| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第14-32页 |
| 1.1 研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| 1.2 国内外研究综述 | 第15-29页 |
| 1.2.1 酿酒酵母的合成遗传阵列技术 | 第15-19页 |
| 1.2.2 RNA颗粒简介 | 第19-29页 |
| 1.3 目前存在的主要问题 | 第29-30页 |
| 1.4 本文的主要研究内容 | 第30-32页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第32-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-36页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第32页 |
| 2.1.2 培养基相关试剂 | 第32-34页 |
| 2.1.3 实验主要试剂 | 第34-36页 |
| 2.1.4 主要实验设备与用途 | 第36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-45页 |
| 2.2.1 质询菌株的构建 | 第36-37页 |
| 2.2.2 构建PAB1-RFP单基因敲除阵列 | 第37-38页 |
| 2.2.3 应激颗粒形成相关基因的大规模筛选 | 第38-39页 |
| 2.2.4 筛选结果的验证 | 第39-40页 |
| 2.2.5 缺失基因的补回验证 | 第40页 |
| 2.2.6 荧光显微镜成像 | 第40页 |
| 2.2.7 遗传图谱的构建 | 第40页 |
| 2.2.8 生物信息学分析 | 第40页 |
| 2.2.9 酵母恢复生长曲线 | 第40-41页 |
| 2.2.10 逆境后细胞存活率的测量 | 第41页 |
| 2.2.11 CAN1基因突变频率的测定 | 第41页 |
| 2.2.12 应激性信号蛋白和基因表达水平定量分析 | 第41-42页 |
| 2.2.13 Western杂交 | 第42页 |
| 2.2.14 酵母菌滴测试 | 第42页 |
| 2.2.15 酿酒酵母世代数的测定 | 第42-43页 |
| 2.2.16 衰老细胞的分离纯化 | 第43页 |
| 2.2.17 细胞壁芽痕染色 | 第43-44页 |
| 2.2.18 多聚核糖体含量分析 | 第44-45页 |
| 第3章 应激颗粒形成相关基因的大规模筛选 | 第45-60页 |
| 3.1 引言 | 第45页 |
| 3.2 荧光标记应激颗粒组成蛋白PAB1 | 第45-48页 |
| 3.2.1 应激颗粒组成蛋白Pab1 | 第45-46页 |
| 3.2.2 PAB1-RFP质询菌株的构建 | 第46-47页 |
| 3.2.3 PAB1-RFP在酿酒酵母细胞中的表型 | 第47-48页 |
| 3.3 标记菌株与酿酒酵母基因组单敲除文库的融合 | 第48-50页 |
| 3.4 应激颗粒表型的评价和最适诱导条件的摸索 | 第50-56页 |
| 3.4.1 应激颗粒表型的评价方法 | 第50页 |
| 3.4.2 大规模筛选实验条件探索 | 第50-56页 |
| 3.5 基于应激颗粒表型的大规模筛选结果 | 第56-59页 |
| 3.5.1 应激颗粒的候选阳性与阴性突变子 | 第56-57页 |
| 3.5.2 候选突变子的检验 | 第57-59页 |
| 3.6 本章小结 | 第59-60页 |
| 第4章 应激颗粒形成相关基因的代谢功能分析 | 第60-83页 |
| 4.1 引言 | 第60页 |
| 4.2 促进应激颗粒形成的基因功能分布概况 | 第60-64页 |
| 4.3 转录翻译和RNA代谢对应激颗粒的影响 | 第64-67页 |
| 4.4 蛋白结构域对应激颗粒的影响 | 第67-69页 |
| 4.5 细胞中的膜结构对应激颗粒的影响 | 第69-71页 |
| 4.6 细胞转运作用对应激颗粒的影响 | 第71-81页 |
| 4.7 本章小结 | 第81-83页 |
| 第5章 应激颗粒对酿酒酵母的生理影响及作用规律 | 第83-114页 |
| 5.1 引言 | 第83页 |
| 5.2 不同逆境对应激颗粒与DNA突变率的影响 | 第83-91页 |
| 5.2.1 不同逆境引发不同的应激颗粒发生率 | 第83-90页 |
| 5.2.2 逆境下应激颗粒阴性突变子的DNA突变率变化 | 第90-91页 |
| 5.3 应激颗粒阴性突变子中的信号蛋白表达变化 | 第91-97页 |
| 5.4 应激颗粒与细胞衰老 | 第97-103页 |
| 5.4.1 应激颗粒阴性突变子的世代寿命 | 第97-99页 |
| 5.4.2 衰老细胞中的应激颗粒表型 | 第99-101页 |
| 5.4.3 RNA颗粒与损伤蛋白聚集体 | 第101-103页 |
| 5.5 RNA颗粒的形成机理 | 第103-111页 |
| 5.5.1 mRNP去向决定m RNA命运 | 第103-109页 |
| 5.5.2 逆境的启动和终止 | 第109-111页 |
| 5.6 本章小结 | 第111-114页 |
| 结论 | 第114-116页 |
| 参考文献 | 第116-129页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文及其它成果 | 第129-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 个人简历 | 第132页 |
