符号说明 | 第5-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
1 前言 | 第15-24页 |
1.1 滞绿突变体 | 第15-16页 |
1.2 细胞分裂素的代谢和转运 | 第16-19页 |
1.2.1 细胞分裂素的合成 | 第17-18页 |
1.2.2 细胞分裂素的降解与修饰 | 第18页 |
1.2.3 细胞分裂素的转运 | 第18-19页 |
1.3 细胞分裂素延缓植物的衰老 | 第19-21页 |
1.3.1 植物衰老过程中内源细胞分裂素的变化 | 第19页 |
1.3.2 外源细胞分裂素处理延缓植物的衰老 | 第19页 |
1.3.3 细胞分裂素基因工程的研究 | 第19-21页 |
1.4 细胞分裂素与糖代谢 | 第21-22页 |
1.5 细胞分裂素与氮素代谢 | 第22-23页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-35页 |
2.1 实验材料与处理 | 第24-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 材料培养与处理 | 第24页 |
2.1.3 引物 | 第24-25页 |
2.2 分子生物学实验方法 | 第25-30页 |
2.2.1 CTAB法提取植物基因组DNA | 第25页 |
2.2.2 利用Trizol试剂盒提取RNA | 第25-26页 |
2.2.3 反转录cDNA第一条链的合成 | 第26页 |
2.2.4 荧光定量PCR检测基因的表达 | 第26-27页 |
2.2.5 蛋白杂交分析 | 第27-29页 |
2.2.6 Kronos突变体的筛选 | 第29页 |
2.2.7 载体构建及遗传转化 | 第29-30页 |
2.3 植物生理实验方法 | 第30-33页 |
2.3.1 氯化三苯基四氮唑(TTC)法测定根系活力 | 第30页 |
2.3.2 细胞分裂素含量及其活性测定 | 第30页 |
2.3.3 叶绿素含量测定 | 第30-31页 |
2.3.4 类囊体膜多肽SDS-PAGE电泳分析 | 第31页 |
2.3.5 丙二醛(MDA)含量测定 | 第31页 |
2.3.6 抗氧化酶活性测定 | 第31-32页 |
2.3.7 旗叶净光合速率等气体交换参数的测定 | 第32页 |
2.3.8 叶绿素荧光参数的测定 | 第32页 |
2.3.9 可溶性糖含量及其酶活性的测定 | 第32页 |
2.3.10 植物氮素含量及其酶活性的测定 | 第32-33页 |
2.3.11 台盼蓝染色检测 | 第33页 |
2.3.12 游离氨基酸含量的检测 | 第33页 |
2.4 转录组测序及分析 | 第33-34页 |
2.4.1 转录组测序实验流程 | 第33-34页 |
2.4.2 生物信息学分析 | 第34页 |
2.5 统计分析 | 第34-35页 |
3 结果与分析 | 第35-70页 |
3.1 小麦滞绿突变体tasg1的细胞分裂素代谢特征分析 | 第35-44页 |
3.1.1 根系生长的动态及活力分析 | 第35-36页 |
3.1.2 细胞分裂素含量及其相关基因的表达 | 第36-39页 |
3.1.3 抑制剂lovastatin处理对WT与突变体tasg1叶绿素及类囊体膜多肽的影响 | 第39-41页 |
3.1.4 抑制剂lovastatin处理对WT与突变体tasg1抗氧化能力的影响 | 第41-44页 |
3.2 突变体tasg1的籽粒发育与细胞分裂素和蔗糖代谢的关系 | 第44-54页 |
3.2.1 WT与突变体tasg1在灌浆期表型的动态变化 | 第44-46页 |
3.2.2 WT与突变体tasg1灌浆期细胞分裂素含量及细胞周期基因的表达 | 第46-48页 |
3.2.3 WT与突变体tasg1灌浆期可溶性糖的代谢变化 | 第48-53页 |
3.2.4 突变体tasg1中细胞分裂素参与蔗糖转移酶活性的调控 | 第53-54页 |
3.3 突变体tasg1滞绿变异与细胞分裂素和氮素代谢的关系 | 第54-64页 |
3.3.1 WT与突变体tasg1灌浆期的表型及生理特性变化 | 第54-57页 |
3.3.2 RNA-seq分析WT与突变体tasg1细胞分裂素和氮代谢相关差异基因 | 第57-60页 |
3.3.3 细胞分裂素和氮代谢在调控突变体tasg1灌浆后期延缓衰老中的关系 | 第60-64页 |
3.4 cisZOGT1在突变体tasg1灌浆后期延缓衰老的作用 | 第64-70页 |
3.4.1 候选基因cisZOGT1的筛选 | 第64-65页 |
3.4.2 候选基因cisZOGT1的功能鉴定 | 第65-70页 |
4 讨论 | 第70-78页 |
4.1 突变体tasg1的滞绿表型与细胞分裂素代谢变异有关 | 第70-72页 |
4.1.1 细胞分裂素代谢参与根系的生长发育 | 第70-71页 |
4.1.2 细胞分裂素代谢的改变影响突变体tasg1的光合作用和抗氧化能力 | 第71-72页 |
4.2 细胞分裂素通过调控蔗糖代谢影响突变体tasg1的滞绿表型及籽粒大小 | 第72-74页 |
4.2.1 细胞分裂素通过调控细胞分裂影响突变体tasg1籽粒灌浆及体积膨大 | 第72-73页 |
4.2.2 碳水化合物代谢的改变影响突变体tasg1的滞绿表型及后期籽粒灌浆 | 第73页 |
4.2.3 细胞分裂素通过调控蔗糖转移酶影响突变体tasg1滞绿表型 | 第73-74页 |
4.3 细胞分裂素与氮素代谢相互作用调控突变体tasg1灌浆后期延缓衰老的过程 | 第74-76页 |
4.3.1 细胞分裂素与氮素代谢在突变体tasg1叶片衰老中起重要作用 | 第74-75页 |
4.3.2 细胞分裂素与氮素代谢相互作用调控突变体tasg1灌浆后期旗叶延缓衰老 | 第75-76页 |
4.4 cisZOGT1在一定程度上调控细胞分裂素与氮素代谢并参与植物延缓衰老过程 | 第76-78页 |
4.4.1 突变cisZOGT1导致小麦灌浆后期出现延迟衰老的表型 | 第76页 |
4.4.2 过表达cisZOGT1在细胞分裂素和衰老代谢中的复杂机制 | 第76-78页 |
5 结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-88页 |
附录 | 第88-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
攻读学位期间发表的论文及成果 | 第92页 |