4.3 过表达FHL3基因对肌肉生长发育的影响第79-82页
    4.4 过表达FHL3基因对肌纤维类型的影响第82-84页
第五章 小结第84-85页
    5.1 主要研究结果第84页
    5.2 下一步计划第84-85页
参考文献第85-100页
在读期间发表的文章第100页
专利第100-101页
致谢第101-103页

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