| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 引言 | 第15-16页 |
| 1 绪论 | 第16-42页 |
| 1.1 刺参饲料的研究开发进展 | 第16-21页 |
| 1.1.1 刺参的食性及天然饵料的选择 | 第16-17页 |
| 1.1.2 刺参消化能力及人工配合饲料的研究 | 第17-19页 |
| 1.1.3 刺参饲料加工处理方式 | 第19-20页 |
| 1.1.4 刺参饲料目前存在的问题 | 第20-21页 |
| 1.2 海带饲料的营养价值及在水产养殖中的应用 | 第21-24页 |
| 1.2.1 海带营养成分 | 第22-23页 |
| 1.2.2 海带饲料在水产中的应用 | 第23-24页 |
| 1.3 褐藻胶 | 第24-25页 |
| 1.3.1 褐藻胶的化学组成和结构 | 第24-25页 |
| 1.3.2 褐藻胶的理化性质 | 第25页 |
| 1.4 褐藻寡糖 | 第25-29页 |
| 1.4.1 褐藻寡糖的结构性质 | 第26-27页 |
| 1.4.2 褐藻寡糖的应用 | 第27-28页 |
| 1.4.3 褐藻胶的降解方法 | 第28-29页 |
| 1.5 具有降解褐藻胶能力的微生物 | 第29-33页 |
| 1.5.1 来源于海洋环境中的褐藻胶降解菌 | 第29-31页 |
| 1.5.2 来源于土壤中的革兰氏阴性褐藻胶降解菌 | 第31-32页 |
| 1.5.3 来源于土壤中的革兰氏阳性褐藻胶降解菌 | 第32-33页 |
| 1.6 益生菌在水产养殖中的应用 | 第33-40页 |
| 1.6.1 水产养殖中使用的益生菌与陆生益生菌的区别 | 第33-35页 |
| 1.6.2 益生菌在水产养殖中的应用研究 | 第35-37页 |
| 1.6.3 益生菌作用机理 | 第37-40页 |
| 1.7 本论文的主要研究目的 | 第40-42页 |
| 2 褐藻胶降解菌的筛选 | 第42-64页 |
| 2.1 前言 | 第42-43页 |
| 2.2 实验材料和设备 | 第43-46页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第43页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第43-45页 |
| 2.2.3 仪器设备 | 第45页 |
| 2.2.4 实验采集样品 | 第45-46页 |
| 2.2.5 病原菌 | 第46页 |
| 2.3 实验方法 | 第46-50页 |
| 2.3.1 褐藻酸钠选择性培养基进行菌种初筛的方法 | 第46-47页 |
| 2.3.2 褐藻胶裂解酶活力测定方法(DNS法) | 第47页 |
| 2.3.3 具有褐藻胶降解能力的微生物分类鉴定 | 第47-48页 |
| 2.3.4 筛选所得菌株的生理生化鉴定及利用褐藻胶的类型 | 第48页 |
| 2.3.5 筛选菌株对刺参的安全性考察一腹腔注射攻毒试验 | 第48-49页 |
| 2.3.6 筛选菌株对刺参病原菌的拮抗试验 | 第49页 |
| 2.3.7 筛选所得菌株的褐藻胶裂解酶对褐藻胶降解终产物的色谱分析 | 第49-50页 |
| 2.4 实验结果 | 第50-61页 |
| 2.4.1 褐藻胶降解菌株的初筛及16S rDNA基因序列鉴定结果 | 第50-52页 |
| 2.4.2 褐藻胶降解菌株的褐藻胶裂解酶活性 | 第52-53页 |
| 2.4.3 筛选所得菌株WB1的生理生化鉴定结果及系统发育树分析 | 第53-56页 |
| 2.4.4 解淀粉芽孢杆菌WB1对刺参安全性试验的结果 | 第56-57页 |
| 2.4.5 解淀粉芽孢杆菌WB1对刺参病原菌的拮抗效果 | 第57-58页 |
| 2.4.6 解淀粉芽孢杆菌WB1褐藻胶裂解酶对褐藻酸钠进行降解的终产物分析 | 第58-61页 |
| 2.5 讨论 | 第61-62页 |
| 2.6 小结 | 第62-64页 |
| 3 解淀粉芽孢杆菌WB1降解海带中褐藻胶的发酵条件优化 | 第64-86页 |
| 3.1 前言 | 第64-65页 |
| 3.2 实验材料和设备 | 第65-66页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第65页 |
| 3.2.2 菌种来源 | 第65页 |
| 3.2.3 种子培养基 | 第65页 |
| 3.2.4 半固体发酵培养基 | 第65-66页 |
| 3.2.5 仪器设备 | 第66页 |
| 3.3 实验方法 | 第66-70页 |
| 3.3.1 褐藻胶含量的测定 | 第66-67页 |
| 3.3.2 生物量测定方法 | 第67页 |
| 3.3.3 发酵种子培养液的制备 | 第67页 |
| 3.3.4 海带褐藻胶降解的半固体发酵 | 第67页 |
| 3.3.5 单因素试验 | 第67-69页 |
| 3.3.6 因素筛选试验设计——Plackett-Burman设计 | 第69页 |
| 3.3.7 优化试验设计—中心组合设计(Central Composite Design) | 第69-70页 |
| 3.3.8 发酵罐放大验证试验 | 第70页 |
| 3.3.9 扫描电镜 | 第70页 |
| 3.3.10 统计分析 | 第70页 |
| 3.4 实验结果 | 第70-83页 |
