摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1. 前言 | 第12-24页 |
1.1 细胞凋亡 | 第12-13页 |
1.1.1 细胞凋亡概念 | 第12页 |
1.1.2 细胞凋亡特征 | 第12页 |
1.1.3 细胞凋亡与细胞坏死的区别 | 第12-13页 |
1.2 细胞凋亡通路 | 第13-19页 |
1.2.1 内源性细胞凋亡通路 | 第13-17页 |
1.2.2 外源性细胞凋亡通路 | 第17-19页 |
1.3 CASPASE | 第19-23页 |
1.3.1 Caspase特性及分类 | 第19-20页 |
1.3.2 Caspases家族成员 | 第20-21页 |
1.3.3 昆虫与哺乳动物中caspase的活化与调控的不同 | 第21-22页 |
1.3.4 Caspase与细胞凋亡 | 第22-23页 |
1.4 研究的目的和意义 | 第23-24页 |
2. 实验材料和方法 | 第24-36页 |
2.1 实验材料 | 第24-28页 |
2.1.1 昆虫细胞 | 第24页 |
2.1.2 菌种 | 第24页 |
2.1.3 主要试剂与试剂盒 | 第24页 |
2.1.4 试剂的配置 | 第24-28页 |
2.2 实验操作及方法 | 第28-36页 |
2.2.1 提取SL-1细胞总RNA- | 第28页 |
2.2.2 PCR扩增目的基因Caspase-1 | 第28-30页 |
2.2.3 将目的基因Caspase-1连接到pET-28a载体上 | 第30-31页 |
2.2.4 转化 | 第31-32页 |
2.2.5 目的基因Caspase-1的原核表达 | 第32-33页 |
2.2.6 Western-blot检测融合蛋白的表达 | 第33页 |
2.2.7 S1-1 Caspase-1蛋白的纯化 | 第33-34页 |
2.2.8 SL-1 Caspase-1蛋白的酶活性检测 | 第34页 |
2.2.9 SL-1 Caspase-1的多克隆抗体的制备 | 第34页 |
2.2.10 免疫荧光检测Caspase-1蛋白在SL-1细胞中的定位 | 第34-36页 |
3. 实验结果 | 第36-44页 |
3.1 SL-CASPASE-1基因的扩增及序列测定 | 第36-40页 |
3.1.1 SL-1细胞总RNA的提取 | 第36页 |
3.1.2 SL-Caspase-1的PCR扩增 | 第36-37页 |
3.1.3 重组质粒的双酶切验证 | 第37页 |
3.1.4 SL-Caspase-1序列测定 | 第37-40页 |
3.2 SL-CASPASE-1蛋白的原核表达 | 第40-41页 |
3.3 SL-CASPASE-1蛋白的纯化 | 第41-42页 |
3.4 SL-CASPASE-1蛋白的活性检测 | 第42页 |
3.5 SL-CASPASE-1多克隆抗体的检测 | 第42-43页 |
3.6 免疫荧光检测SL-CASPASE-1在SL-1细胞中的定位 | 第43-44页 |
4. 讨论 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-50页 |
致谢 | 第50页 |