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水稻OsCBSCBSPBI基因生殖期抗旱功能的研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第1章 绪论第14-29页
    1.1 水稻抗旱的生物学现象和随之带来的严重后果第15页
    1.2 植物耐早的生理分子机理第15-16页
    1.3 植物适应自然的自我调节机制第16-17页
        1.3.1 渗透调节第16页
        1.3.2 气孔调节第16页
        1.3.3 激素调节第16-17页
        1.3.4 植物抗氧化的防御调节第17页
    1.4 植物基因工程的研究进展第17-19页
        1.4.1 植物基因工程的现状第17-18页
        1.4.2 植物遗传转化的基本特点第18-19页
            1.4.2.1 转基因技术增强农作物抗非生物胁迫能力第18页
            1.4.2.2 转基因可以提高作物的遗传品质第18-19页
            1.4.2.3 转基因的方法第19页
            1.4.2.4 根癌农杆菌的优点以及局限性第19页
            1.4.2.5 转基因作物的检测方法第19页
    1.5 ABA代谢与调控第19-23页
        1.5.1 ABA的信号转导途径第20页
        1.5.2 ABA受体和早期信号转导元件第20页
        1.5.3 ABA转导过程中的ROS第20-21页
        1.5.4 保卫细胞中的ABA与其他植物途径中的内源激素相互作用第21-22页
        1.5.5 DREB家族转录因子的研究第22-23页
    1.6 非生物胁迫下基因的调控模式第23页
    1.7 植物水分胁迫信号识别与转导第23-24页
    1.8 胱硫醚β-合酶研究进展第24-27页
        1.8.1 CBS的分子结构及其催化功能区第24-25页
        1.8.2 CBS与人类疾病的关系第25-27页
            1.8.2.1 损伤内皮细胞第25页
            1.8.2.2 刺激细胞平滑肌的增生第25页
            1.8.2.3 活化炎症因子第25页
            1.8.2.4 甲硫氨酸循环第25-26页
            1.8.2.5 半胱氨酸第26页
            1.8.2.6 半胱氨酸参与机体免疫和抗氧化功能第26-27页
    1.9 主要研究内容及研究意义第27-29页
第2章 实验材料与方法第29-50页
    2.1 实验试剂及配方第29-33页
        2.1.1 生理生化指标的测定所需的实验试剂配方第29-31页
        2.1.2 分子生物学试剂配方第31-33页
    2.2 三引物法鉴定纯合突变体第33-34页
    2.3 GUS染色第34页
    2.4 水稻生殖期的抗旱研究方法第34-35页
    2.5 水稻生殖期花粉发育的观察比较第35-36页
        2.5.1 水稻生殖期花粉育性的观察第35页
        2.5.2 水稻生殖期花粉活性的观察第35-36页
    2.6 PCR引物第36-37页
    2.7 菌株和载体的选择第37-40页
        2.7.1 研究所用菌株第37页
        2.7.2 研究所用载体及质粒第37-40页
    2.8 gateway载体构建第40-41页
        2.8.1 入门载体构建第40页
        2.8.2 瞬时表达载体构建第40-41页
    2.9 显微注射法-烟草亚细胞定位第41页
    2.10 水稻OsCBSCBSPBI基因原核表达研究第41-44页
        2.10.1 克隆载体的构建第41-42页
        2.10.2 原核表达载体的构建与鉴定第42-44页
    2.11 农杆菌介导的水稻转化第44-48页
        2.11.1 oscbscbspbi水稻愈伤组织的培养第45页
        2.11.2 根瘤农杆菌的转化第45-46页
        2.11.3 转化苗的筛选与鉴定第46-48页
            2.11.3.1 水稻转化苗植株潮霉素抗性检测第46-47页
            2.11.3.2 水稻转化苗子一代植株潮霉素抗性筛选第47页
            2.11.3.3 子一代植株PEG6000胁迫处理第47页
            2.11.3.4 水稻RNA的抽提与反转录第47-48页
            2.11.3.5 qRT-PCR第48页
    2.12 水稻生殖期农艺性状的测定与比较第48页
    2.13 DAB染色法测定活性氧的产生第48-50页
第3章 实验结果与分析第50-72页
    3.1 OsCBSCBSPBI基因进化树分析第50页
    3.2 oscbscbspbi生殖期抗旱功能的分析研究第50-53页
        3.2.1 干旱胁迫表型观察比较第50-51页
        3.2.2 干旱处理对植株间根系的影响比较第51-52页
        3.2.3 干旱处理对植株间不同部位的相对含水量间的比较研究第52-53页
    3.3 干旱处理对植株间花粉育性和活性的比较第53-55页
    3.4 干旱处理下OsCBSCBSPBI基因在生殖期水稻中的表达量的分析第55-57页
        3.4.1 与抗旱相关基因的表达量分析第56-57页
    3.5 OsCBSCBSPBI基因在原核表达系统中的表达分析第57-58页
    3.6 OsCBSCBSPBI基因回补转化的检测与鉴定第58-62页
        3.6.1 利用潮霉素初筛转化苗子0代第58页
        3.6.2 利用传统PCR技术初筛转化苗子0代第58-59页
        3.6.3 利用潮霉素技术筛选转化苗子1代第59-60页
        3.6.4 转OsCBSCBSPBI基因的水稻生殖期OsCBSCBSPBI基因表达量的变化第60-61页
        3.6.5 回补突变体生殖期植株干旱处理后补水的观察比较第61-62页
        3.6.6 转OsCBSCBSPBI基因水稻生殖期植株干旱处理后稻穗的农艺性状比较第62页
    3.7 干旱处理对水稻生殖期植株间生理生化指标的鉴定与比较第62-66页
        3.7.1 水稻生殖期叶片丙二醛(MDA)和硫代巴比妥反应物(TBARS)的含量的变化第63-64页
        3.7.2 水稻生殖期叶片超氧化物歧化酶(SOD)含量的变化第64页
        3.7.3 水稻生殖期叶片脯氨酸(Pro)和可溶性蛋白含量的变化第64-65页
        3.7.4 水稻生殖期叶片可溶性糖含量的变化第65-66页
    3.8 OsCBSCBSPBI基因的组织型表达分析第66-67页
        3.8.1 OsCBSCBSPBI基因在烟草中的亚细胞定位分析第66-67页
    3.9 OsCBSCBSPBI基因抗旱机制的探讨第67-72页
        3.9.1 脱落酸(ABA)依赖性胁迫探索第67-68页
        3.9.2 中花11和oscbscbspbi自发诱导的植物的免疫反应第68-69页
        3.9.3 谷胱甘肽含量的测定及比较分析第69-70页
        3.9.4 OsCBSCBSPBI基因抗旱机制初步推断第70-72页
第4章 讨论第72-76页
    4.1 OsCBSCBSPBI基因的基本结构研究分析第72页
    4.2 OsCBSCBSPBI基因抗旱功能分析与探讨第72-73页
    4.3 OsCBSCBSPBI基因的表达量分析与探讨第73-74页
    4.4 OsCBSCBSPBI基因抗旱机制的探讨第74-76页
参考文献第76-84页
致谢第84页

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