摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
第一章 综述 | 第9-22页 |
1 石蒜简介 | 第9-10页 |
2 石蒜的研究现状 | 第10页 |
3 分子标记 | 第10-14页 |
·遗传标记发展概况 | 第10页 |
·分子标记简介 | 第10-11页 |
·DNA 分子标记技术的类型 | 第11-12页 |
·本实验利用的分子标记-微卫星分子标记 | 第12-14页 |
·微卫星简介 | 第12页 |
·微卫星分离的方法 | 第12-13页 |
·微卫星DNA 标记的优缺点 | 第13-14页 |
4 微卫星DNA 标记的应用 | 第14-16页 |
5 本研究的目的和意义 | 第16页 |
参考文献 | 第16-22页 |
第二章 磁珠富集法微卫星文库的构建和多态性位点的筛选 | 第22-51页 |
1 材料与方法 | 第22-34页 |
·仪器与试剂 | 第22-23页 |
·植物材料 | 第23页 |
·植物基因组提取 | 第23-24页 |
·微卫星文库的构建 | 第24-29页 |
·引物稀释及接头准备 | 第25页 |
·基因组酶切,回收产物与接头连接 | 第25-26页 |
·PCR 扩增接头连接的DNA | 第26页 |
·生物素标记的探针的亲和捕获 | 第26页 |
·处理磁珠和捕获包含微卫星片段的DNA | 第26-27页 |
·PCR 增加磁珠富集DNA 的量 | 第27页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
·克隆富集微卫星文库 | 第28页 |
·感受态细胞的克隆、转化及蓝白斑筛选 | 第28页 |
·菌落PCR | 第28-29页 |
·测序和引物设计 | 第29-30页 |
·PCR 检测所设计的引物和反应条件的优化 | 第30页 |
·PCR 扩增及琼脂糖电泳检测 | 第30-31页 |
·变性聚丙烯酰胺胶检测多态性结果 | 第31-33页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳原理 | 第31页 |
·操作过程 | 第31-33页 |
·选择出多态性的引物及数据统计和软件分析数据 | 第33页 |
·多态性微卫星位点的跨物种扩增 | 第33-34页 |
·PCR 检测引物在同属其他物种中的反应条件的优化 | 第33页 |
·PCR 扩增以及琼脂糖电泳检测 | 第33-34页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测跨物种扩增 | 第34页 |
·对所得结果进行分析 | 第34页 |
2. 试验结果与分析 | 第34-46页 |
·石蒜基因组DNA 提取 | 第34-35页 |
·石蒜基因组酶切结果 | 第35页 |
·PCR 扩增接头连接的DNA 结果 | 第35页 |
·PCR 增加磁珠富集DNA 的结果 | 第35-36页 |
·菌落PCR 筛选包含有微卫星片段的克隆结果 | 第36页 |
·部分克隆的的测序结果(下划线部分代表重复序列) | 第36-40页 |
·引物特异性扩增结果 | 第40-41页 |
·银染检测结果 | 第41-42页 |
·软件分析结果 | 第42-43页 |
·跨物种扩增结果 | 第43-46页 |
·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳结果 | 第43-44页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果 | 第44-45页 |
·跨物种扩增数据统计结果 | 第45-46页 |
3 讨论 | 第46-48页 |
·微卫星位点筛选实验中的关键因素 | 第46-47页 |
·微卫星标记中存在的问题 | 第47-48页 |
·实验结果的讨论 | 第48页 |
参考文献 | 第48-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
附录:读研期间论文发表情况及获奖情况 | 第52页 |