目录 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
本文缩写词 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-25页 |
1 小麦赤霉病的危害 | 第12-13页 |
2 小麦赤霉病病原学的研究进展 | 第13-19页 |
2.1 病原 | 第13-14页 |
2.2 病症 | 第14-15页 |
2.3 病害循环 | 第15页 |
2.4 小麦赤霉病菌的致病因子 | 第15-16页 |
2.5 发病条件 | 第16-17页 |
2.6 小麦赤霉病病原菌的检测 | 第17-18页 |
2.7 病害控制 | 第18-19页 |
3 小麦赤霉病菌拮抗微生物的筛选及抗菌物质的研究进展 | 第19-21页 |
3.1 小麦赤霉病菌拮抗微生物筛选的研究 | 第19-20页 |
3.2 小麦赤霉病菌拮抗菌株的抗菌物质的研究进展 | 第20-21页 |
4 小麦赤霉病拮抗菌防治病害的作用机制 | 第21-24页 |
4.1 抗生作用(Antibiotics) | 第21-22页 |
4.2 竞争作用(Competition) | 第22页 |
4.3 通过增加无机营养的溶解度促进寄主植物的生长发育来抵抗病菌的侵染 | 第22-23页 |
4.4 诱导植物的系统抗性 | 第23-24页 |
5 本研究的必要性 | 第24-25页 |
第二章 小麦赤霉病菌拮抗菌的分离 | 第25-42页 |
1 材料与方法 | 第25-33页 |
1.1 材料 | 第25-27页 |
1.1.1 菌种及来源 | 第25页 |
1.1.2 主要仪器 | 第25-26页 |
1.1.3 主要试剂 | 第26页 |
1.1.4 主要培养基 | 第26-27页 |
1.2 方法 | 第27-33页 |
1.2.1 土样中细菌的分离 | 第27页 |
1.2.2 具有拮抗作用的细菌的拮抗力的测定 | 第27-28页 |
1.2.3 小麦赤霉病菌拮抗菌活性的测定 | 第28页 |
1.2.4 拮抗谱的测定 | 第28页 |
1.2.5 拮抗菌液对小麦赤霉菌菌丝的影响 | 第28页 |
1.2.6 拮抗细菌无菌发酵液对赤霉菌的抑制作用 | 第28-29页 |
1.2.7 拮抗菌株的形态结构及生理生化试验 | 第29-31页 |
1.2.7.1 形态结构的观察 | 第29页 |
1.2.7.2 生理生化特征实验 | 第29-31页 |
1.2.8 田间试验 | 第31页 |
1.2.9 16SrRNA基因鉴定 | 第31-33页 |
1.2.9.1 菌体总DNA的提取 | 第31-32页 |
1.2.9.2 菌株16SrDNA的PCR扩增 | 第32-33页 |
2 结果 | 第33-40页 |
2.1 拮抗菌的分离和筛选 | 第33页 |
2.2 拮抗菌拮抗力的测定 | 第33-34页 |
2.3 菌株的拮抗谱 | 第34-35页 |
2.4 拮抗菌液对小麦赤霉病菌的影响 | 第35-37页 |
2.4.1 拮抗菌对小麦赤霉病菌丝干重的影响 | 第35-36页 |
2.4.2 拮抗菌对小麦赤霉病菌丝形态的影响 | 第36页 |
2.4.3 拮抗细菌无菌发酵液对赤霉菌的抑制作用 | 第36-37页 |
2.5 拮抗菌株的形态结构及生理生化试验 | 第37-38页 |
2.5.1 形态结构的观察 | 第37-38页 |
2.5.2 菌株的生理生化特征 | 第38页 |
2.6 田间试验 | 第38-39页 |
2.7 拮抗菌株的分子鉴定 | 第39-40页 |
3 讨论 | 第40-42页 |
第三章 菌株发酵条件的优化 | 第42-52页 |
1 材料与方法 | 第42-45页 |
