摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-37页 |
1 前言 | 第13页 |
2 紫茎泽兰研究现状 | 第13-22页 |
2.1 紫茎泽兰的生物学特性 | 第13-15页 |
2.2 紫茎泽兰的化感作用的研究 | 第15-16页 |
2.3 紫茎泽兰的危害 | 第16-17页 |
2.3.1 侵占生产生活用地 | 第17页 |
2.3.2 降低土壤肥力 | 第17页 |
2.3.3 危害人和其它动物 | 第17页 |
2.4 紫茎泽兰入侵传播途径 | 第17-18页 |
2.4.1 风传 | 第18页 |
2.4.2 水传 | 第18页 |
2.4.3 随交通工具传播 | 第18页 |
2.4.4 随牲畜放牧传播 | 第18页 |
2.4.5 依靠无性繁殖能力扩展 | 第18页 |
2.5 紫茎泽兰防治的研究现状 | 第18-21页 |
2.5.1 生态工程法 | 第19页 |
2.5.2 生物防除研究 | 第19-20页 |
2.5.3 化学防除研究 | 第20-21页 |
2.5.4 机械防除法 | 第21页 |
2.6 我国紫茎泽兰利用研究现状 | 第21-22页 |
2.6.1 利用其有用成分研制杀虫剂 | 第21页 |
2.6.2 微生物发酵生产动物饲料 | 第21页 |
2.6.3 微生物发酵生产木糖醇的研究 | 第21-22页 |
2.6.4 作为野生有机肥料资源的研究 | 第22页 |
2.6.5 利用紫茎泽兰作染料 | 第22页 |
2.6.6 紫茎泽兰人造板的研究 | 第22页 |
3 植物耐冷分子机制的相关研究 | 第22-26页 |
3.1 CRT作用元件的发现以及CBF基因的克隆 | 第23-24页 |
3.2 ICE-CBF调控途径及其功能研究 | 第24-25页 |
3.3 转CBF转录激活因子的基因工程 | 第25-26页 |
4 植物转基因方法研究进展 | 第26-31页 |
4.1 农杆菌介导的植物遗传转化系统 | 第27-29页 |
4.1.1 活体接种法 | 第28页 |
4.1.2 共培养转化法 | 第28页 |
4.1.3 叶盘转化法 | 第28-29页 |
4.2 基因枪法 | 第29-30页 |
4.3 PEG介导法 | 第30页 |
4.4 脂质体法 | 第30页 |
4.5 电穿孔法 | 第30页 |
4.6 显微注射法 | 第30-31页 |
4.7 花粉管通道法 | 第31页 |
5 植物低温胁迫下的生理响应 | 第31-35页 |
5.1 低温半致死温度 | 第31-32页 |
5.2 低温胁迫对植物细胞膜的影响 | 第32-33页 |
5.2.1 细胞膜脂肪酸成分的变化 | 第32页 |
5.2.2 低温胁迫对细胞膜透性的影响 | 第32页 |
5.2.3 MDA对细胞膜的毒害作用 | 第32-33页 |
5.3 低温对细胞内溶物的影响 | 第33-34页 |
5.3.1 可溶性糖 | 第33页 |
5.3.2 脯氨酸 | 第33页 |
5.3.3 可溶性蛋白 | 第33-34页 |
5.4 活性氧清除系统与植物耐冷能力的关系 | 第34页 |
5.5 低温胁迫对植物光合系统的伤害 | 第34-35页 |
6 展望 | 第35-37页 |
第二章 不同种群紫茎泽兰耐冷能力比较 | 第37-43页 |
2.1 实验材料 | 第37-38页 |
2.2 实验方法 | 第38页 |
2.3 结果分析 | 第38-40页 |
2.3.1 低温胁迫下不同种群紫茎泽兰电解质渗透率变化 | 第38-39页 |
2.3.2 不同种群紫茎泽兰低温半致死温度的确定 | 第39-40页 |
2.4 讨论 | 第40-43页 |
第三章 低温胁迫下不同种群紫茎泽兰的生理反应 | 第43-59页 |
