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石蒜高多态性微卫星位点的筛选、鉴定及跨种分析

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
第一章 综述第9-22页
 1 石蒜简介第9-10页
 2 石蒜的研究现状第10页
 3 分子标记第10-14页
   ·遗传标记发展概况第10页
   ·分子标记简介第10-11页
   ·DNA 分子标记技术的类型第11-12页
   ·本实验利用的分子标记-微卫星分子标记第12-14页
     ·微卫星简介第12页
     ·微卫星分离的方法第12-13页
     ·微卫星DNA 标记的优缺点第13-14页
 4 微卫星DNA 标记的应用第14-16页
 5 本研究的目的和意义第16页
 参考文献第16-22页
第二章 磁珠富集法微卫星文库的构建和多态性位点的筛选第22-51页
 1 材料与方法第22-34页
   ·仪器与试剂第22-23页
   ·植物材料第23页
   ·植物基因组提取第23-24页
   ·微卫星文库的构建第24-29页
     ·引物稀释及接头准备第25页
     ·基因组酶切,回收产物与接头连接第25-26页
     ·PCR 扩增接头连接的DNA第26页
     ·生物素标记的探针的亲和捕获第26页
     ·处理磁珠和捕获包含微卫星片段的DNA第26-27页
     ·PCR 增加磁珠富集DNA 的量第27页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第27-28页
     ·克隆富集微卫星文库第28页
     ·感受态细胞的克隆、转化及蓝白斑筛选第28页
     ·菌落PCR第28-29页
   ·测序和引物设计第29-30页
   ·PCR 检测所设计的引物和反应条件的优化第30页
   ·PCR 扩增及琼脂糖电泳检测第30-31页
   ·变性聚丙烯酰胺胶检测多态性结果第31-33页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳原理第31页
     ·操作过程第31-33页
     ·选择出多态性的引物及数据统计和软件分析数据第33页
   ·多态性微卫星位点的跨物种扩增第33-34页
     ·PCR 检测引物在同属其他物种中的反应条件的优化第33页
     ·PCR 扩增以及琼脂糖电泳检测第33-34页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测跨物种扩增第34页
     ·对所得结果进行分析第34页
 2. 试验结果与分析第34-46页
   ·石蒜基因组DNA 提取第34-35页
   ·石蒜基因组酶切结果第35页
   ·PCR 扩增接头连接的DNA 结果第35页
   ·PCR 增加磁珠富集DNA 的结果第35-36页
   ·菌落PCR 筛选包含有微卫星片段的克隆结果第36页
   ·部分克隆的的测序结果(下划线部分代表重复序列)第36-40页
   ·引物特异性扩增结果第40-41页
   ·银染检测结果第41-42页
   ·软件分析结果第42-43页
   ·跨物种扩增结果第43-46页
     ·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳结果第43-44页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果第44-45页
     ·跨物种扩增数据统计结果第45-46页
 3 讨论第46-48页
   ·微卫星位点筛选实验中的关键因素第46-47页
   ·微卫星标记中存在的问题第47-48页
   ·实验结果的讨论第48页
 参考文献第48-51页
致谢第51-52页
附录:读研期间论文发表情况及获奖情况第52页

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