中文摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第10-17页 |
1 研究背景 | 第10页 |
2 肌肉发生发育的规律 | 第10-13页 |
2.1 肌肉的发生 | 第10-11页 |
2.2 肌肉的生长发育受到基因和miRNA的调控 | 第11-12页 |
2.3 参与肌肉生长发育调控的信号转导通路 | 第12-13页 |
3 miRNA-1和miRNA-133的研究进展 | 第13-16页 |
3.1 miRNA的发生及其作用机制 | 第13-14页 |
3.2 miRNA-1和miRNA-133对骨骼肌发育的研究进展 | 第14-16页 |
4 本研究目的意义 | 第16-17页 |
第二章 不同类型肉鸭的miRNA-1和miRNA-133的组织和发育性表达谱研究 | 第17-28页 |
1 引言 | 第17页 |
2 实验材料 | 第17-19页 |
2.1 实验动物 | 第17-18页 |
2.2 实验仪器 | 第18页 |
2.3 实验试剂 | 第18-19页 |
2.4 软件分析 | 第19页 |
3 实验方法 | 第19-21页 |
3.1 樱桃谷鸭和莆田黑鸭(白羽系)体重测定 | 第19页 |
3.2 肌肉组织石蜡切片制作 | 第19-20页 |
3.3 miRNA-1和miRNA-133引物设计与合成 | 第20-21页 |
3.4 总RNA提取和cDNA合成 | 第21页 |
3.5 实时荧光定量PCR分析 | 第21页 |
4 结果 | 第21-26页 |
4.1 樱桃谷鸭和莆田黑鸭(白羽系)生长发育的表型差异 | 第21-24页 |
4.2 鸭miRNA-1和miRNA-133的组织表达谱 | 第24-25页 |
4.3 miRNA-1和miRNA-133的骨骼肌发育性表达谱 | 第25-26页 |
5 讨论 | 第26-28页 |
第三章 miRNA-1和miRNA-133对鸭成肌细胞增殖和分化的作用研究 | 第28-40页 |
1 引言 | 第28页 |
2 实验材料 | 第28-30页 |
2.1 实验动物 | 第28-29页 |
2.2 实验仪器 | 第29页 |
2.3 实验试剂 | 第29-30页 |
3 实验方法 | 第30-32页 |
3.1 鸭成肌细胞的分离 | 第30页 |
3.2 成肌细胞的传代 | 第30-31页 |
3.3 间接免疫荧光 | 第31页 |
3.4 细胞转染 | 第31-32页 |
3.5 实时荧光定量PCR | 第32页 |
3.6 CCK-8 | 第32页 |
4 实验结果 | 第32-37页 |
5 讨论 | 第37-40页 |
第四章 鸭miRNA-1和miRNA-133的靶基因研究 | 第40-49页 |
1 引言 | 第40页 |
2 实验材料 | 第40-41页 |
2.1 实验动物 | 第40-41页 |
2.2 实验仪器 | 第41页 |
2.3 实验试剂 | 第41页 |
3 实验方法 | 第41-45页 |
3.1 基因组DNA的提取和质量检测 | 第41-42页 |
3.2 靶基因载体的构建 | 第42-44页 |
3.3 靶基因验证 | 第44-45页 |
3.4 靶基因表达情况 | 第45页 |
4 实验结果 | 第45-47页 |
4.1 鸭miRNA-1和mRNA-133候选靶基因的预测 | 第45页 |
4.2 鸭miRNA-1和miRNA-133对候选靶基因表达影响 | 第45-46页 |
4.3 鸭miRNA-1和miRNA-133候选靶基因验证 | 第46-47页 |
5 讨论 | 第47-49页 |
全文结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第58-59页 |