符号说明 | 第5-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 前言 | 第13-27页 |
1.1 叶绿素的种类 | 第13页 |
1.2 叶绿素降解 | 第13-15页 |
1.2.1 叶绿素降解的意义 | 第13-14页 |
1.2.2 叶绿素降解途径 | 第14-15页 |
1.3 SGRs蛋白 | 第15-22页 |
1.3.1 SGRs蛋白的发现 | 第15-16页 |
1.3.2 SGRs蛋白功能 | 第16-21页 |
1.3.3 SGRs对光合系统的影响 | 第21页 |
1.3.4 SGRs基因调控网络 | 第21-22页 |
1.4 脱落酸(ABA) | 第22-25页 |
1.4.1 ABA促进叶片衰老的信号通路 | 第23页 |
1.4.2 ABA-insensitive(ABI) | 第23-25页 |
1.5 研究目的及意义 | 第25-27页 |
2 材料与方法 | 第27-48页 |
2.1 材料 | 第27-29页 |
2.1.1 植物材料 | 第27页 |
2.1.2 载体和菌株 | 第27页 |
2.1.3 各种酶及生化试剂 | 第27页 |
2.1.4 实验引物 | 第27-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-48页 |
2.2.1 植物总RNA的提取 | 第29页 |
2.2.2 RNA反转录 | 第29-30页 |
2.2.3 番茄SlSGRL基因的克隆 | 第30-31页 |
2.2.4 目的片段回收 | 第31页 |
2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
2.2.6 连接反应 | 第32-33页 |
2.2.7 大肠杆菌转化 | 第33页 |
2.2.8 大肠杆菌质粒提取 | 第33-34页 |
2.2.9 质粒酶切 | 第34页 |
2.2.10 正反义表达载体的构建 | 第34页 |
2.2.11 农杆菌感受态细胞制备及转化 | 第34-35页 |
2.2.12 农杆菌介导番茄转化 | 第35-37页 |
2.2.13 转基因番茄植株的检测 | 第37-38页 |
2.2.14 SlSGRL蛋白亚细胞定位 | 第38-40页 |
2.2.15 蛋白的提取及WesternBlot | 第40-42页 |
2.2.16 GUS染色分析 | 第42-43页 |
2.2.17 酵母实验 | 第43-45页 |
2.2.18 凝胶电泳迁移实验(EMSA) | 第45-47页 |
2.2.19 叶绿体色素含量的测定 | 第47-48页 |
3 结果与分析 | 第48-62页 |
3.1 SlSGRL基因的分离及其特征 | 第48-50页 |
3.1.1 SlSGRL基因的克隆 | 第48页 |
3.1.2 SlSGRL核苷酸和氨基酸序列生物信息分析 | 第48-50页 |
3.2 SlSGRL蛋白亚细胞定位 | 第50-51页 |
3.3 SlSGRL表达模式分析 | 第51-53页 |
3.3.1 SlSGRL基因在不同组织中的表达分析 | 第51-52页 |
3.3.2 SlSGRL在不同处理条件下的表达模式分析 | 第52-53页 |
3.4 SlSGRL基因在番茄中的遗传转化 | 第53-54页 |
3.5 过表达SlSGRL加速ABA诱导的番茄叶片衰老 | 第54-56页 |
3.6 SlSGRL促进了衰老叶片类囊体结构的降解 | 第56-57页 |
3.7 SlSGRL在植物体内发挥功能的方式 | 第57-59页 |
3.7.1 原核诱导SlSGRL蛋白不具有酶活性 | 第57-58页 |
3.7.2 体外SlSGRL与CCEs及LHCPs无相互作用 | 第58-59页 |
3.8 ABA通过ABI5和ABI5-like调控SlSGRL基因表达 | 第59-62页 |
3.8.1 SlSGRL基因启动子受ABI5和ABI5-like的调控表达 | 第59-60页 |
3.8.2 ABI5和ABI5-like直接作用于SlSGRL的启动子 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-65页 |
4.1 SlSGRL基因编码了叶绿体定位的SGR-like蛋白 | 第62页 |
4.2 植物体中SlSGRL的可能作用方式 | 第62-63页 |
4.3 SGRL促进衰老叶片叶绿素及叶绿体结构的降解 | 第63-64页 |
4.4 SGRL在ABA诱导的叶片衰老中的作用机制 | 第64-65页 |
5 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读学位期间发表论文 | 第74页 |