3.1 实验材料 | 第44页 |
3.2 实验方法 | 第44-47页 |
3.2.1 丙二醛(MDA)含量测定 | 第44-45页 |
3.2.2 可溶性糖含量测定 | 第45页 |
3.2.3 可溶性蛋白含量测定 | 第45-46页 |
3.2.4 SOD含量测定 | 第46-47页 |
3.2.5 叶绿素含量测定 | 第47页 |
3.2.6 叶绿素荧光参数测定 | 第47页 |
3.3 结果与分析 | 第47-53页 |
3.3.1 丙二醛含量测定 | 第47-48页 |
3.3.2 低温胁迫下不同种群紫茎泽兰叶片可溶性糖含量变化 | 第48-50页 |
3.3.3 低温胁迫下不同种群紫茎泽兰可溶性蛋白含量变化 | 第50-51页 |
3.3.4 低温胁迫下不同种群紫茎泽兰SOD含量变化 | 第51-52页 |
3.3.5 低温胁迫对各种群紫茎泽兰叶绿素含量的影响 | 第52-53页 |
3.3.6 低温胁迫下不同种群紫茎泽兰叶绿素荧光参数Fv/Fm变化 | 第53页 |
3.4 讨论 | 第53-59页 |
第四章 低温胁迫下不同种群紫茎泽兰EACBF1基因表达差异 | 第59-77页 |
4.1 半定量RT-PCR检测不同种群紫茎泽兰CBF基因表达差异 | 第60-65页 |
4.1.1 实验材料 | 第60页 |
4.1.2 实验方法 | 第60-62页 |
4.1.2.1 总RNA的提取 | 第60-61页 |
4.1.2.2 反转录反应(同4.2.2.3) | 第61页 |
4.1.2.3 EaCBF1和EaActin基因的PCR扩增 | 第61-62页 |
4.1.2.4 PCR产物检测 | 第62页 |
4.1.3 结果分析 | 第62-64页 |
4.1.3.1 总RNA提取情况检测 | 第62-63页 |
4.1.3.2 半定量检测各种群中EaCBF1的表达情况 | 第63-64页 |
4.1.4 讨论 | 第64-65页 |
4.2 实时荧光定量PCR检测不同种群紫茎泽兰CBF基因表达差异 | 第65-77页 |
4.2.1 实验材料 | 第65页 |
4.2.2 实验方法 | 第65-69页 |
4.2.3 结果与分析 | 第69-74页 |
4.2.4 讨论 | 第74-77页 |
第五章 紫茎泽兰转基因体系的研究 | 第77-93页 |
5.1 实验材料 | 第77-78页 |
5.2 实验方法 | 第78-88页 |
5.2.1 紫茎泽兰总DNA的提取 | 第78页 |
5.2.2 目的片段EaCBF1的扩增 | 第78-79页 |
5.2.3 目的片段EaCBF1的切胶回收 | 第79-81页 |
5.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第81页 |
5.2.5 将EaCBF1连入T载体 | 第81页 |
5.2.6 转化DH5α感受态细胞 | 第81-82页 |
5.2.7 阳性转化子的筛选 | 第82-84页 |
5.2.8 将目的基因连入PBI121 | 第84-86页 |
5.2.9 冻融法转化根癌农杆菌 | 第86-87页 |
5.2.10 以紫茎泽兰茎段和叶片为外植体的遗传转化 | 第87-88页 |
5.3 结果分析 | 第88-92页 |
5.3.1 紫茎泽兰总DNA电泳检测 | 第88页 |
5.3.2 目的基因CBF的PCR扩增 | 第88-89页 |
5.3.3 T-CBF阳性克隆的筛选 | 第89-90页 |
5.3.4 PBI121-CBF阳性克隆筛选 | 第90-91页 |
5.3.5 卡纳抗性苗的获得 | 第91-92页 |
5.4 讨论 | 第92-93页 |
附录 本论文所用培养基及试剂配方 | 第93-95页 |
参考文献 | 第95-105页 |
致谢 | 第105页 |