1.1 菌种及其来源 | 第42页 |
1.2 主要试剂及仪器 | 第42页 |
1.3 培养基 | 第42-43页 |
1.4 菌种活化及拮抗细菌液体培养液的制备 | 第43页 |
1.5 抑菌活性的测定 | 第43页 |
1.6 不同碳源对菌株AF0907抑菌活性的影响 | 第43-44页 |
1.7 不同氮源对菌株AF0907抑菌活性的影响 | 第44页 |
1.8 培养基配方的优化 | 第44页 |
1.9 发酵条件的优化 | 第44-45页 |
1.9.1 起始培养基的pH值 | 第44页 |
1.9.2 培养时间的确定 | 第44页 |
1.9.3 培养温度的确定 | 第44页 |
1.9.4 接种量的确定 | 第44-45页 |
1.9.5 装液量的确定 | 第45页 |
2 实验结果 | 第45-51页 |
2.1 拮抗菌发酵上清液的抑菌活性测定 | 第45页 |
2.2 不同碳源对菌株AF0907抑菌活性的影响 | 第45-46页 |
2.3 不同氮源对菌株AF0907抑菌活性的影响 | 第46页 |
2.4 培养基配方的优化 | 第46-51页 |
2.4.1 L_9(3~4)正交设计方案及结果 | 第47-48页 |
2.4.2 最适培养基的验证 | 第48页 |
2.4.3 发酵条件的优化 | 第48-51页 |
3 讨论 | 第51-52页 |
第四章 抗菌物质的初步研究 | 第52-59页 |
1 材料与方法 | 第52-54页 |
1.1 菌株 | 第52页 |
1.2 培养基 | 第52页 |
1.3 主要试剂及仪器 | 第52-53页 |
1.4 抗菌物质的提取及抑菌活性测定 | 第53页 |
1.4.1 菌株AF0907产生抗菌物质部位的检测 | 第53页 |
1.4.2 粗体液的制备及抑菌活性测定 | 第53页 |
1.4.3 抗菌物质类型的初步确定 | 第53页 |
1.5 抗菌蛋白粗提物稳定性试验 | 第53-54页 |
1.5.1 抗菌蛋白粗提物热稳定性的测定 | 第53-54页 |
1.5.2 抗菌蛋白粗提物对pH的稳定性 | 第54页 |
1.5.3 抗菌蛋白粗提物对蛋白酶K的稳定性 | 第54页 |
1.5.4 抗菌蛋白粗提物对氯仿的稳定性 | 第54页 |
2 实验结果 | 第54-57页 |
2.1 菌株产生抗真菌物质部位的检测 | 第54-55页 |
2.2 硫酸铵饱和度的确定 | 第55页 |
2.3 抗菌类型的确定 | 第55页 |
2.4 抗菌蛋白的稳定性试验 | 第55-57页 |
2.4.1 对热的稳定性测定 | 第55-56页 |
2.4.2 对pH的稳定性测定 | 第56-57页 |
2.4.3 对蛋白酶K的稳定性测定 | 第57页 |
2.4.4 对氯仿的稳定性测定 | 第57页 |
3 讨论 | 第57-59页 |
第五章 抗菌蛋白的纯化 | 第59-66页 |
1 材料与方法 | 第59-62页 |
1.1 菌株 | 第59页 |
1.2 试剂 | 第59页 |
1.3 DEAE-52纤维素柱层析 | 第59-60页 |
1.4 SDS-PAGE凝胶电泳纯度鉴定及确定酶分子量 | 第60-62页 |
1.4.1 试剂的配制 | 第60-61页 |
1.4.2 操作 | 第61-62页 |
2 结果 | 第62-65页 |
2.1 DEAE-52纤维素柱层析结果 | 第62-63页 |
2.2 SDS-PAGE凝胶电泳分析 | 第63-64页 |
2.3 N-末端氨基酸的高效液相色谱(HLPC)分析 | 第64-65页 |
3 讨论 | 第65-66页 |
全文总结 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第73-74页 |
致谢 | 第74页 |