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p53与Doxorubicin共传递多孔微球的制备及对人肺癌A549细胞影响的研究

摘要第4-8页
Abstract第8-12页
缩略词注释表第13-19页
第一章 绪论第19-43页
    1.1 肺癌的治疗与研究现状第19-26页
        1.1.1 肺癌的研究现状第20-22页
        1.1.2 肺癌治疗的研究现状第22-26页
        1.1.3 肺癌治疗给药途径的研究现状第26页
    1.2 肺部吸入给药的研究现状第26-30页
        1.2.1 肺的结构与功能第26-28页
        1.2.2 肺原位给药的机理第28页
        1.2.3 吸入给药的研究现状第28-30页
    1.3 PLGA PMS 的研究现状第30-33页
        1.3.1 PMS 的研究现状第30页
        1.3.2 PLGA 的研究现状第30-31页
        1.3.3 PMS 制备的研究现状第31-33页
    1.4 活性氧作用与细胞凋亡的研究现状第33-41页
        1.4.1 细胞凋亡的研究现状第33-36页
        1.4.2 细胞凋亡线粒体途径的研究现状第36-38页
        1.4.3 ROS 作用与线粒体凋亡机制的研究现状第38-41页
    1.5 实验设计思路第41-43页
第二章 PMS 的制备与表征第43-73页
    2.1 实验材料第43-46页
        2.1.1 原料药与质粒第43页
        2.1.2 实验试剂第43-44页
        2.1.3 主要仪器第44-45页
        2.1.4 主要溶液的配制第45-46页
    2.2 实验方法第46-54页
        2.2.1 定量分析方法的建立第46-47页
        2.2.2 PMS 的制备第47-51页
        2.2.3 PMS 的表征第51页
        2.2.4 PMS 载药/基因量、包封率的检测第51-52页
        2.2.5 PMS-Dox/p53 的形态学检测第52-53页
        2.2.6 载药 PMS 的体外释放第53-54页
    2.3 实验结果与讨论第54-71页
        2.3.1 Dox 的 HPLC 方法建立第54-57页
        2.3.2 影响 PMS 形态结构的主要因素第57-59页
        2.3.3 PMS 处方工艺的建立第59-60页
        2.3.4 p53-PEI NP 的表征第60-61页
        2.3.5 PMS 性质的表征第61-65页
        2.3.6 Dox 与 p53-PEI NP 在 PMS 中的分布第65-67页
        2.3.7 载药 PMS 体外释放的研究第67-71页
    2.4 本章小结第71-73页
第三章 载药 PMS 对 A549 细胞作用及影响第73-97页
    3.1 实验材料第73-78页
        3.1.1 细胞株第73页
        3.1.2 实验试剂第73-74页
        3.1.3 主要仪器第74-75页
        3.1.4 主要溶液的配制第75-78页
    3.2 实验方法第78-82页
        3.2.1 细胞培养第78-79页
        3.2.2 细胞存活率实验(MTT 法)第79页
        3.2.3 细胞形态学的检测第79-81页
        3.2.4 细胞凋亡的检测(流式细胞术)第81页
        3.2.5 A549 细胞相关蛋白因子表达的检测第81-82页
    3.3 实验结果与讨论第82-95页
        3.3.1 PMS 载体安全性的评价(MTT 法)第82-83页
        3.3.2 p53 与 Dox 作用 A549 细胞协同效应的检测(MTT 法)第83-85页
        3.3.3 PMS 对 A549 细胞作用及功能的检测(MTT 法)第85-86页
        3.3.4 细胞形态学的检测第86-88页
        3.3.5 A549 细胞凋亡的检测(流式细胞术)第88-89页
        3.3.6 A549 细胞相关蛋白因子表达的检测第89-95页
    3.4 本章小结第95-97页
第四章 共传递 PMS-Dox/p53 促 A549 细胞凋亡的线粒体分子机制第97-117页
    4.1 实验材料第97-99页
        4.1.1 细胞株第97页
        4.1.2 实验试剂第97-98页
        4.1.3 主要仪器第98-99页
        4.1.4 主要溶液的配制第99页
    4.2 实验方法第99-105页
        4.2.1 细胞培养第99页
        4.2.2 MMP 的检测第99-100页
        4.2.3 细胞浆内 Ca2+浓度的检测第100-101页
        4.2.4 A549 总蛋白提取及含量的测定第101页
        4.2.5 ROS 自由基的检测第101-102页
        4.2.6 抗氧化酶活性的检测第102-104页
        4.2.7 线粒体与胞浆内 Cyt-C 含量的测定第104-105页
    4.3 实验结果与讨论第105-115页
        4.3.1 载药 PMS 对 A549 细胞 MMP 的影响第105-106页
        4.3.2 载药 PMS 对 A549 细胞内钙离子浓度的影响第106-107页
        4.3.3 载药 PMS 对 A549 细胞 ROS 含量的影响第107-109页
        4.3.4 载药 PMS 对 A549 细胞抗氧化酶活性的影响第109-113页
        4.3.5 载药 PMS 对 A549 细胞 Cyt-C 含量及定位的影响第113-115页
    4.4 本章小结第115-117页
第五章 结论与创新点第117-119页
    5.1 结论第117页
    5.2 创新点第117-119页
参考文献第119-139页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第139-141页
致谢第141-142页

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