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用关联分析解析控制小麦千粒重的主效QTL

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
第一章 文献综述第11-33页
    1.1 数量性状遗传作图的基本思路与方法第11-18页
        1.1.1 基于连锁分析的QTL作图技术第11-13页
            1.1.1.1 QTL作图原理第12页
            1.1.1.2 QTL定位的应用第12-13页
            1.1.1.3 QTL定位的局限第13页
        1.1.2 基于连锁不平衡的关联分析作图第13-18页
            1.1.2.1 连锁不平衡第13-16页
                1.1.2.1.1 连锁不平衡的度量第14页
                1.1.2.1.2 影响连锁不平衡的因素第14-16页
            1.1.2.2 关联分析第16-18页
                1.1.2.2.1 关联分析的策略第16-17页
                1.1.2.2.2 关联分析在作物中的应用第17-18页
    1.2 新基因发掘研究第18-21页
        1.2.1 基于连锁分析的基因发掘研究第18-20页
            1.2.1.1 突变体库发掘新基因方法研究第18页
            1.2.1.2 比较基因组学克隆新基因的方法第18-19页
            1.2.1.3 图位克隆发掘新基因第19-20页
        1.2.2 基于连锁不平衡的新基因发掘研究第20-21页
    1.3 作物产量和产量相关基因第21-30页
        1.3.1 作物产量构成要素和研究意义第21页
        1.3.2 作物产量要素的分子基础第21-30页
            1.3.2.1 水稻分蘖数和MOC1基因第21-23页
            1.3.2.2 水稻穗粒数和主效QTL/基因Gnla第23-24页
            1.3.2.3 水稻粒宽和粒宽基因GW2第24-25页
            1.3.2.4 玉米控制粒型和穗粒数的基因Gln1-3和Gln1-4第25页
            1.3.2.5 西红柿果实大小基因fw2.2第25-26页
            1.3.2.6 小麦春化和春化基因vrn1第26-28页
            1.3.2.7 穗型和穗型基因Q/q第28-30页
    1.4 展望第30页
    1.5 本研究的目的、意义及其技术路线第30-33页
第二章 用关联分析精细定位小麦粒重主效QTL第33-47页
    2.1 材料与方法第33-39页
        2.1.1 实验材料第33-34页
        2.1.2 实验方法第34-39页
            2.1.2.1 基因组DNA提取第34-35页
            2.1.2.2 SSR标记检测第35页
            2.1.2.3 银染技术第35-37页
            2.1.2.4 荧光标记技术第37-39页
            2.1.2.5 统计分析第39页
    2.2 结果与分析第39-44页
        2.2.1 亲本等位变异类型检测第39页
        2.2.2 多态位点等位变异千粒重分析第39-40页
        2.2.3 加密位点等位变异检测及千粒重分析第40-42页
        2.2.4 cfd67、cfd78和cfd40位点等位变异粒重方差分析第42-43页
        2.2.5 粒重性状与标记关联分析第43-44页
    2.3 讨论第44-47页
        2.3.1 QTL位点精细定位方法的比较第44-45页
        2.3.2 小麦千粒重性状QTL位点的连锁和一因多效分析第45-46页
        2.3.3 基于关联分析进行基因克隆的思考第46-47页
第三章 粗山羊草BAC C20和H8亚克隆文库构建及其序列分析第47-65页
    3.1 材料和方法第47-57页
        3.1.1 实验材料第47页
        3.1.2 实验方法第47-49页
            3.1.2.1 BAC克隆质粒的提取(碱裂解法)第47-48页
            3.1.2.2 BAC克隆质粒的NotⅠ酶切第48页
            3.1.2.3 脉冲电泳(Pulsed Field Gel Electtophresis,PFGE)第48-49页
        3.1.3 BAC文库的构建第49-53页
            3.1.3.1 BAC DNA的大量提取第49-50页
            3.1.3.2 小片段DNA的获得第50页
            3.1.3.3 Mung Bean(绿豆)核酸外切酶处理第50页
            3.1.3.4 外切酶产物的纯化第50-51页
            3.1.3.5 虾碱性磷酸酶(Shrimp Alkaline Phosphatase,SAP)脱磷处理第51页
            3.1.3.6 PCR方法加尾第51页
            3.1.3.7 片段大小的选择第51页
            3.1.3.8 DNA的纯化第51-52页
            3.1.3.9 连接反应第52页
            3.1.3.10 连接产物的转化第52-53页
            3.1.3.11 文库插入片段的检测第53页
            3.1.3.12 文库的保存第53页
        3.1.4 亚克隆测序第53-55页
            3.1.4.1 菌的培养第53页
            3.1.4.2 菌的保存第53-54页
            3.1.4.3 质粒提取第54页
            3.1.4.4 测序PCR反应第54-55页
                3.1.4.4.1 反应体系第54-55页
                3.1.4.4.2 PCR产物纯化第55页
        3.1.5 BAC全序列拼接第55-56页
        3.1.6 全序列分析第56-57页
    3.3 结果分析第57-60页
        3.3.1 粗山羊草BAC文库混合池及阳性单克隆筛选第57-58页
        3.3.2 亚克隆文库的构建及质量评价第58-59页
        3.3.3 亚克隆质粒末端测序第59-60页
        3.3.4 序列组装与验证第60页
    3.4 BAC插入片段分析第60-62页
        3.4.1 RepeatMasker软件分析第60页
        3.4.2 BAC H8和C20序列基因预测第60-61页
        3.4.3 BAC H8和C20与水稻、短柄草同源性进化分析第61-62页
    3.5 讨论第62-65页
        3.5.1 BAC Shotgun文库构建、测序、序列拼接应注意的问题第62-63页
        3.5.2 利用小麦亚基因组克隆小麦基因第63页
        3.5.3 基因在基因组中的分布第63-64页
        3.5.4 小麦与水稻、短柄草染色体共线性关系第64-65页
参考文献第65-75页
全文总结第75-77页
致谢第77页

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