| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 文献综述 | 第11-23页 |
| 第一章 猪瘟及猪瘟病毒研究进展 | 第11-17页 |
| ·猪瘟概述 | 第11-12页 |
| ·猪瘟病毒概述 | 第12-13页 |
| ·猪瘟诊断方法的研究进展 | 第13-17页 |
| ·免疫荧光试验 | 第13页 |
| ·免疫组化试验 | 第13页 |
| ·RT-PCR 方法检测猪瘟 | 第13-14页 |
| ·RT-nPCR 方法检测猪瘟 | 第14-15页 |
| ·Real time RT-PCR 方法检测猪瘟 | 第15-17页 |
| 第二章 荧光定量PCR 技术及其研究进展 | 第17-23页 |
| ·荧光定量PCR 技术概述 | 第17-19页 |
| ·荧光定量PCR 技术在各个研究领域的研究进展 | 第19-22页 |
| ·荧光定量PCR 技术在传染病诊断和病原体定量上的应用 | 第19页 |
| ·荧光定量PCR 技术在基因表达研究中的应用 | 第19-20页 |
| ·荧光定量PCR 技术在人类肿瘤研究上的应用 | 第20页 |
| ·荧光定量PCR 技术在动物疾病诊断上的应用 | 第20-21页 |
| ·荧光定量PCR 技术在转基因产品检测中的应用 | 第21-22页 |
| ·荧光定量PCR 技术在疫苗效力检定上的应用前景 | 第22页 |
| ·展望 | 第22-23页 |
| 试验研究 | 第23-46页 |
| 第三章 猪瘟兔化弱毒一步法荧光定量PCR 检测方法的建立 | 第23-40页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·细胞株与病毒株 | 第23页 |
| ·主要试剂和溶液配制 | 第23-25页 |
| ·主要仪器与设备 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-31页 |
| ·引物和探针的设计与合成 | 第25-26页 |
| ·标准品体外转录RNA 的制备 | 第26-29页 |
| ·荧光定量PCR 方法的建立 | 第29-31页 |
| ·结果 | 第31-37页 |
| ·提取的猪瘟病毒总RNA 完整性的鉴定 | 第31页 |
| ·标准品引物的扩增及其测序 | 第31-32页 |
| ·标准品RNA 纯度及质量检测 | 第32页 |
| ·退火温度的优化 | 第32页 |
| ·引物和探针浓度的优化 | 第32-34页 |
| ·标准曲线及灵敏性试验 | 第34-35页 |
| ·特异性试验 | 第35页 |
| ·准确性和重复性试验 | 第35-36页 |
| ·与RT-nPCR 方法的比较 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| ·荧光定量PCR 方法对猪瘟病毒的检测 | 第37-38页 |
| ·荧光定量PCR 方法中标准品的选择 | 第38页 |
| ·一步法荧光定量PCR 方法的优劣 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第四章 猪瘟兔化弱毒一步法荧光定量PCR 检测方法的初步应用 | 第40-46页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·细胞株与病毒株 | 第40页 |
| ·猪瘟兔化弱毒疫苗 | 第40页 |
| ·主要试剂和溶液配制 | 第40页 |
| ·主要仪器与设备 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-43页 |
| ·猪瘟兔化弱毒疫苗中病毒含量的测定 | 第40-41页 |
| ·原代牛睾丸细胞的培养 | 第41-42页 |
| ·猪瘟兔化弱毒在猪脐静脉血管内皮细胞和牛睾丸细胞中增殖含量的测定 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-44页 |
| ·猪瘟兔化弱毒疫苗中病毒含量的测定 | 第43-44页 |
| ·猪瘟兔化弱毒在猪脐静脉血管内皮细胞和牛睾丸细胞中的增殖情况 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·猪瘟兔化弱毒疫苗中猪瘟病毒含量的分析 | 第44页 |
| ·不同细胞中猪瘟兔化弱毒增殖情况的分析 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
