摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1. 前言 | 第10-18页 |
1.1 鱼类的性别决定与性别分化 | 第10-15页 |
1.1.1 鱼类性别决定和性别分化相关基因简介 | 第11-14页 |
1.1.2 斑马鱼性别决定和性别分化的信号通路 | 第14-15页 |
1.1.3 外源激素对鱼类性别分化的影响 | 第15页 |
1.2 母型—合子型过渡 | 第15-16页 |
1.3 本项目的立项依据、目的和意义 | 第16-18页 |
2. 材料与方法 | 第18-30页 |
2.1 实验材料和引物序列 | 第18-19页 |
2.2 主要仪器设备 | 第19页 |
2.3 主要试剂 | 第19-20页 |
2.4 实验方法 | 第20-30页 |
2.4.1 实验鱼的处理和实验材料的获得 | 第20页 |
2.4.2 RNA的提取 | 第20-21页 |
2.4.3 DNase Ⅰ消化总RNA | 第21页 |
2.4.4 cDNA第一链的合成 | 第21-22页 |
2.4.5 SMART~(TM) RACE克隆基因全长 | 第22-24页 |
2.4.6 PCR产物纯化回收 | 第24页 |
2.4.7 DH5α感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
2.4.8 目的DNA片段与pMD18-T载体连接 | 第25页 |
2.4.9 连接产物转化和阳性克隆筛选 | 第25页 |
2.4.10 序列分析 | 第25页 |
2.4.11 RT-PCR时空表达分析 | 第25-26页 |
2.4.12 Real-Time PCR检测Foxl2基因表达水平 | 第26页 |
2.4.13 RNA探针标记 | 第26-27页 |
2.4.14 胚胎整体原位杂交 | 第27-30页 |
3. 结果 | 第30-48页 |
3.1 稀有鮈鲫FOXL2基因的克隆及序列分析 | 第30-38页 |
3.1.1 稀有鮈鲫Foxl2基因保守片段的克隆 | 第30-31页 |
3.1.2 RACE-PCR扩增Foxl2的全长 | 第31-33页 |
3.1.3 FOXL2同源性分析 | 第33-36页 |
3.1.4 稀有鮈鲫Foxl2的组织表达分析 | 第36-37页 |
3.1.5 性激素处理对稀有鮈鲫Foxl2表达的影响 | 第37-38页 |
3.2 斑马鱼Zar1L基因的克隆及序列分析 | 第38-48页 |
3.2.1 RACE-PCR扩增Zar1L基因的全长 | 第38-40页 |
3.2.2 Zar1L的cDNA同源性分析 | 第40-43页 |
3.2.3 系统进化分析 | 第43-44页 |
3.2.4 斑马鱼Zar1和Zar1L组织表达分析 | 第44-45页 |
3.2.5 斑马鱼Zar1和Zar1L在卵子发生时期的表达 | 第45页 |
3.2.6 斑马鱼Zar1和Zar1L在胚胎发育时期的表达 | 第45-46页 |
3.2.7 Zar1和Zar1L在胚胎不同发育阶段的表达特征 | 第46-48页 |
4. 讨论 | 第48-51页 |
4.1 稀有鮈鲫Foxl2基因的序列分析及表达模式分析 | 第48-49页 |
4.2 斑马鱼Zar1L基因的序列分析及表达模式分析 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
在校期间论文发表情况 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |