| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-24页 |
| 1 产酸克雷伯氏菌 | 第12-13页 |
| 1.1 产酸克雷伯氏菌的生理特性 | 第12页 |
| 1.2 产酸克雷伯氏菌的应用 | 第12-13页 |
| 2 丙酮酸 | 第13-22页 |
| 2.1 丙酮酸的简介 | 第13页 |
| 2.2 丙酮酸的用途 | 第13-14页 |
| 2.3 丙酮酸的代谢途径研究 | 第14-17页 |
| 2.4 丙酮酸的生产工艺 | 第17-20页 |
| 2.4.1 化学合成法 | 第18-19页 |
| 2.4.2 生物技术合成法 | 第19-20页 |
| 2.5 各菌株发酵生产丙酮酸能力比较 | 第20-22页 |
| 3 本论文的主要研究意义和内容 | 第22-24页 |
| 第二章 产酸克雷伯氏菌代谢途径重构生产丙酮酸 | 第24-44页 |
| 1 引言 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-35页 |
| 2.1 本章所用的药品与试剂 | 第25页 |
| 2.2 本章所用的仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.3 本章所用的菌株及质粒 | 第26-27页 |
| 2.4 本章所用的引物 | 第27-28页 |
| 2.5 培养基及培养条件 | 第28-29页 |
| 2.6 基因敲除 | 第29-32页 |
| 2.7 大肠杆菌感受态的制备 | 第32-33页 |
| 2.8 酶活力测定 | 第33-34页 |
| 2.9 样品分析检测 | 第34-35页 |
| 3 结果与讨论 | 第35-41页 |
| 3.1 产酸克雷伯氏菌PDL-5、PDL-6及PDL-7突变株乳酸脱氢酶活性比较 | 第35-36页 |
| 3.2 产酸克雷伯氏菌敲除乳酸生成途径 | 第36-38页 |
| 3.3 产酸克雷伯氏菌基因pf1B的敲除降低乙酸的产量 | 第38-39页 |
| 3.4 表达NADH氧化酶NOX实现NAD~+的再生 | 第39-41页 |
| 4 本章小结 | 第41-44页 |
| 第三章 产酸克雷伯氏菌发酵条件优化 | 第44-54页 |
| 1 引言 | 第44页 |
| 2 材料与方法 | 第44-47页 |
| 2.1 本章所用的药品及试剂 | 第44页 |
| 2.2 本章所用的仪器设备 | 第44-45页 |
| 2.3 本章所用的菌株 | 第45页 |
| 2.4 培养基及培养条件 | 第45-47页 |
| 2.4.1 培养基及缓冲液 | 第45-47页 |
| 2.4.2 培养条件 | 第47页 |
| 2.5 样品分析检测 | 第47页 |
| 3 结果与讨论 | 第47-52页 |
| 3.1 产酸克雷伯氏菌发酵培养基优化 | 第47-49页 |
| 3.2 产酸克雷伯氏菌发酵条件转速优化 | 第49-50页 |
| 3.3 产酸克雷伯氏菌发酵条件通气量优化 | 第50-51页 |
| 3.4 产酸克雷伯氏菌发酵条件中和剂优化 | 第51页 |
| 3.5 产酸克雷伯氏菌PDL-7 Δpf1BΔ1dhD::nox分批补料发酵 | 第51-52页 |
| 4 本章小结 | 第52-54页 |
| 第四章 改造产酸克雷伯氏菌共代谢半乳糖和葡萄糖 | 第54-64页 |
| 1 引言 | 第54页 |
| 2 材料与方法 | 第54-59页 |
| 2.1 本章所用的药品及试剂 | 第54-55页 |
| 2.2 本章所用的仪器设备 | 第55页 |
| 2.3 本章所用的菌株与质粒 | 第55-56页 |
| 2.4 本章所用的引物 | 第56-57页 |
| 2.5 培养基及培养条件 | 第57页 |
| 2.5.1 培养基及缓冲液 | 第57页 |
| 2.5.2 培养条件 | 第57页 |
| 2.6 基因敲除 | 第57-58页 |
| 2.7 基因表达 | 第58-59页 |
| 2.8 样品分析检测 | 第59页 |
| 3 结果与讨论 | 第59-63页 |
| 3.1 过表达半乳糖透性酶对葡萄糖和半乳糖代谢的影响 | 第59-61页 |
| 3.2 敲除mgs促进产酸克雷伯氏菌糖代谢的能力 | 第61-63页 |
| 4 本章小结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-78页 |
| 总结语 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第82页 |
