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斜纹夜蛾Sl-1细胞凋亡蛋白酶Caspase-1的原核表达纯化及活性分析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
1. 前言第12-24页
    1.1 细胞凋亡第12-13页
        1.1.1 细胞凋亡概念第12页
        1.1.2 细胞凋亡特征第12页
        1.1.3 细胞凋亡与细胞坏死的区别第12-13页
    1.2 细胞凋亡通路第13-19页
        1.2.1 内源性细胞凋亡通路第13-17页
        1.2.2 外源性细胞凋亡通路第17-19页
    1.3 CASPASE第19-23页
        1.3.1 Caspase特性及分类第19-20页
        1.3.2 Caspases家族成员第20-21页
        1.3.3 昆虫与哺乳动物中caspase的活化与调控的不同第21-22页
        1.3.4 Caspase与细胞凋亡第22-23页
    1.4 研究的目的和意义第23-24页
2. 实验材料和方法第24-36页
    2.1 实验材料第24-28页
        2.1.1 昆虫细胞第24页
        2.1.2 菌种第24页
        2.1.3 主要试剂与试剂盒第24页
        2.1.4 试剂的配置第24-28页
    2.2 实验操作及方法第28-36页
        2.2.1 提取SL-1细胞总RNA-第28页
        2.2.2 PCR扩增目的基因Caspase-1第28-30页
        2.2.3 将目的基因Caspase-1连接到pET-28a载体上第30-31页
        2.2.4 转化第31-32页
        2.2.5 目的基因Caspase-1的原核表达第32-33页
        2.2.6 Western-blot检测融合蛋白的表达第33页
        2.2.7 S1-1 Caspase-1蛋白的纯化第33-34页
        2.2.8 SL-1 Caspase-1蛋白的酶活性检测第34页
        2.2.9 SL-1 Caspase-1的多克隆抗体的制备第34页
        2.2.10 免疫荧光检测Caspase-1蛋白在SL-1细胞中的定位第34-36页
3. 实验结果第36-44页
    3.1 SL-CASPASE-1基因的扩增及序列测定第36-40页
        3.1.1 SL-1细胞总RNA的提取第36页
        3.1.2 SL-Caspase-1的PCR扩增第36-37页
        3.1.3 重组质粒的双酶切验证第37页
        3.1.4 SL-Caspase-1序列测定第37-40页
    3.2 SL-CASPASE-1蛋白的原核表达第40-41页
    3.3 SL-CASPASE-1蛋白的纯化第41-42页
    3.4 SL-CASPASE-1蛋白的活性检测第42页
    3.5 SL-CASPASE-1多克隆抗体的检测第42-43页
    3.6 免疫荧光检测SL-CASPASE-1在SL-1细胞中的定位第43-44页
4. 讨论第44-46页
参考文献第46-50页
致谢第50页

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