| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 研究背景和文献综述 | 第10-34页 |
| 1.1 斑马鱼心脏发育概述 | 第10-21页 |
| 1.1.1 斑马鱼心肌前体的特化和分化 | 第10-16页 |
| 1.1.2 斑马鱼心管的形成和心脏形态发生 | 第16-20页 |
| 1.1.3 模式形成和形态发生之间紧密联系 | 第20-21页 |
| 1.2 脊椎动物心脏发育的重要转录因子 | 第21-28页 |
| 1.2.1 基本心脏发生 | 第22-26页 |
| 1.2.2 总结与未来方向 | 第26-28页 |
| 1.3 TGF β信号途径在心脏发育中的作用 | 第28-31页 |
| 1.4 CXXC5基因的研究背景和本研究的目标 | 第31-34页 |
| 1.4.1 CXXC5基因的研究背景 | 第31-32页 |
| 1.4.2 本研究的目标和意义 | 第32-34页 |
| 第二章 zCXXC5基因的克隆及其蛋白对心脏发育的功能 | 第34-78页 |
| 2.1 前言 | 第34页 |
| 2.2 材料与方法 | 第34-49页 |
| 2.2.1 材料、试剂与设备 | 第34-37页 |
| 2.2.2 常规分子生物学实验方法 | 第37-45页 |
| 2.2.3 原核细胞诱导蛋白质表达及多克隆抗体的制备 | 第45页 |
| 2.2.4 免疫共沉淀 | 第45-46页 |
| 2.2.5 斑马鱼morpholino技术 | 第46-47页 |
| 2.2.6 斑马鱼整胚原位杂交 | 第47-48页 |
| 2.2.7 斑马鱼整胚抗体染色 | 第48-49页 |
| 2.3 结果 | 第49-75页 |
| 2.3.1 重组质粒的构建 | 第49-54页 |
| 2.3.2 斑马鱼CXXC5与人的SMAD2和SMAD3的基因和蛋白结构分析 | 第54-57页 |
| 2.3.3 家族关系和进化分析 | 第57-58页 |
| 2.3.4 zCXXC5抗体的制备 | 第58-59页 |
| 2.3.5 zCXXC5基因的表达和定位 | 第59-61页 |
| 2.3.6 用斑马鱼morpholino敲减技术确定zCXXC5基因的生物学功能 | 第61-67页 |
| 2.3.7 免疫共沉淀确定zCXXC5的相互作用蛋白 | 第67-70页 |
| 2.3.8 zCXXC5蛋白与SMAD2和SMAD3蛋白的亚细胞共定位分析 | 第70-72页 |
| 2.3.9 zCXXC5蛋白与SMAD2或SMAD3蛋白在体外发生相互作用 | 第72页 |
| 2.3.10 RT-PCR检测zCXXC5敲减后心脏特异标记基因的表达差异 | 第72-73页 |
| 2.3.11 用斑马鱼HAND2基因的加帽mRNA作拯救实验 | 第73-75页 |
| 2.4 讨论 | 第75-78页 |
| 第三章 CXXC5促进骨骼肌成肌细胞的分化 | 第78-93页 |
| 3.1 前言 | 第78页 |
| 3.2 材料与方法 | 第78-80页 |
| 3.2.1 常规实验材料与方法(同2.2) | 第78页 |
| 3.2.2 RT-PCR引物 | 第78页 |
| 3.2.3 C2C12细胞系的分化 | 第78页 |
| 3.2.4 荧光素酶报告系统分析 | 第78-80页 |
| 3.2.5 免疫荧光 | 第80页 |
| 3.3 结果 | 第80-90页 |
| 3.3.1 HEK-293细胞系的报告基因分析 | 第80-84页 |
| 3.3.2 C2C12细胞系的报告基因分析 | 第84-87页 |
| 3.3.3 CXXC5在骨骼肌成肌细胞和肌细胞中的内源表达 | 第87-88页 |
| 3.3.4 CXXC5基因在肌细胞分化中的功能 | 第88-90页 |
| 3.4 讨论 | 第90-93页 |
| 第四章 结语 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-107页 |
| 附录 | 第107-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
