摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文缩略表 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-33页 |
1.1 水稻植株矮化与植物激素的关系 | 第15-16页 |
1.2 水稻包穗研究进展 | 第16-18页 |
1.2.1 eui基因的研究 | 第16页 |
1.2.2 包穗相关基因的定位与克隆 | 第16-18页 |
1.3 植株茎杆的伸长生长与细胞壁发育的关系 | 第18-26页 |
1.3.1 植物细胞壁合成 | 第19-21页 |
1.3.2 高尔基介导的高等植物细胞壁的分泌途径 | 第21-26页 |
1.4 磷脂酰丝氨酸及其磷脂酰丝氨酸合酶研究进展 | 第26-32页 |
1.4.1 磷脂酰丝氨酸的研究进展 | 第26-29页 |
1.4.2 磷脂酰丝氨酸合酶的研究进展 | 第29-32页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第32-33页 |
第二章 水稻细胞壁合成缺陷突变体SUI1-4 的形态学特征 | 第33-49页 |
2.1 材料与方法 | 第33-38页 |
2.1.1 水稻材料与种植方法 | 第33页 |
2.1.2 田间性状调查 | 第33页 |
2.1.3 根长测定 | 第33页 |
2.1.4 石蜡切片观察 | 第33-34页 |
2.1.5 共聚焦显微镜的观察 | 第34页 |
2.1.6 赤霉素激素处理 | 第34页 |
2.1.7 α-淀粉酶诱导实验 | 第34页 |
2.1.8 外源GA3诱导第二叶銷伸长 | 第34页 |
2.1.9 透射电镜观察 | 第34-35页 |
2.1.10 高压冷冻实验 | 第35页 |
2.1.11 免疫胶体金实验 | 第35-36页 |
2.1.12 Western杂交 | 第36页 |
2.1.13 质膜和内膜系统分离 | 第36-37页 |
2.1.14 原生质体分泌实验 | 第37页 |
2.1.15细胞壁成分的测定 | 第37-38页 |
2.2 结果与分析 | 第38-47页 |
2.2.1 sui1-4 表型分析 | 第38-39页 |
2.2.2 sui1-4 突变体节间形态分析 | 第39-40页 |
2.2.3 外源赤霉素处理 | 第40页 |
2.2.4 α-淀粉酶诱导实验和外源GA3对第二叶銷伸长生长影响 | 第40-41页 |
2.2.5 野生型和突变体倒一节间植物激素相关基因定量表达分析 | 第41-42页 |
2.2.6 野生型和突变体倒一节间果胶质的免疫胶体金定位 | 第42-43页 |
2.2.7 sui1-4 是分泌缺陷型突变体 | 第43-46页 |
2.2.8 细胞壁含量的测定 | 第46-47页 |
2.3 讨论 | 第47-49页 |
2.3.1 sui1-4 是GA3不敏感型突变体 | 第47页 |
2.3.2 sui1-4 突变体影响到细胞壁原料的运输及分配 | 第47-48页 |
2.3.3 果胶质分泌缺陷影响sui1-4 突变体倒一节间的伸长 | 第48-49页 |
第三章 OSPSS/SUI1基因的图位克隆和表达分析 | 第49-62页 |
3.1 材料与方法 | 第49-53页 |
3.1.1 群体种植 | 第49页 |
3.1.2 DNA样品提取 | 第49页 |
3.1.3 分子标记的开发及分子标记的扩增 | 第49-50页 |
3.1.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染显色 | 第50页 |
3.1.5 转基因和干扰载体的构建 | 第50页 |
3.1.6 农秆菌介导的水稻遗传转化 | 第50-51页 |
3.1.7 同源性分析及拓扑结构预测 | 第51页 |
3.1.8 表达分析和GUS染色实验 | 第51-52页 |
3.1.9 膜蛋白分离实验 | 第52页 |
3.1.10 亚细胞定位及原生质体的培养基 | 第52-53页 |
3.2 结果与分析 | 第53-60页 |
3.2.1 sui1-4 突变体的遗传分析 | 第53页 |
3.2.2 突变基因的初定位和精细定位以及候选基因鉴定 | 第53-54页 |
3.2.3 突变基因的互补和干扰验证 | 第54-55页 |
3.2.4 Os PSS/SUI1基因表达分析 | 第55-57页 |
3.2.5 Os PSS/SUI1基因的同源性及拓扑结构分析 | 第57-59页 |
3.2.6 Os PSS/SUI1基因的定位分析 | 第59-60页 |
3.3 讨论 | 第60-62页 |
3.3.1 基因Os PSS/SUI1突变是导致细胞壁形成障碍的主要原因 | 第60-61页 |
3.3.2 Os PSS/SUI1主要在伸长细胞尤其第一节间伸长细胞中表达 | 第61-62页 |
第四章 OSPSS/SUI1基因分泌途径功能分析 | 第62-77页 |
4.1 材料与方法 | 第62-63页 |
4.1.1 水稻材料与田间种植方法 | 第62页 |
4.1.2 亚细胞定位载体构建及亚细胞定位分析 | 第62页 |
4.1.3 分泌相关基因荧光定量分析 | 第62页 |
4.1.4 磷脂含量的测定 | 第62-63页 |
4.1.5 蛋白原核表达与纯化 | 第63页 |
4.1.6 磷脂结合实验 | 第63页 |
4.2 结果与分析 | 第63-75页 |
4.2.1 野生型和突变体Os PSS/SUI1基因的亚细胞定位分析 | 第63-68页 |
4.2.2 PS的亚细胞定位分析 | 第68-70页 |
4.2.3 Os PSS/SUI1参与到分泌途径,并不参与到内吞及液泡运输过程 | 第70-71页 |
4.2.4 野生型和sui1-4 突变体中分泌相关基因的表达分析 | 第71-73页 |
4.2.5 PS直接与Exo70亚基互作并介导分泌囊泡与质膜的栓系过程 | 第73-75页 |
4.3 讨论 | 第75-77页 |
4.3.1 Os PSS/SUI1和PS的定位意味着PS和PSS能参与到分泌途径 | 第75-76页 |
4.3.2 Os PSS/SUI1通过合成的产物PS影响分泌途径 | 第76页 |
4.3.3 PS可能通过与EXO70家族互作从而影响节间细胞的伸长 | 第76-77页 |
第五章 全文结论 | 第77-80页 |
5.1 野生型和SUI1-4 突变体节间形态及果胶质分泌缺陷 | 第77页 |
5.2 SUI1-4 是分泌缺陷型突变体 | 第77-78页 |
5.3 OSPSS/SUI1是引起包穗表型的目的基因 | 第78页 |
5.4 OSPSS/SUI1亚细胞定位于与分泌途径相关的内膜器官 | 第78页 |
5.5 PS的定位模式与长时间转化下OSPSS/SUI1定位类似 | 第78-79页 |
5.6 PS直接与OSEXO70E1和OSEXO70A1结合并且PS在突变体中含量降低 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-91页 |
附录 | 第91-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
作者简历 | 第97页 |