CONTENTS | 第5-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 PCV2的分子特征 | 第11-12页 |
1.2 PCV2和其它猪源病毒的混合感染 | 第12-15页 |
1.2.1 猪细环病毒 | 第12页 |
1.2.2 猪细小病毒 | 第12-13页 |
1.2.3 猪繁殖与呼吸综合征病毒 | 第13-14页 |
1.2.4 猪流行性腹泻病毒 | 第14页 |
1.2.5 猪流感病毒 | 第14页 |
1.2.6 猪圆环病毒Ⅰ型 | 第14-15页 |
1.2.7 猪博卡样病毒 | 第15页 |
1.3 PCV2的自然重组 | 第15-16页 |
1.4 PCV2与免疫之间的关系 | 第16-20页 |
1.4.1 PCV2感染与先天性免疫的关系 | 第16-17页 |
1.4.2 PCV2核酸的免疫调节作用 | 第17页 |
1.4.3 PCV2的免疫平衡机制 | 第17-18页 |
1.4.4 PCV2感染与体液免疫应答的关系 | 第18-19页 |
1.4.5 PCV2感染与细胞免疫反应的关系 | 第19-20页 |
1.5 研究的目的与意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-35页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 样品的采集 | 第21页 |
2.1.2 实验动物、细胞和菌株 | 第21页 |
2.1.3 常用的生化试剂 | 第21页 |
2.1.4 主要的仪器设备 | 第21-22页 |
2.2 PCV2感染的分子流行病学调查 | 第22-25页 |
2.2.1 样品总DNA的提取 | 第22页 |
2.2.2 引物设计 | 第22页 |
2.2.3 PCR的扩增 | 第22-23页 |
2.2.4 PCV2 ORF2的克隆 | 第23-24页 |
2.2.5 PCV-2的序列分析 | 第24-25页 |
2.3 PCV2分离株的基因型分析 | 第25-26页 |
2.3.1 引物设计 | 第25页 |
2.3.2 全基因组的PCR扩增 | 第25页 |
2.3.3 全基因组的克隆 | 第25页 |
2.3.4 基因型分析 | 第25-26页 |
2.3.5 PCV2分离株的重组分析 | 第26页 |
2.4 PCV2嵌合病毒的建立 | 第26-35页 |
2.4.1 引物设计 | 第26-27页 |
2.4.2 PCV嵌合株感染性克隆的构建 | 第27-29页 |
2.4.3 PCV嵌合感染性克隆的转染 | 第29-31页 |
2.4.4 嵌合重组病毒的连续传代 | 第31页 |
2.4.5 嵌合重组病毒的PCR检测 | 第31-32页 |
2.4.6 间接免疫荧光(IFA)检测 | 第32-33页 |
2.4.7 嵌合重组病毒TCID50的测定 | 第33页 |
2.4.8 嵌合重组PCV的小鼠接种实验 | 第33-35页 |
3 结果 | 第35-50页 |
3.1 PCV2与TTSUV混合感染的分子流行病学调查分析 | 第35-37页 |
3.1.1 PCV2感染的检测结果 | 第35页 |
3.1.2 PCV2 ORF2基因的序列同源性分析 | 第35-37页 |
3.2 现地PCV2分离株全基因组的克隆与序列分析 | 第37-42页 |
3.2.1 现地PCV2分离株的全基因组的扩增、克隆及鉴定 | 第37页 |
3.2.2 Cap基因的聚类分析结果 | 第37-39页 |
3.2.3 Rep基因的聚类分析结果 | 第39-40页 |
3.2.4 AHF13、AHF14和AHF9的全基因组序列分析 | 第40页 |
3.2.5 AHF13、AHF14和AHF9的重组分析结果 | 第40-42页 |
3.3 PCV嵌合病毒的建立 | 第42-50页 |
3.3.1 重组pcDNA-PCV1-2、pcDNA-PCV2-1和pcNA-PCV2的鉴定 | 第42-44页 |
3.3.2 感染性嵌合克隆株的RT-PCR检测 | 第44-45页 |
3.3.3 嵌合病毒复制动力学的病毒TCID50的测定 | 第45-46页 |
3.3.4 嵌合病毒体外稳定性的检测 | 第46-47页 |
3.3.5 嵌合病毒体内组织学分布的检测 | 第47-48页 |
3.3.6 嵌合病毒体内稳定性的检测 | 第48-49页 |
3.3.7 特异性抗体的检测 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-53页 |
4.1 PCV2感染的调查 | 第50页 |
4.2 PCV2的自然重组 | 第50-51页 |
4.3 PCV嵌合病毒的建立 | 第51-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-66页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第66页 |