Abstract | 第6页 |
摘要 | 第7-8页 |
Abbreviations | 第8-10页 |
Chapter Ⅰ Introduction | 第10-23页 |
1.1. Viral-induced changes in carbon metabolism | 第10-14页 |
1.1.2. Warburg Effect | 第10-12页 |
1.1.3. Glucose and Glutamine alteration by Viral Infections | 第12-13页 |
1.1.4. SSN-1 and GF-1 cell lines | 第13-14页 |
1.2. Nervous Necrosis Virus | 第14-20页 |
1.2.1. Etiology, Clinical Signs and pathology | 第15页 |
1.2.2. Genome Composition | 第15-17页 |
1.2.3. Entry to Host and Replication | 第17-19页 |
1.2.4. Immune responses against Nervous Necrosis Virus infection | 第19-20页 |
1.3. Hypothesis | 第20-21页 |
1.4. Aims and Objectives of proposed work | 第21-22页 |
1.5. Experimental Design | 第22-23页 |
Chapter Ⅱ Materials and Methods | 第23-30页 |
2.2. Virus and Cell Culture | 第23页 |
2.3. Reagents and antibodies | 第23-24页 |
2.4. Equipments | 第24页 |
2.5. Cell viability assay | 第24页 |
2.6. Virus titration | 第24-25页 |
2.7. Cell infection | 第25页 |
2.8. Reagents standardization | 第25-26页 |
2.9. Nutrient starvation and the addition of metabolic intermediates of TCA cycle | 第26页 |
2.10.Transcription studies of RGNNV at different time points | 第26页 |
2.11. RNA Extraction and cDNA Library construction | 第26-27页 |
2.12. Primer Designing and RT-PCR | 第27-28页 |
2.13. Quantitative Real time PCR Assay (qRT-PCR Assay) | 第28页 |
2.14. SDS-PAGE and Western blotting assay for the expression of RGNNV | 第28-29页 |
2.15. Immune Fluorescence Assay (IFA) for RGNNV protein expression | 第29页 |
2.16. Statistical Analysis | 第29-30页 |
Chapter Ⅲ Results | 第30-44页 |
3.1. Glucose but not glutamine was essential for cell proliferation | 第30-31页 |
3.2. Glutamine was essential for SSN-1 or GF-1 cells infected with RGNNV | 第31-33页 |
3.3. Additions of intermediates of TCA cycle could rescue the replication of RGNNV | 第33-34页 |
3.4. Blocking glutaminolysis could inhibit the replication of RGNNV | 第34-36页 |
3.5. Glutamine regulated the transcription of capsid gene of RGNNV: | 第36-39页 |
3.6. Glutamine effect the transcription of RdRp gene of RGNNV | 第39-40页 |
3.7. Glutamine affected RGNNV protein synthesis | 第40-44页 |
Chapter Ⅳ Discussion | 第44-46页 |
Conclusion | 第46-47页 |
References | 第47-55页 |
Acknowledgements | 第55页 |