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CD8αβ~+IEL产生抗菌肽及其功能研究

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-10页
符号说明第17-18页
第一章 绪论第18-42页
    1.1 肠道的结构和功能特征第18-24页
        1.1.1 肠道的生理结构第18-20页
        1.1.2 肠道的功能第20-24页
    1.2 肠道上皮淋巴细胞的组成、发育和免疫特征第24-32页
        1.2.1 肠道上皮淋巴细胞的组成第24-25页
        1.2.2 肠道上皮淋巴细胞的表型特征第25-26页
        1.2.3 肠道上皮淋巴细胞的发育分化第26-28页
        1.2.4 肠道上皮淋巴细胞的功能特征第28-32页
    1.3 肠道共生菌与宿主防御第32-42页
        1.3.1 肠道共生菌的组成第32-34页
        1.3.2 肠道共生菌与健康和疾病的关系第34-37页
        1.3.3 α-防御素在肠道抗菌免疫中的作用第37-42页
第二章 引言第42-44页
第三章 材料与方法第44-56页
    3.1 实验材料第44-48页
        3.1.1 实验小鼠第44页
        3.1.2 实验细菌第44页
        3.1.3 细胞分离及培养相关试剂第44-45页
        3.1.4 抗生素第45页
        3.1.5 肠道菌群检测相关试剂第45页
        3.1.6 抗体信息(流式及免疫荧光抗体)第45-46页
        3.1.7 流式检测试剂第46-47页
        3.1.8 MACS磁珠分选相关试剂第47页
        3.1.9 免疫荧光相关试剂第47页
        3.1.10 细菌培养相关试剂第47页
        3.1.11 PCR相关试剂及引物信息第47-48页
    3.2 实验仪器第48-49页
    3.3 实验方法第49-56页
        3.3.1 小鼠小肠IEL的分离第49页
        3.3.2 小鼠脾脏细胞分离第49-50页
        3.3.3 流式细胞术检测细胞表面分子第50页
        3.3.4 流式细胞术检测细胞胞内分子第50页
        3.3.5 流式细胞分选第50-51页
        3.3.6 MACS磁珠分选第51页
        3.3.7 抗生素水饲喂模型第51页
        3.3.8 粪便基因组DNA提取第51-52页
        3.3.9 16SrDNA宏基因组分析第52页
        3.3.10 双歧杆菌移植第52-53页
        3.3.11 定量PCR检测双歧杆菌第53页
        3.3.12 PCR检测防御素相关基因的表达第53-54页
        3.3.13 抗菌实验第54页
        3.3.14 免疫荧光第54页
        3.3.15 基因芯片分析第54-55页
        3.3.16 数据统计分析第55-56页
第四章 实验结果第56-76页
    4.1 共生菌调控CD8αβ~+IELs在小肠上皮的累积第56-60页
        4.1.1 肠道共生菌的存在对CD8αβ~+IELs的数量有重要影响第56-57页
        4.1.2 CD8αβ~+IELs以外其他亚群IEL的数量受共生菌影响不明显第57-58页
        4.1.3 小鼠成年后小肠上皮中CD8αβ~+IELs数量增多第58-59页
        4.1.4 抗生素清除肠道菌群后CD8αβ~+IELs明显减少第59-60页
    4.2 特定共生菌可以诱导CD8αβELs的产生第60-65页
        4.2.1 肠道共生菌的载量影响CD8αβ~+IELs的产生第60-61页
        4.2.2 拟杆菌门和放线菌门的细菌在抗生素处理后明显减少第61-62页
        4.2.3 氨苄青霉素敏感的菌群对CD8αβ~+IELs起到主要调控作用第62-63页
        4.2.4 双歧杆菌能促进小肠上皮中CD8αβ~+IELs的增多第63-65页
    4.3 共生菌依赖的CD8αβ~+IELs在肠道上皮的聚集需要Toll样受体信号第65-66页
    4.4 CD8αβ~+IELs具有潜在的杀菌活性第66-71页
        4.4.1 CD8αβ~+IELs上调表达一系列抗菌相关基因第66-68页
        4.4.2 基因芯片结果中可排除潘氏细胞的影响第68-69页
        4.4.3 CD8αβ~+ IELs在转录水平和蛋白水平均有α-防御素的表达第69页
        4.4.4 Defensin 1~+ CD8αβ~+IELs的存在依赖肠道共生菌第69-71页
    4.5 CD8αβ+IELs的分泌产物能抑制细菌的生长第71-76页
        4.5.1 CD8αβ~+IELs的分泌产物能抑制大肠杆菌的生长第71-72页
        4.5.2 IL-15能促进IEL整体的抗菌能力第72-73页
        4.5.3 IL-15可以促进CD8αβ~+IELs的抗菌能力第73-76页
第五章 讨论及总结第76-80页
参考文献第80-100页
致谢第100-102页
攻读博士期间的主要研究成果第102页

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