致谢 | 第6-8页 |
摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
缩略词表 | 第15-23页 |
1 引言 | 第23-40页 |
1.1 植物自噬的调控和生物学功能 | 第23-30页 |
1.1.1 植物自噬的类型和形成 | 第23-25页 |
1.1.2 植物自噬的调控 | 第25页 |
1.1.3 植物自噬在生长发育中的作用 | 第25-27页 |
1.1.4 植物自噬在非生物逆境响应中的功能 | 第27-30页 |
1.1.4.1 植物自噬在营养亏缺和衰老中的作用 | 第27-28页 |
1.1.4.2 植物自噬在氧化胁迫中的作用 | 第28-29页 |
1.1.4.3 植物自噬在渗透胁迫中的作用 | 第29页 |
1.1.4.4 植物自噬在极端温度中的作用 | 第29-30页 |
1.2 MAPK简述 | 第30-32页 |
1.2.1 MAPK的结构 | 第30-31页 |
1.2.2 MAPK在生殖发育中的功能 | 第31-32页 |
1.3 BRs的信号转导和功能 | 第32-34页 |
1.3.1 BRs的信号转导 | 第32-34页 |
1.3.2 BRs在逆境胁迫中功能 | 第34页 |
1.4 热激转录因子概述 | 第34-37页 |
1.4.1 热激转录因子的结构 | 第36页 |
1.4.2 热激转录因子的生物学功能 | 第36-37页 |
1.5 本文研究的目的和意义 | 第37-40页 |
2 番茄TOR调控自噬在果实发育中的作用 | 第40-52页 |
2.1 材料与方法 | 第41-43页 |
2.1.1 实验材料与处理 | 第41页 |
2.1.2 番茄TOR基因鉴定 | 第41-42页 |
2.1.3 番茄tor突变体构建 | 第42页 |
2.1.4 MDC染色 | 第42页 |
2.1.5 TEM分析 | 第42-43页 |
2.1.6 光合气体交换参数的测定 | 第43页 |
2.1.7 坐果率、产量统计和果实种子数统计 | 第43页 |
2.1.8 方差分析 | 第43页 |
2.2 结果与分析 | 第43-49页 |
2.2.1 番茄TOR基因鉴定与蛋白序列分析 | 第43-45页 |
2.2.2 番茄tor突变体鉴定 | 第45页 |
2.2.3 TOR负调控番茄自噬 | 第45-46页 |
2.2.4 TOR对番茄光合作用的影响 | 第46页 |
2.2.5 TOR负调控番茄坐果率和果实产量 | 第46-49页 |
2.3 讨论 | 第49-52页 |
3 番茄MAPK12与Atg6互作调控自噬在花粉发育中的作用 | 第52-69页 |
3.1 材料与方法 | 第54-58页 |
3.1.1 实验材料和实验设计 | 第54页 |
3.1.2 酵母双杂交 | 第54-55页 |
3.1.3 双分子荧光互补(BiFC)和Atg8f共定位 | 第55页 |
3.1.4 总RNA提取和基因表达分析 | 第55页 |
3.1.5 番茄mapk12和atg6突变体构建 | 第55-56页 |
3.1.6 DAPI染色检测小孢子发育时期 | 第56页 |
3.1.7 花粉活力检测 | 第56页 |
3.1.8 花粉体外萌发检测 | 第56-57页 |
3.1.9 SEM观察花粉形态 | 第57页 |
3.1.10 花药TEM分析 | 第57-58页 |
3.1.11 花粉半薄切片观察 | 第58页 |
3.1.12 花药中H_2O_2含量检测 | 第58页 |
3.1.13 方差分析 | 第58页 |
3.2 结果与分析 | 第58-65页 |
3.2.1 MAPK12与Atg6互作介导自噬体形成 | 第58-59页 |
3.2.2 MAPK12和Atg6对花粉活力和花粉体外萌发的影响 | 第59-61页 |
3.2.3 MAPK12和Atg6对花粉和花药形态的影响 | 第61-63页 |
3.2.4 MAPK12和Atg6对花药H_2O_2的影响 | 第63-64页 |
3.2.5 MAPK12和Atg6对果实发育的影响 | 第64-65页 |
3.3 讨论 | 第65-69页 |
4 油菜素内酯调控番茄自噬的机制及在缺氮胁迫中的重要功能 | 第69-90页 |
4.1 材料与方法 | 第71-74页 |
4.1.1 实验材料和实验设计 | 第71-72页 |
4.1.2 总RNA提取和基因表达分析 | 第72页 |
4.1.3 MDC染色 | 第72页 |
4.1.4 TEM分析 | 第72页 |
4.1.5 蛋白提取和免疫印迹 | 第72页 |
4.1.6 BZR1过表达载体构建和遗传转化 | 第72-73页 |
4.1.7 病毒诱导的基因沉默(VIGS)载体构建和农杆菌介导的病毒侵染 | 第73页 |
4.1.8 DAB染色和H_2O_2含量测定 | 第73页 |
4.1.9 染色质免疫共沉淀分析(ChIP) | 第73-74页 |
4.1.10 叶绿素含量测定 | 第74页 |
4.1.11 方差分析 | 第74页 |
4.2 结果与分析 | 第74-86页 |
4.2.1 BR诱导自噬的形成和ATGs表达 | 第74-76页 |
4.2.2 BZR1介导了BR诱导的自噬及ATGs和RBOH1的表达 | 第76-81页 |
4.2.3 BR诱导自噬体的形成依赖于ATGs和RBOH1基因 | 第81-83页 |
4.2.4 BZR1诱导的自噬在缺氮胁迫中发挥重要作用 | 第83-86页 |
4.3 讨论 | 第86-90页 |
5 番茄HsfA1a调控自噬在干旱胁迫中的重要功能 | 第90-112页 |
5.1 材料与方法 | 第92-96页 |
5.1.1 实验材料和实验设计 | 第92-93页 |
5.1.2 HsfA1a过表达植株构建 | 第93页 |
5.1.3 病毒诱导的基因沉默(VIGS)载体构建和病毒侵染 | 第93页 |
5.1.4 叶片气孔开度、相对含水量和电解质渗透率测定 | 第93-94页 |
5.1.5 ABA含量测定 | 第94页 |
5.1.6 总RNA提取和基因表达分析 | 第94页 |
5.1.7 蛋白提取和免疫印迹 | 第94-95页 |
5.1.8 MDC染色 | 第95页 |
5.1.9 TEM分析 | 第95页 |
5.1.10 HsfA1a重组蛋白获取和EMSA分析 | 第95页 |
5.1.11 染色质免疫共沉淀分析(ChIP) | 第95-96页 |
5.1.12 方差分析 | 第96页 |
5.2 结果与分析 | 第96-106页 |
5.2.1 干旱诱导HsfA1a基因的表达及HsfA1a沉默和过表达植株干旱下的表型 | 第96-97页 |
5.2.2 干旱胁迫下HsfA1a对气孔开度、ABA含量和泛素化蛋白积累的影响 | 第97-99页 |
5.2.3 干旱胁迫对自噬相关基因(ATG)的表达和自噬体的形成的影响 | 第99-102页 |
5.2.4 HsfA1a结合ATG10和ATG18f的启动子 | 第102-104页 |
5.2.5 HsfA1a诱导的抗旱性和自噬体的形成中依赖ATG10及ATG18f | 第104-106页 |
5.3 讨论 | 第106-112页 |
6 结论 | 第112-115页 |
参考文献 | 第115-137页 |
附图 | 第137-154页 |
附表 | 第154-161页 |