摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1. 引言 | 第12-21页 |
1.1 杆状病毒诱导昆虫细胞凋亡 | 第12-14页 |
1.2 PI_3K-AKT和JNK信号通路 | 第14-16页 |
1.2.1 PI_3K-Akt信号通路 | 第14-15页 |
1.2.2 JNK信号通路 | 第15-16页 |
1.3 超高分辨成像技术观察细胞凋亡进程 | 第16-20页 |
1.3.1 荧光蛋白标记成像技术 | 第16-18页 |
1.3.2 光激活荧光蛋白 | 第18页 |
1.3.3 超高分辨成像技术 | 第18-20页 |
1.4 研究意义 | 第20-21页 |
2. 实验材料和方法 | 第21-33页 |
2.1 材料 | 第21-22页 |
2.1.1 昆虫细胞、哺乳细胞、病毒 | 第21页 |
2.1.2 主要药品与试剂 | 第21页 |
2.1.3 主要溶液的配制 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-33页 |
2.2.1 细胞培养及病毒制备 | 第22-23页 |
2.2.2 病毒诱导细胞凋亡 | 第23页 |
2.2.3 抑制剂处理 | 第23-24页 |
2.2.4 DAPI荧光染色 | 第24页 |
2.2.5 流式细胞术测定 | 第24页 |
2.2.6 荧光蛋白突变体的产生和筛选 | 第24-27页 |
2.2.7 质粒构建 | 第27-28页 |
2.2.8 荧光蛋白的表达与纯化 | 第28-29页 |
2.2.9 光物理和光化学性质测定 | 第29-30页 |
2.2.10 寡聚性质分析 | 第30页 |
2.2.11 成像细胞处理 | 第30-31页 |
2.2.12 PALM成像平台的搭建及拍摄 | 第31页 |
2.2.13 光开关速率检测 | 第31-32页 |
2.2.14 PALM成像数据分析 | 第32-33页 |
3. 实验结果 | 第33-51页 |
3.1 PI_3K-AKT和JNK通路抑制剂对AFMNPV诱导SL-1细胞凋亡的影响 | 第33-37页 |
3.1.1 抑制剂处理与AfMNPV诱导细胞凋亡的形态特征 | 第33-36页 |
3.1.2 抑制剂处理对AfMNPV诱导SL-1细胞凋亡影响的量化 | 第36-37页 |
3.2 发展一类可逆光开关荧光蛋白MGEOs 2用于单分子成像技术 | 第37-51页 |
3.2.1 可逆光开关荧光蛋白mGeos 2的产生 | 第37-39页 |
3.2.2 mGeos 2系列突变体的光学性质测定 | 第39-40页 |
3.2.3 mGeos 2系列突变体的单体性质测定 | 第40-43页 |
3.2.4 mGeos 2系列突变体的光开关动力学测定 | 第43-47页 |
3.2.5 mGeos 2系列突变体荧光蛋白的信噪比测定 | 第47页 |
3.2.6 mGeos 2-IEM/VEM/VES/VEL突变荧光蛋白在PALM成像中表现出色 | 第47-51页 |
4. 讨论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
致谢 | 第56页 |