摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
符号说明 | 第17-18页 |
第一章 绪论 | 第18-42页 |
1.1 肠道的结构和功能特征 | 第18-24页 |
1.1.1 肠道的生理结构 | 第18-20页 |
1.1.2 肠道的功能 | 第20-24页 |
1.2 肠道上皮淋巴细胞的组成、发育和免疫特征 | 第24-32页 |
1.2.1 肠道上皮淋巴细胞的组成 | 第24-25页 |
1.2.2 肠道上皮淋巴细胞的表型特征 | 第25-26页 |
1.2.3 肠道上皮淋巴细胞的发育分化 | 第26-28页 |
1.2.4 肠道上皮淋巴细胞的功能特征 | 第28-32页 |
1.3 肠道共生菌与宿主防御 | 第32-42页 |
1.3.1 肠道共生菌的组成 | 第32-34页 |
1.3.2 肠道共生菌与健康和疾病的关系 | 第34-37页 |
1.3.3 α-防御素在肠道抗菌免疫中的作用 | 第37-42页 |
第二章 引言 | 第42-44页 |
第三章 材料与方法 | 第44-56页 |
3.1 实验材料 | 第44-48页 |
3.1.1 实验小鼠 | 第44页 |
3.1.2 实验细菌 | 第44页 |
3.1.3 细胞分离及培养相关试剂 | 第44-45页 |
3.1.4 抗生素 | 第45页 |
3.1.5 肠道菌群检测相关试剂 | 第45页 |
3.1.6 抗体信息(流式及免疫荧光抗体) | 第45-46页 |
3.1.7 流式检测试剂 | 第46-47页 |
3.1.8 MACS磁珠分选相关试剂 | 第47页 |
3.1.9 免疫荧光相关试剂 | 第47页 |
3.1.10 细菌培养相关试剂 | 第47页 |
3.1.11 PCR相关试剂及引物信息 | 第47-48页 |
3.2 实验仪器 | 第48-49页 |
3.3 实验方法 | 第49-56页 |
3.3.1 小鼠小肠IEL的分离 | 第49页 |
3.3.2 小鼠脾脏细胞分离 | 第49-50页 |
3.3.3 流式细胞术检测细胞表面分子 | 第50页 |
3.3.4 流式细胞术检测细胞胞内分子 | 第50页 |
3.3.5 流式细胞分选 | 第50-51页 |
3.3.6 MACS磁珠分选 | 第51页 |
3.3.7 抗生素水饲喂模型 | 第51页 |
3.3.8 粪便基因组DNA提取 | 第51-52页 |
3.3.9 16SrDNA宏基因组分析 | 第52页 |
3.3.10 双歧杆菌移植 | 第52-53页 |
3.3.11 定量PCR检测双歧杆菌 | 第53页 |
3.3.12 PCR检测防御素相关基因的表达 | 第53-54页 |
3.3.13 抗菌实验 | 第54页 |
3.3.14 免疫荧光 | 第54页 |
3.3.15 基因芯片分析 | 第54-55页 |
3.3.16 数据统计分析 | 第55-56页 |
第四章 实验结果 | 第56-76页 |
4.1 共生菌调控CD8αβ~+IELs在小肠上皮的累积 | 第56-60页 |
4.1.1 肠道共生菌的存在对CD8αβ~+IELs的数量有重要影响 | 第56-57页 |
4.1.2 CD8αβ~+IELs以外其他亚群IEL的数量受共生菌影响不明显 | 第57-58页 |
4.1.3 小鼠成年后小肠上皮中CD8αβ~+IELs数量增多 | 第58-59页 |
4.1.4 抗生素清除肠道菌群后CD8αβ~+IELs明显减少 | 第59-60页 |
4.2 特定共生菌可以诱导CD8αβELs的产生 | 第60-65页 |
4.2.1 肠道共生菌的载量影响CD8αβ~+IELs的产生 | 第60-61页 |
4.2.2 拟杆菌门和放线菌门的细菌在抗生素处理后明显减少 | 第61-62页 |
4.2.3 氨苄青霉素敏感的菌群对CD8αβ~+IELs起到主要调控作用 | 第62-63页 |
4.2.4 双歧杆菌能促进小肠上皮中CD8αβ~+IELs的增多 | 第63-65页 |
4.3 共生菌依赖的CD8αβ~+IELs在肠道上皮的聚集需要Toll样受体信号 | 第65-66页 |
4.4 CD8αβ~+IELs具有潜在的杀菌活性 | 第66-71页 |
4.4.1 CD8αβ~+IELs上调表达一系列抗菌相关基因 | 第66-68页 |
4.4.2 基因芯片结果中可排除潘氏细胞的影响 | 第68-69页 |
4.4.3 CD8αβ~+ IELs在转录水平和蛋白水平均有α-防御素的表达 | 第69页 |
4.4.4 Defensin 1~+ CD8αβ~+IELs的存在依赖肠道共生菌 | 第69-71页 |
4.5 CD8αβ+IELs的分泌产物能抑制细菌的生长 | 第71-76页 |
4.5.1 CD8αβ~+IELs的分泌产物能抑制大肠杆菌的生长 | 第71-72页 |
4.5.2 IL-15能促进IEL整体的抗菌能力 | 第72-73页 |
4.5.3 IL-15可以促进CD8αβ~+IELs的抗菌能力 | 第73-76页 |
第五章 讨论及总结 | 第76-80页 |
参考文献 | 第80-100页 |
致谢 | 第100-102页 |
攻读博士期间的主要研究成果 | 第102页 |