中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
第1章 绪论 | 第13-22页 |
1.1 香烟与COPD | 第13-15页 |
1.2 氧化应激损伤与COPD | 第15-17页 |
1.3 Keap1-Nrf2-ARE信号通路与氧化损伤 | 第17-19页 |
1.4 蒲公英的药效学研究进展 | 第19-22页 |
第2章 实验材料与方法 | 第22-39页 |
2.1 实验材料 | 第22-26页 |
2.1.1 实验细胞株、实验动物和蒲公英提取物 | 第22-23页 |
2.1.2 主要试剂及耗材 | 第23-25页 |
2.1.3 主要仪器 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-39页 |
2.2.1 体外实验 | 第26-35页 |
2.2.1.1 蒲公英总黄酮抗氧化活性的测定 | 第26页 |
2.2.1.2 细胞培养 | 第26-27页 |
2.2.1.3 香烟烟雾提取物(CSE)细胞培养液的制备 | 第27-28页 |
2.2.1.4 MTT法检测CSE的细胞毒性 | 第28页 |
2.2.1.5 蒲公英总黄酮对细胞增殖活性的影响 | 第28-29页 |
2.2.1.6 ROS荧光检测 | 第29页 |
2.2.1.7 氧化因子检测 | 第29-30页 |
2.2.1.8 RT-PCR检测细胞中Nrf2、SOD1、HO1mRNA相对表达量 | 第30-33页 |
2.2.1.9 Western Blot检测细胞中Nrf2、SOD1、HO1蛋白表达量 | 第33-35页 |
2.2.2 体内实验 | 第35-38页 |
2.2.2.1 蒲公英总黄酮提取物混悬液的制备 | 第35页 |
2.2.2.2 小鼠香烟烟雾所致慢性阻塞性肺疾病模型的制备 | 第35页 |
2.2.2.3 分组及处理 | 第35-36页 |
2.2.2.4 一般情况观察 | 第36页 |
2.2.2.5 肺功能检测 | 第36页 |
2.2.2.6 样本收集 | 第36页 |
2.2.2.7 小鼠肺组织中氧化因子检测 | 第36-37页 |
2.2.2.8 RT-PCR检测肺组织中Nrf2、SOD1、HO1mRNA表达量 | 第37页 |
2.2.2.9 小鼠肺组织HE染色 | 第37页 |
2.2.2.10 小鼠肺组织免疫组化 | 第37-38页 |
2.2.3 统计学分析 | 第38-39页 |
第3章 实验结果及分析 | 第39-60页 |
3.1 体外实验结果 | 第39-47页 |
3.1.1 蒲公英总黄酮的抗氧化活性 | 第39-40页 |
3.1.2 CSE的细胞毒性 | 第40-41页 |
3.1.3 蒲公英总黄酮对细胞增殖活性的影响 | 第41页 |
3.1.4 蒲公英总黄酮对CSE诱导的A549细胞ROS水平的影响 | 第41-42页 |
3.1.5 蒲公英总黄酮对CSE诱导的A549细胞氧化因子水平的影响 | 第42-44页 |
3.1.6 RT-PCR检测A549细胞中Nrf2、SOD1、HO1mRNA相对表达量 | 第44-45页 |
3.1.7 Western Blotting检测细胞中Nrf2、SOD1、HO1蛋白表达量 | 第45-47页 |
3.2 体内实验结果 | 第47-60页 |
3.2.1 COPD小鼠模型一般情况观察及体重变化 | 第47-48页 |
3.2.2 小鼠肺功能检测 | 第48-49页 |
3.2.3 小鼠肺组织氧化因子水平检测 | 第49-50页 |
3.2.4 RT-PCR检测肺组织中Nrf2、SOD1、HO1mRNA表达量 | 第50-51页 |
3.2.5 小鼠肺组织HE染色 | 第51-54页 |
3.2.6 免疫组化检测小鼠肺组织中8-OHdG、Nrf2、SOD1和HO1蛋白的表达 | 第54-60页 |
第4章 讨论 | 第60-63页 |
第5章 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |