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小麦赤霉病菌拮抗菌的分离鉴定、发酵条件的优化及抗菌物质的研究

目录第4-7页
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
本文缩写词第11-12页
第一章 文献综述第12-25页
    1 小麦赤霉病的危害第12-13页
    2 小麦赤霉病病原学的研究进展第13-19页
        2.1 病原第13-14页
        2.2 病症第14-15页
        2.3 病害循环第15页
        2.4 小麦赤霉病菌的致病因子第15-16页
        2.5 发病条件第16-17页
        2.6 小麦赤霉病病原菌的检测第17-18页
        2.7 病害控制第18-19页
    3 小麦赤霉病菌拮抗微生物的筛选及抗菌物质的研究进展第19-21页
        3.1 小麦赤霉病菌拮抗微生物筛选的研究第19-20页
        3.2 小麦赤霉病菌拮抗菌株的抗菌物质的研究进展第20-21页
    4 小麦赤霉病拮抗菌防治病害的作用机制第21-24页
        4.1 抗生作用(Antibiotics)第21-22页
        4.2 竞争作用(Competition)第22页
        4.3 通过增加无机营养的溶解度促进寄主植物的生长发育来抵抗病菌的侵染第22-23页
        4.4 诱导植物的系统抗性第23-24页
    5 本研究的必要性第24-25页
第二章 小麦赤霉病菌拮抗菌的分离第25-42页
    1 材料与方法第25-33页
        1.1 材料第25-27页
            1.1.1 菌种及来源第25页
            1.1.2 主要仪器第25-26页
            1.1.3 主要试剂第26页
            1.1.4 主要培养基第26-27页
        1.2 方法第27-33页
            1.2.1 土样中细菌的分离第27页
            1.2.2 具有拮抗作用的细菌的拮抗力的测定第27-28页
            1.2.3 小麦赤霉病菌拮抗菌活性的测定第28页
            1.2.4 拮抗谱的测定第28页
            1.2.5 拮抗菌液对小麦赤霉菌菌丝的影响第28页
            1.2.6 拮抗细菌无菌发酵液对赤霉菌的抑制作用第28-29页
            1.2.7 拮抗菌株的形态结构及生理生化试验第29-31页
                1.2.7.1 形态结构的观察第29页
                1.2.7.2 生理生化特征实验第29-31页
            1.2.8 田间试验第31页
            1.2.9 16SrRNA基因鉴定第31-33页
                1.2.9.1 菌体总DNA的提取第31-32页
                1.2.9.2 菌株16SrDNA的PCR扩增第32-33页
    2 结果第33-40页
        2.1 拮抗菌的分离和筛选第33页
        2.2 拮抗菌拮抗力的测定第33-34页
        2.3 菌株的拮抗谱第34-35页
        2.4 拮抗菌液对小麦赤霉病菌的影响第35-37页
            2.4.1 拮抗菌对小麦赤霉病菌丝干重的影响第35-36页
            2.4.2 拮抗菌对小麦赤霉病菌丝形态的影响第36页
            2.4.3 拮抗细菌无菌发酵液对赤霉菌的抑制作用第36-37页
        2.5 拮抗菌株的形态结构及生理生化试验第37-38页
            2.5.1 形态结构的观察第37-38页
            2.5.2 菌株的生理生化特征第38页
        2.6 田间试验第38-39页
        2.7 拮抗菌株的分子鉴定第39-40页
    3 讨论第40-42页
第三章 菌株发酵条件的优化第42-52页
    1 材料与方法第42-45页
        1.1 菌种及其来源第42页
        1.2 主要试剂及仪器第42页
        1.3 培养基第42-43页
        1.4 菌种活化及拮抗细菌液体培养液的制备第43页
        1.5 抑菌活性的测定第43页
        1.6 不同碳源对菌株AF0907抑菌活性的影响第43-44页
        1.7 不同氮源对菌株AF0907抑菌活性的影响第44页
        1.8 培养基配方的优化第44页
        1.9 发酵条件的优化第44-45页
            1.9.1 起始培养基的pH值第44页
            1.9.2 培养时间的确定第44页
            1.9.3 培养温度的确定第44页
            1.9.4 接种量的确定第44-45页
            1.9.5 装液量的确定第45页
    2 实验结果第45-51页
        2.1 拮抗菌发酵上清液的抑菌活性测定第45页
        2.2 不同碳源对菌株AF0907抑菌活性的影响第45-46页
        2.3 不同氮源对菌株AF0907抑菌活性的影响第46页
        2.4 培养基配方的优化第46-51页
            2.4.1 L_9(3~4)正交设计方案及结果第47-48页
            2.4.2 最适培养基的验证第48页
            2.4.3 发酵条件的优化第48-51页
    3 讨论第51-52页
第四章 抗菌物质的初步研究第52-59页
    1 材料与方法第52-54页
        1.1 菌株第52页
        1.2 培养基第52页
        1.3 主要试剂及仪器第52-53页
        1.4 抗菌物质的提取及抑菌活性测定第53页
            1.4.1 菌株AF0907产生抗菌物质部位的检测第53页
            1.4.2 粗体液的制备及抑菌活性测定第53页
            1.4.3 抗菌物质类型的初步确定第53页
        1.5 抗菌蛋白粗提物稳定性试验第53-54页
            1.5.1 抗菌蛋白粗提物热稳定性的测定第53-54页
            1.5.2 抗菌蛋白粗提物对pH的稳定性第54页
            1.5.3 抗菌蛋白粗提物对蛋白酶K的稳定性第54页
            1.5.4 抗菌蛋白粗提物对氯仿的稳定性第54页
    2 实验结果第54-57页
        2.1 菌株产生抗真菌物质部位的检测第54-55页
        2.2 硫酸铵饱和度的确定第55页
        2.3 抗菌类型的确定第55页
        2.4 抗菌蛋白的稳定性试验第55-57页
            2.4.1 对热的稳定性测定第55-56页
            2.4.2 对pH的稳定性测定第56-57页
            2.4.3 对蛋白酶K的稳定性测定第57页
            2.4.4 对氯仿的稳定性测定第57页
    3 讨论第57-59页
第五章 抗菌蛋白的纯化第59-66页
    1 材料与方法第59-62页
        1.1 菌株第59页
        1.2 试剂第59页
        1.3 DEAE-52纤维素柱层析第59-60页
        1.4 SDS-PAGE凝胶电泳纯度鉴定及确定酶分子量第60-62页
            1.4.1 试剂的配制第60-61页
            1.4.2 操作第61-62页
    2 结果第62-65页
        2.1 DEAE-52纤维素柱层析结果第62-63页
        2.2 SDS-PAGE凝胶电泳分析第63-64页
        2.3 N-末端氨基酸的高效液相色谱(HLPC)分析第64-65页
    3 讨论第65-66页
全文总结第66-67页
参考文献第67-73页
攻读硕士期间发表的论文第73-74页
致谢第74页

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