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小麦TaPPR4基因的克隆及其功能研究

摘要第11-13页
Abstract第13-14页
第1章 绪论第15-29页
    1.1 PPR (pentatricopeptide repeats) 基因的发现第15-17页
    1.2 PPR蛋白的结构特征第17-19页
    1.3 PPR基因的表达模式和蛋白定位第19-20页
        1.3.1 PPR基因的表达模式第19页
        1.3.2 PPR蛋白的定位第19-20页
    1.4 PPR蛋白的功能第20-25页
        1.4.1 RNA结合特性第20-21页
        1.4.2 PPR蛋白参与植物细胞器RNA编辑第21-22页
        1.4.3 RNA的剪切、稳定性与加工第22-23页
        1.4.4 恢复植物细胞质雄性不育第23-24页
        1.4.5 参与植物叶绿体或胚胎的生物发生第24页
        1.4.6 参与逆境胁迫第24-25页
    1.5 PPR-SMR结构域蛋白第25页
    1.6 研究目的和意义第25-27页
    1.7 技术路线第27-29页
第2章 小麦TaPPR4基因的克隆及序列分析第29-51页
    2.1 引言第29页
    2.2 实验材料第29-30页
        2.2.1 植物材料和质粒材料第29-30页
        2.2.2 试剂、药品及耗材第30页
        2.2.3 试剂盒第30页
        2.2.4 引物合成和测序第30页
    2.3 实验方法和步骤第30-41页
        2.3.1 小麦总RNA的提取第30-31页
        2.3.2 小麦总RNA第一链cDNA的合成第31页
        2.3.3 小麦TaPPR4基因cDNA序列的扩增及纯化第31-33页
        2.3.4 TaPPR4亚细胞定位分析第33-34页
        2.3.5 TaPPR4基因启动子扩增第34-37页
        2.3.6 TaPPR4基因表达模式分析第37-41页
    2.4 实验结果第41-49页
        2.4.1 小麦TaPPR4基因的扩增第41-42页
        2.4.2 TaPPR4的系统进化分析第42-43页
        2.4.3 多重序列比对分析第43-44页
        2.4.4 亚细胞定位第44-45页
        2.4.5 TaPPR4基因在各组织中的表达第45-46页
        2.4.6 TaPPR4基因表达模式第46-49页
    2.5 本章小结第49-51页
第3章 Ta PPR4基因转化小麦及功能鉴定第51-83页
    3.1 引言第51-52页
    3.2 实验材料第52页
        3.2.1 植物材料及质粒材料第52页
        3.2.2 实验药品第52页
    3.3 实验方法第52-65页
        3.3.1 基因枪转化第52-54页
        3.3.2 qRT-PCR分析小麦叶绿体编码基因表达情况第54-57页
        3.3.3 蛋白互作验证第57-63页
        3.3.4 小麦叶片海藻糖6磷酸(T6P)的定量第63-64页
        3.3.5 小麦SnRK1活性检测第64-65页
    3.4 实验结果第65-81页
        3.4.1 植物表达载体的构建第65-66页
        3.4.2 TaPPR4转基因小麦的表型鉴定第66-71页
        3.4.3 TaPPR4-RNAi和TaPPR4-OX中叶绿体编码基因的表达第71-72页
        3.4.4 TaPPR4与TaSnRK1互作验证第72-77页
        3.4.5 TaPPR4基因影响糖信号传导第77-81页
    3.5 本章小结第81-83页
第4章 讨论第83-87页
    4.1 PPR-SMRs蛋白定位第83-84页
    4.2 TaPPR4蛋白功能分析第84-85页
    4.3 SnRK1调节网络第85-87页
论文的创新点第87-89页
结论第89-91页
参考文献第91-109页
攻读博士学位期间发表的学术论文第109-110页
致谢第110页

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