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单增李斯特菌溶血素O单克隆抗体的制备及其间接夹心ELISA检测方法的初步建立

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
文献综述第12-20页
 第一章 单增李斯特菌研究进展第12-20页
   ·单增李斯特菌生物学特性第12页
   ·近年来我国部分地区食品中单增李斯特菌污染现状第12-13页
   ·单增李斯特菌检测方法研究进展第13-17页
     ·传统的分离鉴定第13-14页
     ·免疫学检测方法第14-15页
     ·分子生物学检测方法第15-17页
   ·抗李斯特菌抗体研究进展第17-18页
   ·本研究的目的意义第18-20页
试验研究第20-52页
 第二章 单增李斯特菌溶血素O 的原核表达及其包涵体蛋白的重折叠第20-29页
   ·材料与方法第20-25页
     ·材料第20-23页
     ·试验方法第23-25页
   ·结果第25-26页
     ·重组工程菌的诱导表达第25页
     ·包涵体蛋白的变性溶解及纯化第25页
     ·纯化蛋白的Western blot 检测第25-26页
     ·目的蛋白的重折叠第26页
   ·讨论第26-29页
     ·包涵体的制备与变性溶解第26-27页
     ·包涵体蛋白的重折叠第27-29页
 第三章 抗单增李斯特菌溶血素O 单克隆抗体的制备与鉴定第29-42页
   ·材料第29-31页
     ·质粒与细胞系第29页
     ·实验动物第29页
     ·主要试剂第29页
     ·主要仪器第29页
     ·主要溶液的配置第29-31页
   ·方法与步骤第31-37页
     ·动物免疫第31页
     ·间接ELISA 检测方法的建立第31-32页
     ·细胞融合第32-34页
     ·融合细胞的选择性培养第34页
     ·抗体阳性孔的筛选第34页
     ·阳性孔细胞的克隆化第34-35页
     ·杂交瘤细胞的冻存与复苏第35页
     ·小鼠腹水的制备第35页
     ·单克隆抗体的纯化第35-36页
     ·杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体的特性鉴定第36-37页
   ·结果第37-41页
     ·重折叠LLO 蛋白间接ELISA 检测方法的建立第37-38页
     ·细胞融合与单克隆杂交瘤细胞株的建立第38页
     ·杂交瘤细胞与单克隆抗体特性的鉴定第38-41页
   ·讨论第41-42页
 第四章 兔抗LLO 多克隆抗体的制备第42-46页
   ·材料第42-43页
     ·试验动物第42页
     ·主要试验材料第42页
     ·主要溶液的配制第42-43页
   ·方法与步骤第43-44页
     ·动物免疫第43页
     ·动物采血第43-44页
     ·抗血清效价的测定及纯化第44页
   ·结果第44-45页
   ·讨论第45-46页
 第五章 单增李斯特菌溶血素O 双抗体间接夹心ELISA 检测方法的初步建立第46-52页
   ·材料第46-47页
     ·主要试验材料第46页
     ·主要缓冲液的配制第46-47页
   ·方法与步骤第47-49页
     ·双抗体间接夹心ELISA 的操作步骤第47-48页
     ·单克隆抗体与多克隆抗体最适合包被浓度的确定第48页
     ·间接夹心ELISA 工作条件的优化第48-49页
   ·结果第49-50页
     ·单克隆与多克隆抗体最佳工作浓度的确定第49页
     ·间接夹心ELISA 检测方法反应条件的优化第49-50页
   ·讨论第50-52页
结论第52-53页
参考文献第53-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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