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甲醛降解菌Methylobacterium sp. XJLW固定化及其在反应器中降解性能与去甲酸积累的研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
目录第7-12页
第一章 文献综述第12-35页
    1.1 甲醛污染的常见处理方法第12-17页
        1.1.1 日常室内甲醛去除法第13-14页
        1.1.2 物理处理法第14页
        1.1.3 化学去除方法第14-15页
            1.1.3.1 化学反应法第14页
            1.1.3.2 低浓度臭氧氧化法第14页
            1.1.3.3 光催化氧化法第14-15页
        1.1.4 生物降解法第15-17页
    1.2 甲醛生物降解反应器第17-20页
        1.2.1 生物填料塔第17页
        1.2.2 生物滤池第17-18页
        1.2.3 生物滴滤塔第18-19页
        1.2.4 生物洗涤器第19-20页
    1.3 固定化细胞技术第20-22页
        1.3.1 固定化细胞技术的优点第20页
        1.3.2 固定化方式的分类第20-21页
        1.3.3 固定化细胞技术的应用第21-22页
    1.4 微生物的甲醛代谢途径第22-26页
        1.4.1 同化途径第22-24页
            1.4.1.1 丝氨酸途径第22-23页
            1.4.1.2 RuMP途径第23-24页
        1.4.2 异化途径第24-26页
            1.4.2.1 四氢叶酸途径(THF)第24-25页
            1.4.2.2 四氢甲烷蝶岭途径(H4MPT)第25页
            1.4.2.3 谷胱甘肽途径(GSH/MySH)第25-26页
    1.5 研究的意义和内容第26-27页
    参考文献第27-35页
第二章 固定化Methylobacterium sp.XJLW降解甲醛及其细胞颗粒重复批次的研究第35-49页
    2.1 前言第35-36页
    2.2 实验材料第36-38页
        2.2.1 菌种第36页
        2.2.2 培养基及溶液第36-37页
        2.2.3 药品及试剂第37-38页
        2.2.4 实验仪器第38页
    2.3 实验方法第38-40页
        2.3.1 Methylobacterium sp.XJLW菌体OD-DCW标准曲线的绘制第38页
        2.3.2 样液中甲醛浓度的测定第38-39页
        2.3.3 菌体培养及获得第39页
        2.3.4 固定化细胞颗粒的制备第39页
        2.3.5 不同细胞浓度对固定化细胞降解甲醛及细胞颗粒重复批次的影响第39-40页
        2.3.6 不同培养基对固定化细胞降解甲醛及细胞颗粒重复批次的影响第40页
        2.3.7 不同甲醛初始浓度对固定化细胞降解甲醛及细胞颗粒重复批次的影响第40页
        2.3.8 优化条件下固定化细胞颗粒重复批次的研究第40页
    2.4 结果与讨论第40-47页
        2.4.1 Methylobacterium sp.XJLW菌体OD-DCW标准曲线第40-41页
        2.4.2 不同细胞浓度对固定化细胞降解甲醛及细胞颗粒重复批次的影响第41-43页
        2.4.4 不同培养基对固定化细胞降解甲醛及细胞颗粒重复批次的影响第43-45页
        2.4.5 不同甲醛初始浓度对固定化细胞降解甲醛及细胞颗粒重复批次的影响第45-46页
        2.4.6 优化条件下固定化细胞颗粒的重复批次研究第46-47页
    2.5 本章小结第47页
    参考文献第47-49页
第三章 三相流化床生物反应器降解甲醛的研究第49-58页
    3.1 前言第49-50页
    3.2 实验材料第50页
        3.2.1 菌种第50页
        3.2.2 培养基及试剂第50页
        3.2.3 药品及试剂第50页
        3.2.4 实验仪器第50页
    3.3 实验方法第50-53页
        3.3.1 样液中甲醛浓度的测定第50页
        3.3.2 菌体培养及获得第50页
