摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-14页 |
第1章 绪论 | 第15-29页 |
1.1 PPR (pentatricopeptide repeats) 基因的发现 | 第15-17页 |
1.2 PPR蛋白的结构特征 | 第17-19页 |
1.3 PPR基因的表达模式和蛋白定位 | 第19-20页 |
1.3.1 PPR基因的表达模式 | 第19页 |
1.3.2 PPR蛋白的定位 | 第19-20页 |
1.4 PPR蛋白的功能 | 第20-25页 |
1.4.1 RNA结合特性 | 第20-21页 |
1.4.2 PPR蛋白参与植物细胞器RNA编辑 | 第21-22页 |
1.4.3 RNA的剪切、稳定性与加工 | 第22-23页 |
1.4.4 恢复植物细胞质雄性不育 | 第23-24页 |
1.4.5 参与植物叶绿体或胚胎的生物发生 | 第24页 |
1.4.6 参与逆境胁迫 | 第24-25页 |
1.5 PPR-SMR结构域蛋白 | 第25页 |
1.6 研究目的和意义 | 第25-27页 |
1.7 技术路线 | 第27-29页 |
第2章 小麦TaPPR4基因的克隆及序列分析 | 第29-51页 |
2.1 引言 | 第29页 |
2.2 实验材料 | 第29-30页 |
2.2.1 植物材料和质粒材料 | 第29-30页 |
2.2.2 试剂、药品及耗材 | 第30页 |
2.2.3 试剂盒 | 第30页 |
2.2.4 引物合成和测序 | 第30页 |
2.3 实验方法和步骤 | 第30-41页 |
2.3.1 小麦总RNA的提取 | 第30-31页 |
2.3.2 小麦总RNA第一链cDNA的合成 | 第31页 |
2.3.3 小麦TaPPR4基因cDNA序列的扩增及纯化 | 第31-33页 |
2.3.4 TaPPR4亚细胞定位分析 | 第33-34页 |
2.3.5 TaPPR4基因启动子扩增 | 第34-37页 |
2.3.6 TaPPR4基因表达模式分析 | 第37-41页 |
2.4 实验结果 | 第41-49页 |
2.4.1 小麦TaPPR4基因的扩增 | 第41-42页 |
2.4.2 TaPPR4的系统进化分析 | 第42-43页 |
2.4.3 多重序列比对分析 | 第43-44页 |
2.4.4 亚细胞定位 | 第44-45页 |
2.4.5 TaPPR4基因在各组织中的表达 | 第45-46页 |
2.4.6 TaPPR4基因表达模式 | 第46-49页 |
2.5 本章小结 | 第49-51页 |
第3章 Ta PPR4基因转化小麦及功能鉴定 | 第51-83页 |
3.1 引言 | 第51-52页 |
3.2 实验材料 | 第52页 |
3.2.1 植物材料及质粒材料 | 第52页 |
3.2.2 实验药品 | 第52页 |
3.3 实验方法 | 第52-65页 |
3.3.1 基因枪转化 | 第52-54页 |
3.3.2 qRT-PCR分析小麦叶绿体编码基因表达情况 | 第54-57页 |
3.3.3 蛋白互作验证 | 第57-63页 |
3.3.4 小麦叶片海藻糖6磷酸(T6P)的定量 | 第63-64页 |
3.3.5 小麦SnRK1活性检测 | 第64-65页 |
3.4 实验结果 | 第65-81页 |
3.4.1 植物表达载体的构建 | 第65-66页 |
3.4.2 TaPPR4转基因小麦的表型鉴定 | 第66-71页 |
3.4.3 TaPPR4-RNAi和TaPPR4-OX中叶绿体编码基因的表达 | 第71-72页 |
3.4.4 TaPPR4与TaSnRK1互作验证 | 第72-77页 |
3.4.5 TaPPR4基因影响糖信号传导 | 第77-81页 |
3.5 本章小结 | 第81-83页 |
第4章 讨论 | 第83-87页 |
4.1 PPR-SMRs蛋白定位 | 第83-84页 |
4.2 TaPPR4蛋白功能分析 | 第84-85页 |
4.3 SnRK1调节网络 | 第85-87页 |
论文的创新点 | 第87-89页 |
结论 | 第89-91页 |
参考文献 | 第91-109页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第109-110页 |
致谢 | 第110页 |