| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 前言 | 第12页 |
| 1.2 木质纤维素资源概述 | 第12-16页 |
| 1.2.1 木糖概述 | 第13-16页 |
| 1.3 乙二醇发展概述 | 第16-19页 |
| 1.3.1 乙二醇化学合成 | 第16-18页 |
| 1.3.2 乙二醇的生物合成 | 第18-19页 |
| 1.4 合成生物学 | 第19-21页 |
| 1.4.1 合成生物学的发展 | 第19页 |
| 1.4.2 合成生物学的未来发展战略 | 第19-21页 |
| 1.5 代谢工程 | 第21-22页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第22页 |
| 第二章 乙二醇原始工程菌株的构建及筛选 | 第22-43页 |
| 2.1 引言 | 第22-23页 |
| 2.2 实验材料 | 第23-26页 |
| 2.2.1 质粒,菌株与引物 | 第23-25页 |
| 2.2.2 试剂 | 第25页 |
| 2.2.3 培养基 | 第25-26页 |
| 2.2.4 仪器 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-33页 |
| 2.3.1 各外源基因的克隆 | 第26-29页 |
| 2.3.2 表达载体的构建 | 第29-31页 |
| 2.3.3 蛋白表达检测 | 第31-32页 |
| 2.3.4 摇瓶发酵培养 | 第32-33页 |
| 2.3.5 发酵产物的检测 | 第33页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第33-42页 |
| 2.4.1 代谢途径的选择及构建 | 第33-34页 |
| 2.4.2 重组载体的构建 | 第34-38页 |
| 2.4.3 蛋白的表达、纯化及电泳检测 | 第38-40页 |
| 2.4.4 生物合成EG的代谢途径评估及优化 | 第40-42页 |
| 2.4.4.1 代谢途径初步的评估 | 第40页 |
| 2.4.4.2 副产物乙酸的调控 | 第40-42页 |
| 2.5 本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 乙二醇工程菌株的优化及发酵 | 第43-62页 |
| 3.1 引言 | 第43-44页 |
| 3.2 实验材料 | 第44-47页 |
| 3.2.1 质粒,菌株与引物 | 第44-45页 |
| 3.2.2 试剂 | 第45-46页 |
| 3.2.3 培养基 | 第46页 |
| 3.2.4 仪器 | 第46-47页 |
| 3.3 实验方法 | 第47-52页 |
| 3.3.1 △aldA同源片段的构建 | 第47-48页 |
| 3.3.2 pRE112-△aldA敲除菌株的构建 | 第48-50页 |
| 3.3.3 自杀质粒pRE112介导的aldA基因敲除 | 第50-51页 |
| 3.3.4 重组菌株的制备 | 第51页 |
| 3.3.5 摇瓶发酵发酵 | 第51-52页 |
| 3.3.6 分批补料发酵 | 第52页 |
| 3.4 实验结果 | 第52-59页 |
| 3.4.0 重组质粒pRE112-△aldA的构建 | 第52-54页 |
| 3.4.1 aldA敲除菌株的构建 | 第54-55页 |
| 3.4.2 摇瓶发酵结果 | 第55-56页 |
| 3.4.3 分批补料发酵 | 第56-59页 |
| 3.5 本章小结 | 第59-62页 |
| 第四章 总结 | 第62-64页 |
| 附录 | 第64-71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第75-76页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第76页 |
