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番茄生长发育和逆境响应中自噬的作用及其调控机制

致谢第6-8页
摘要第8-11页
Abstract第11-14页
缩略词表第15-23页
1 引言第23-40页
    1.1 植物自噬的调控和生物学功能第23-30页
        1.1.1 植物自噬的类型和形成第23-25页
        1.1.2 植物自噬的调控第25页
        1.1.3 植物自噬在生长发育中的作用第25-27页
        1.1.4 植物自噬在非生物逆境响应中的功能第27-30页
            1.1.4.1 植物自噬在营养亏缺和衰老中的作用第27-28页
            1.1.4.2 植物自噬在氧化胁迫中的作用第28-29页
            1.1.4.3 植物自噬在渗透胁迫中的作用第29页
            1.1.4.4 植物自噬在极端温度中的作用第29-30页
    1.2 MAPK简述第30-32页
        1.2.1 MAPK的结构第30-31页
        1.2.2 MAPK在生殖发育中的功能第31-32页
    1.3 BRs的信号转导和功能第32-34页
        1.3.1 BRs的信号转导第32-34页
        1.3.2 BRs在逆境胁迫中功能第34页
    1.4 热激转录因子概述第34-37页
        1.4.1 热激转录因子的结构第36页
        1.4.2 热激转录因子的生物学功能第36-37页
    1.5 本文研究的目的和意义第37-40页
2 番茄TOR调控自噬在果实发育中的作用第40-52页
    2.1 材料与方法第41-43页
        2.1.1 实验材料与处理第41页
        2.1.2 番茄TOR基因鉴定第41-42页
        2.1.3 番茄tor突变体构建第42页
        2.1.4 MDC染色第42页
        2.1.5 TEM分析第42-43页
        2.1.6 光合气体交换参数的测定第43页
        2.1.7 坐果率、产量统计和果实种子数统计第43页
        2.1.8 方差分析第43页
    2.2 结果与分析第43-49页
        2.2.1 番茄TOR基因鉴定与蛋白序列分析第43-45页
        2.2.2 番茄tor突变体鉴定第45页
        2.2.3 TOR负调控番茄自噬第45-46页
        2.2.4 TOR对番茄光合作用的影响第46页
        2.2.5 TOR负调控番茄坐果率和果实产量第46-49页
    2.3 讨论第49-52页
3 番茄MAPK12与Atg6互作调控自噬在花粉发育中的作用第52-69页
    3.1 材料与方法第54-58页
        3.1.1 实验材料和实验设计第54页
        3.1.2 酵母双杂交第54-55页
        3.1.3 双分子荧光互补(BiFC)和Atg8f共定位第55页
        3.1.4 总RNA提取和基因表达分析第55页
        3.1.5 番茄mapk12和atg6突变体构建第55-56页
        3.1.6 DAPI染色检测小孢子发育时期第56页
        3.1.7 花粉活力检测第56页
        3.1.8 花粉体外萌发检测第56-57页
        3.1.9 SEM观察花粉形态第57页
        3.1.10 花药TEM分析第57-58页
        3.1.11 花粉半薄切片观察第58页
        3.1.12 花药中H_2O_2含量检测第58页
        3.1.13 方差分析第58页
    3.2 结果与分析第58-65页
        3.2.1 MAPK12与Atg6互作介导自噬体形成第58-59页
        3.2.2 MAPK12和Atg6对花粉活力和花粉体外萌发的影响第59-61页
        3.2.3 MAPK12和Atg6对花粉和花药形态的影响第61-63页
        3.2.4 MAPK12和Atg6对花药H_2O_2的影响第63-64页
        3.2.5 MAPK12和Atg6对果实发育的影响第64-65页
    3.3 讨论第65-69页
4 油菜素内酯调控番茄自噬的机制及在缺氮胁迫中的重要功能第69-90页
    4.1 材料与方法第71-74页
        4.1.1 实验材料和实验设计第71-72页
        4.1.2 总RNA提取和基因表达分析第72页
        4.1.3 MDC染色第72页
        4.1.4 TEM分析第72页
        4.1.5 蛋白提取和免疫印迹第72页
        4.1.6 BZR1过表达载体构建和遗传转化第72-73页
        4.1.7 病毒诱导的基因沉默(VIGS)载体构建和农杆菌介导的病毒侵染第73页
        4.1.8 DAB染色和H_2O_2含量测定第73页
        4.1.9 染色质免疫共沉淀分析(ChIP)第73-74页
        4.1.10 叶绿素含量测定第74页
        4.1.11 方差分析第74页
    4.2 结果与分析第74-86页
        4.2.1 BR诱导自噬的形成和ATGs表达第74-76页
        4.2.2 BZR1介导了BR诱导的自噬及ATGs和RBOH1的表达第76-81页
        4.2.3 BR诱导自噬体的形成依赖于ATGs和RBOH1基因第81-83页
        4.2.4 BZR1诱导的自噬在缺氮胁迫中发挥重要作用第83-86页
    4.3 讨论第86-90页
5 番茄HsfA1a调控自噬在干旱胁迫中的重要功能第90-112页
    5.1 材料与方法第92-96页
        5.1.1 实验材料和实验设计第92-93页
        5.1.2 HsfA1a过表达植株构建第93页
        5.1.3 病毒诱导的基因沉默(VIGS)载体构建和病毒侵染第93页
        5.1.4 叶片气孔开度、相对含水量和电解质渗透率测定第93-94页
        5.1.5 ABA含量测定第94页
        5.1.6 总RNA提取和基因表达分析第94页
        5.1.7 蛋白提取和免疫印迹第94-95页
        5.1.8 MDC染色第95页
        5.1.9 TEM分析第95页
        5.1.10 HsfA1a重组蛋白获取和EMSA分析第95页
        5.1.11 染色质免疫共沉淀分析(ChIP)第95-96页
        5.1.12 方差分析第96页
    5.2 结果与分析第96-106页
        5.2.1 干旱诱导HsfA1a基因的表达及HsfA1a沉默和过表达植株干旱下的表型第96-97页
        5.2.2 干旱胁迫下HsfA1a对气孔开度、ABA含量和泛素化蛋白积累的影响第97-99页
        5.2.3 干旱胁迫对自噬相关基因(ATG)的表达和自噬体的形成的影响第99-102页
        5.2.4 HsfA1a结合ATG10和ATG18f的启动子第102-104页
        5.2.5 HsfA1a诱导的抗旱性和自噬体的形成中依赖ATG10及ATG18f第104-106页
    5.3 讨论第106-112页
6 结论第112-115页
参考文献第115-137页
附图第137-154页
附表第154-161页

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