摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第9-36页 |
1.1 半夏毒性及其复方配伍减毒研究进展 | 第9-15页 |
1.2 中药的胚胎发育毒性研究进展 | 第15-22页 |
1.3 比较蛋白质组学在中药药理及毒理研究中的应用 | 第22-34页 |
1.4 本课题研究思路 | 第34-36页 |
第2章 生半夏粉及干姜人参半夏粉干预后对小鼠一般毒性及胚胎发育的影响 | 第36-51页 |
2.1 前言 | 第36-37页 |
2.2 材料 | 第37页 |
2.2.1 主要药品与试剂 | 第37页 |
2.2.2 动物 | 第37页 |
2.2.3 中药药材及制备 | 第37页 |
2.3 方法 | 第37-39页 |
2.3.1 亚急性毒性实验 | 第37-38页 |
2.3.2 致畸敏感期毒性实验 | 第38页 |
2.3.3 组织病理学检测 | 第38页 |
2.3.4 流式细胞术检测 | 第38-39页 |
2.3.5 数据统计 | 第39页 |
2.4 结果 | 第39-49页 |
2.4.1 短期重复给药14d对未孕小鼠的影响 | 第39-44页 |
2.4.2 致畸敏感期给药10d对孕鼠及胚胎发育的影响 | 第44-49页 |
2.5 分析与讨论 | 第49-51页 |
第3章 基于iTRAQ标记的蛋白质组学方法分析生半夏粉干预后小鼠胚胎蛋白质表达差异 | 第51-72页 |
3.1 前言 | 第51页 |
3.2 材料 | 第51-52页 |
3.3 方法 | 第52-58页 |
3.3.1 动物分组给药及样本收集 | 第52页 |
3.3.2 蛋白提取及酶解 | 第52-53页 |
3.3.3 iTRAQ标记和RP预分级(reversed-phase fractionation) | 第53-54页 |
3.3.4 LC-MS/MS分析 | 第54-55页 |
3.3.5 数据库搜索及定量分析 | 第55-56页 |
3.3.6 生物信息学分析 | 第56页 |
3.3.7 qRT-PCR验证差异蛋白的mRNA | 第56-57页 |
3.3.8 Western blot验证差异蛋白 | 第57-58页 |
3.3.9 数据统计 | 第58页 |
3.4 结果 | 第58-69页 |
3.4.1 基于iTRAQ的胚胎蛋白质组鉴定结果 | 第58页 |
3.4.2 蛋白定量分析 | 第58-59页 |
3.4.3 差异蛋白质组的功能注释和分类 | 第59-68页 |
3.4.4 qRT-PCR验证结果 | 第68页 |
3.4.5 Western blot验证结果 | 第68-69页 |
3.5 分析与讨论 | 第69-72页 |
第4章 非标记定量蛋白质组学方法分析生半夏粉及复方粉干预后小鼠胚胎或mESC细胞的蛋白表达差异 | 第72-105页 |
4.1 前言 | 第72页 |
4.2 材料 | 第72-73页 |
4.3 方法 | 第73-76页 |
4.3.1 动物分组给药及样本收集 | 第73页 |
4.3.2 mESC的分化培养 | 第73-74页 |
4.3.3 细胞分组给药及样本收集 | 第74页 |
4.3.4 蛋白提取及酶解 | 第74页 |
4.3.5 LC-MS/MS分析 | 第74-75页 |
4.3.6 数据库搜索及定量分析 | 第75-76页 |
4.3.7 生物信息学分析 | 第76页 |
4.4 结果 | 第76-101页 |
4.4.1 基于Label-free的胚胎蛋白质组定量与分析 | 第76-92页 |
4.4.2 基于Label-free的mESC细胞蛋白质组定量与分析 | 第92-101页 |
4.5 分析与讨论 | 第101-105页 |
第5章 全文总结 | 第105-107页 |
附录 | 第107-112页 |
参考文献 | 第112-127页 |
在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第127-128页 |
致谢 | 第128页 |