| 3.4.1 发酵条件对菌株WB1降解海带中褐藻胶的影响 | 第70-76页 |
| 3.4.3 Plackett-Burman试验设计结果及显著性因素的筛选 | 第76-78页 |
| 3.4.4 Central-Composite design优化结果及响应面分析 | 第78-82页 |
| 3.4.5 优化条件下的发酵罐放大验证实验 | 第82页 |
| 3.4.6 扫描电镜结果 | 第82-83页 |
| 3.5 讨论 | 第83-84页 |
| 3.6 小结 | 第84-86页 |
| 4 褐藻寡糖对刺参原代培养体腔细胞的影响 | 第86-104页 |
| 4.1 前言 | 第86页 |
| 4.2 实验材料和设备 | 第86-88页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第86-87页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第87页 |
| 4.2.3 仪器设备 | 第87-88页 |
| 4.2.5 细胞培养液配方 | 第88页 |
| 4.3 实验方法 | 第88-91页 |
| 4.3.1 实验动物的暂养 | 第88页 |
| 4.3.2 刺参体腔细胞的原代培养 | 第88页 |
| 4.3.3 刺参原代培养体腔细胞的活性检测 | 第88-89页 |
| 4.3.4 AOS对刺参体腔细胞的免疫刺激 | 第89页 |
| 4.3.5 酶活样本的采集与测定 | 第89页 |
| 4.3.6 吞噬细胞活性(PC)的测定 | 第89-90页 |
| 4.3.7 超氧阴离了(O~-_2)产生的测定 | 第90页 |
| 4.3.8 溶菌酶(LYZ)活性的测定 | 第90页 |
| 4.3.9 过氧化物酶(POD)活性的测定 | 第90页 |
| 4.3.10 一氧化氮合酶(NOS)活性的测定 | 第90页 |
| 4.3.11 酸性磷酸酶(ACP)活性的测定 | 第90-91页 |
| 4.3.12 数据统计分析 | 第91页 |
| 4.4 实验结果 | 第91-100页 |
| 4.4.1 刺参体腔细胞体外原代培养的活性检测 | 第91页 |
| 4.4.2 不同分子量及组成成分的AOS对刺参体腔细胞吞噬率的影响 | 第91-93页 |
| 4.4.3 不同分子量及组成成分的AOS对刺参体腔细胞超氧阴离子的影响 | 第93-95页 |
| 4.4.4 不同分子量及组成成分的AOS对刺参体腔细胞溶菌酶的影响 | 第95-96页 |
| 4.4.5 不同分子量及组成成分的AOS对刺参体腔细胞过氧化物酶的影响 | 第96-98页 |
| 4.4.6 不同分子量及组成成分的AOS对刺参体腔细胞一氧化氮合酶的影响 | 第98-99页 |
| 4.4.7 不同分子量及组成成分的AOS对刺参体腔细胞酸性磷酸酶的影响 | 第99-100页 |
| 4.5 讨论 | 第100-102页 |
| 4.6 小结 | 第102-104页 |
| 5 微生物脱胶海带饲料对刺参生长性能及非特异免疫应答的影响 | 第104-119页 |
| 5.1 前言 | 第104-105页 |
| 5.2 实验材料和设备 | 第105-106页 |
| 5.2.1 实验动物 | 第105页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第105页 |
| 5.2.3 仪器设备 | 第105页 |
| 5.2.4 实验菌株 | 第105-106页 |
| 5.2.5 饲料原料 | 第106页 |
| 5.3 实验方法 | 第106-110页 |
| 5.3.1 褐藻胶含量测定方法 | 第106页 |
| 5.3.2 微生物脱胶海带饲料中解淀粉芽孢杆菌WB1的活菌数测定 | 第106页 |
| 5.3.3 实验饲料的制作 | 第106页 |
| 5.3.4 饲喂试验的饲料组成 | 第106-107页 |
| 5.3.5 饲料基础成分分析 | 第107页 |
| 5.3.6 刺参的饲喂试验 | 第107-108页 |
| 5.3.7 生长性能 | 第108页 |
| 5.3.8 刺参肠道消化酶检测 | 第108-109页 |
| 5.3.9 刺参体腔液中免疫相关酶活的检测 | 第109页 |
| 5.3.10 病原菌的攻毒试验 | 第109页 |
| 5.3.11 刺参肠道菌群结构的分析 | 第109-110页 |
| 5.3.12 数据的统计分析 | 第110页 |
| 5.4 实验结果 | 第110-115页 |
| 5.4.1 微生物发酵脱胶海带饲料原料中褐藻胶的剩余量 | 第110页 |
| 5.4.2 生长性能 | 第110-112页 |
| 5.4.3 刺参肠道消化酶活性 | 第112页 |
| 5.4.4 刺参体腔液免疫相关酶活性 | 第112-113页 |
| 5.4.5 抵御病原菌感染的试验结果 | 第113-114页 |
| 5.4.6 刺参肠道菌群分析结果 | 第114-115页 |
| 5.5 讨论 | 第115-118页 |
| 5.6 小结 | 第118-119页 |
| 6 结论与展望 | 第119-121页 |
| 6.1 结论 | 第119-120页 |
| 6.2 展望 | 第120-121页 |
| 创新点摘要 | 第121-122页 |
| 参考文献 | 第122-139页 |
| 作者简介 | 第139-142页 |
| 致谢 | 第142-143页 |
