| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-16页 |
| ·感受态细胞制备及转化体系的研究 | 第10-11页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备方法的研究 | 第10-11页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化体系 | 第11页 |
| ·基因的克隆方法 | 第11-13页 |
| ·表型基因克隆法 | 第11-12页 |
| ·功能克隆方法 | 第12-13页 |
| ·转座子标签克隆方法 | 第13页 |
| ·图位克隆技术 | 第13页 |
| ·利用生物信息学进行的电子克隆 | 第13页 |
| ·启动子研究进展 | 第13-15页 |
| ·植物启动子概述 | 第13-14页 |
| ·植物启动子的结构 | 第14-15页 |
| ·植物启动子的分类 | 第15页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 第二章 大肠杆菌高效感受态细胞的制备及快捷转化体系的建立 | 第16-22页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·菌株与质粒 | 第16页 |
| ·试剂配制 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-17页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第16页 |
| ·转化效率的计算 | 第16页 |
| ·三种不同的大肠杆菌感受态细胞制备方法 | 第16-17页 |
| ·质粒DNA 转化大肠杆菌感受态细胞快捷体系的优化 | 第17页 |
| ·结果分析 | 第17-20页 |
| ·不同制备方法下大肠杆菌感受态细胞转化效率的比较 | 第17-18页 |
| ·不同冻存保护剂对高效法感受态细胞转化效率的影响 | 第18页 |
| ·不同冻存温度及时间对高效法感受态细胞转化效率的影响 | 第18-19页 |
| ·不同冰浴时间对质粒DNA 转化高效法感受态细胞效率的影响 | 第19页 |
| ·不同温浴时间对质粒DNA 转化高效法感受态细胞效率的影响 | 第19-20页 |
| ·结果讨论 | 第20-22页 |
| 第三章 诱导型启动子rd29A 的克隆及序列分析 | 第22-31页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·供试植物材料 | 第22页 |
| ·菌株与质粒 | 第22页 |
| ·供试生化试剂及酶类 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-26页 |
| ·拟南芥基因组DNA 的提取、纯化及检测 | 第22-23页 |
| ·特异引物扩增启动子rd29A | 第23-24页 |
| ·启动子rd29A 片段的回收 | 第24页 |
| ·启动子rd29A 片段的克隆及检测 | 第24-25页 |
| ·重组质粒rd29A-T 的检测 | 第25-26页 |
| ·启动子rd29A 基因片段的序列测定 | 第26页 |
| ·结果分析 | 第26-30页 |
| ·拟南芥基因组DNA 电泳检测结果 | 第26页 |
| ·拟南芥特异引物PCR 扩增结果 | 第26-27页 |
| ·重组质粒rd29A-T 酶切及PCR 检测结果 | 第27-28页 |
| ·启动子序列分析 | 第28-30页 |
| ·结果讨论 | 第30-31页 |
| 第四章 诱导性瞬时表达载体的构建 | 第31-37页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·菌株和质粒 | 第31页 |
| ·工具酶和分析软件 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-34页 |
| ·诱导型植物瞬时表达载体P81221-rd29A 的构建 | 第31-32页 |
| ·构建含水通道蛋白AQP 的植物瞬时表达载体 | 第32-34页 |
| ·结果分析 | 第34页 |
| ·诱导型植物瞬时表达载体P81221-rd29A 的酶切检测 | 第34页 |
| ·含水通道蛋白AQP 的植物瞬时表达载体的酶切检测 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-37页 |
| ·影响连接体系效率的因素 | 第34-35页 |
| ·影响酶切体系效率的因素 | 第35-37页 |
| 第五章 讨论 | 第37-39页 |
| ·影响大肠杆菌感受态细胞转化效率的因素 | 第37页 |
| ·诱导型启动子rd29A 的功能分析 | 第37-38页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简介 | 第48页 |
