| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 前言 | 第10-14页 |
| 材料和方法 | 第14-37页 |
| 1.实验材料与试剂 | 第14-17页 |
| 1.1 细胞系 | 第14页 |
| 1.2 实验动物 | 第14页 |
| 1.3 质粒 | 第14页 |
| 1.4 仪器设备 | 第14-15页 |
| 1.5 实验试剂 | 第15-17页 |
| 2.研究方法 | 第17-37页 |
| 2.1 细胞培养 | 第17页 |
| 2.2 药物配制 | 第17-18页 |
| 2.3 探针质粒构建 | 第18页 |
| 2.4 质粒转化、扩增及提取 | 第18-22页 |
| 2.5 质粒转染 | 第22页 |
| 2.6 激光共聚焦 | 第22-25页 |
| 2.7 siRNA瞬时转染 | 第25页 |
| 2.8 蛋白质抽提及浓度测定 | 第25-26页 |
| 2.9 免疫印迹(WesternBlot) | 第26-29页 |
| 2.10 免疫荧光检测 | 第29-30页 |
| 2.11 流式细胞术检测细胞周期 | 第30-31页 |
| 2.12 AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒 | 第31-32页 |
| 2.13 Caspase-1细胞焦亡检测 | 第32-33页 |
| 2.14 焦亡细胞验证 | 第33页 |
| 2.15 小鼠焦亡模型建立 | 第33-34页 |
| 2.16 小鼠乳腺癌移植瘤模型建立 | 第34页 |
| 2.17 免疫组化IHC | 第34-35页 |
| 2.18 细胞表面积计算 | 第35页 |
| 2.19 渗透压测量 | 第35-36页 |
| 2.20 数据处理 | 第36-37页 |
| 结果 | 第37-75页 |
| 第一部分 荧光张力传感器的设计及探针有效性检测及活细胞内微丝、微管结合调控细胞内血影蛋白骨架的力学活动 | 第37-49页 |
| 1.cpstFRET张力检测模块建立和MF、MT、spectrin荧光张力检测探针的构建 | 第37-38页 |
| 2.免疫印迹、免疫荧光和流式细胞术实验验证探针的表达和对细胞骨架的影响 | 第38-39页 |
| 3.FRAP和FLIP验证探针有效性和准确性 | 第39-40页 |
| 4.ScpS探针的3D成像 | 第40页 |
| 5.细胞外张力存在的情况下,血影蛋白参与细胞膨胀和细胞形态改变的现象 | 第40-41页 |
| 6.微丝和微管力参与了渗透压外界张力存在的血影蛋白骨架张力调控 | 第41-42页 |
| 实验数据及英文注释(一) | 第42-49页 |
| 第二部分 焦亡体外模型,微丝、微管结合调控细胞内血影蛋白骨架张力活动 | 第49-64页 |
| 1.细胞焦亡或凋亡,血影蛋白骨架张力参与细胞骨架稳态的调控 | 第49-50页 |
| 2.焦亡条件,微丝、微管参与调控血影蛋白骨架张力调节的细胞膨胀和出泡 | 第50-51页 |
| 3.焦亡模型,骨架结构对细胞内骨架结构张力的影响甚小 | 第51-53页 |
| 4.焦亡发生中,钙信号对骨架张力的重要作用 | 第53页 |
| 5.抗氧化剂通过消除ROS抑制焦亡骨架张力 | 第53-54页 |
| 6.膜孔和非选择性离子通道而不是渗透压力通过微丝和微管调节血影蛋白骨架张力改变 | 第54页 |
| 7.Caspase-1的敲除抑制焦亡并且改变骨架结构张力 | 第54-56页 |
| 实验数据及英文注释(二) | 第56-64页 |
| 第三部分 焦亡体内模型,微丝、微管结合调控细胞内血影蛋白骨架张力活动 | 第64-75页 |
| 1.细胞焦亡中caspase-1活性被激活 | 第64-65页 |
| 2.体内实验：微丝或者微管的解聚不同程度诱导细胞焦亡的抑制 | 第65页 |
| 3.焦亡体内移植瘤模型,骨架结构对细胞内骨架结构张力的影响甚小 | 第65-66页 |
| 4.乳腺移植瘤模型中焦亡的发生,钙信号对骨架张力的重要作用 | 第66页 |
| 5.乳腺移植瘤模型结合焦亡模型,抗氧化剂通过消除ROS抑制焦亡的发生 | 第66-67页 |
| 6.膜孔和非选择性离子通道而不是渗透压力通过微丝和微管调节血影蛋白骨架张力改变 | 第67-68页 |
| 实验数据及英文注释(三) | 第68-75页 |
| 讨论 | 第75-78页 |
| 小结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-95页 |
| 附录(一) 综述 | 第95-118页 |
| References | 第107-118页 |
| 附录(二) 缩略词表 | 第118-119页 |
| 附录(三) 发表文章 | 第119-120页 |
| 附录(四) 致谢 | 第120页 |
