| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-27页 |
| 第一章 PD-1 及其配体的研究进展 | 第13-27页 |
| ·PD-1 分子及其配体的研究进展 | 第13-16页 |
| ·PD-1 及其配体的功能研究进展 | 第16-25页 |
| ·PD-1 及其配体与自身免疫 | 第16-19页 |
| ·PD-1 及其配体与免疫耐受 | 第19-20页 |
| ·PD-1 及其配体与肿瘤免疫 | 第20-21页 |
| ·PD-1 及其配体与抗寄生虫免疫 | 第21页 |
| ·PD-1 及其配体与细菌感染 | 第21-22页 |
| ·PD-1 及其配体与移植免疫 | 第22页 |
| ·PD-1 及其配体与慢性病毒感染 | 第22-24页 |
| ·感染，免疫耐受，自身免疫之间的联系 | 第24-25页 |
| ·PD-1 及其配体应用进展 | 第25-27页 |
| ·PD-1 及其配体应用于治疗自身免疫病 | 第25-26页 |
| ·PD-1 及其配体应用于治疗慢性病毒感染 | 第26-27页 |
| 试验部分 | 第27-60页 |
| 第二章 猪PD-1 基因的原核和真核表达 | 第27-42页 |
| ·试剂与设备 | 第27-28页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·试验载体和菌株 | 第28页 |
| ·试验方法 | 第28-36页 |
| ·表达猪PD-1 基因外膜区的原核表达质粒构建 | 第28-32页 |
| ·重组质粒转化菌的诱导表达 | 第32-33页 |
| ·电洗脱法纯化PD-1 融合蛋白 | 第33-34页 |
| ·真核表达载体构建 | 第34-35页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第35页 |
| ·重组质粒的大量提取 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-40页 |
| ·猪PD-1 基因外膜区的PCR 扩增 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组质粒pGEX –6P-PD-1 原核表达产物与纯化物的 SDS-PAGE 检测结果 | 第38页 |
| ·原核表达产物的Western-blot 分析 | 第38-39页 |
| ·真核表达猪PD-1 全长PCR 扩增 | 第39页 |
| ·真核重组质粒的酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| ·PD-1 融合蛋白的原核表达 | 第40页 |
| ·PD-1 融合蛋白的纯化 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 第三章 PD-1 蛋白的单克隆抗体的制备 | 第42-51页 |
| ·材料和方法 | 第42-47页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42-43页 |
| ·实验动物及细胞 | 第43页 |
| ·试验方法 | 第43-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-49页 |
| ·杂交瘤细胞的形态观察 | 第47页 |
| ·杂交瘤细胞株的筛选 | 第47页 |
| ·细胞株分泌单抗特异性测定 | 第47-48页 |
| ·细胞株分泌单抗间接免疫荧光（IFA）结果 | 第48页 |
| ·细胞上清和腹水的IFA 效价 | 第48页 |
| ·单克隆抗体的亚型测定 | 第48-49页 |
| ·抗猪PD-1 单克隆抗体的流式检测 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·细胞融合过程 | 第49-50页 |
| ·单克隆抗体制备方法的选择 | 第50页 |
| ·单克隆抗体筛选 | 第50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 第四章 猪PD-L1 的原核表达 | 第51-60页 |
| ·试剂与设备 | 第51-52页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·主要仪器设备 | 第52页 |
| ·试验载体和菌株 | 第52页 |
| ·试验方法 | 第52-57页 |
| ·表达猪PD-L1 基因的原核表达质粒构建 | 第52-56页 |
| ·重组质粒转化菌的诱导表达 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-59页 |
| ·猪PD-L1 基因的PCR 扩增 | 第57页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第57-58页 |
| ·重组质粒pET-32a-PDL1 原核表达产物与纯化物的 SDS-PAGE 检测结果 | 第58-59页 |
| ·原核表达产物的Western-blot 分析 | 第59页 |
| ·结论 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 附录 | 第68-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 个人简介 | 第73页 |
| 硕士期间发表文章 | 第73页 |