        3.3.3 固定化细胞颗粒的制备第50页
        3.3.4 甲醛生物反应器的构建第50-51页
        3.3.5 通气量对反应器中固定化细胞降解甲醛的影响第51-52页
        3.3.6 反应温度对反应器中固定化细胞降解甲醛的影响第52页
        3.3.7 珠液比对反应器中固定化细胞降解甲醛的影响第52页
        3.3.8 最佳条件下固定化细胞在反应器中的重复批次第52-53页
    3.4 结果与讨论第53-56页
        3.4.1 通气量对反应器中固定化细胞降解甲醛的影响第53-54页
        3.4.2 反应温度对反应器中固定化细胞降解甲醛的影响第54-55页
        3.4.3 珠液比对反应器中固定化细胞降解甲醛的影响第55页
        3.4.5 最佳条件下固定化细胞在反应器中的重复批次第55-56页
    3.5 本章小结第56页
    参考文献第56-58页
第四章 甲酸脱氢酶重组质粒pMAL-c2X-fdh的构建第58-84页
    4.1 前言第58-59页
    4.2 实验材料第59-64页
        4.2.1 菌种与质粒第59-60页
        4.2.2 培养基和缓冲液第60-62页
        4.2.3 试剂及工具酶第62-63页
        4.2.4 仪器及设备第63-64页
    4.3 实验方法第64-74页
        4.3.1 甲酸脱氢酶基因fdh的获得第64-69页
            4.3.1.1 解脂耶罗维亚酵母Yarrowia lipolytica全基因提取第64-65页
            4.3.1.2 甲酸脱氢酶基因fdh的PCR扩增第65-66页
            4.3.1.3 电泳检测PCR产物第66页
            4.3.1.4 甲酸脱氢酶基因fdh的克隆第66-67页
            4.3.1.5 E. coli DH5α感受态的制备第67-68页
            4.3.1.6 目的基因fdh的转化第68页
            4.3.1.7 蓝白斑筛选阳性单菌落第68页
            4.3.1.8 菌落PCR验证及送样测序第68-69页
        4.3.2 重组表达质粒pMAL-c2X-fdh的构建第69-71页
            4.3.2.1 重组质粒pMD19-fdh的提取第69页
            4.3.2.2 pMD19-fdh和pMAL-c2X的双酶切第69-70页
            4.3.2.3 重组载体pMAL-c2X-fdh的构建第70-71页
            4.3.2.4 阳性克隆的筛选与验证第71页
        4.3.3 重组蛋白的诱导表达与分析第71-73页
            4.3.3.1 诱导表达第71页
            4.3.3.2 蛋白收集与预处理第71-72页
            4.3.3.3 表达产物的SDS-PAGE分析第72-73页
        4.3.4 重组菌Methylobacterium sp.XJLW/pMAL-c2X-fdh的构建第73-74页
            4.3.4.1 Methylobacterium sp.XJLW感受态的制备第73页
            4.3.4.2 重组质粒pMAL-c2X-fdh的转化第73-74页
            4.3.4.3 菌落PCR验证第74页
    4.4 结果与讨论第74-82页
        4.4.1 基因组DNA的提取及PCR扩增第74-75页
        4.4.2 甲酸脱氢酶基因fdh的克隆第75页
        4.4.3 测序结果与序列分析第75-77页
        4.4.4 表达载体pMAL-c2X-fdh的构建第77-78页
        4.4.5 重组质粒PCR鉴定第78-79页
        4.4.6 重组质量的酶切鉴定第79-80页
        4.4.7 重组蛋白的SDS-PAGE检测第80-81页
        4.4.8 Methylobacterium sp.XJLW/pMAL-c2X-fdh的菌落PCR验证第81-82页
    4.5 本章小结第82页
    参考文献第82-84页
第五章 总结与展望第84-86页
    5.1 总结第84-85页
    5.2 展望第85-86页
致谢第86-87页
攻读学位期间发表的学术论文目录第87页

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