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弓形虫RH株ROP18重组犬Ⅱ型腺病毒的构建及其在小鼠体内的免疫研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
缩写词与英汉对照第6-11页
第一章 引言第11-21页
    1.1 弓形虫棒状体蛋白 18(ROP18)的研究进展第11-17页
        1.1.1 弓形虫ROP18的发现与定位第12-13页
        1.1.2 ROP18的结构特征第13-14页
        1.1.3 ROP18的毒力调节机制第14-17页
        1.1.4 ROP18的应用研究第17页
    1.2 研究背景第17-21页
第二章 弓形虫RH株ROP18重组CAV-2 载体的构建第21-51页
    2.1 材料第21-26页
        2.1.1 样品第21页
        2.1.2 菌种第21页
        2.1.3 载体第21页
        2.1.4 酶和试剂第21-22页
        2.1.5 主要仪器第22-23页
        2.1.6 培养基和溶液第23-26页
        2.1.7 引物第26页
    2.2 方法第26-41页
        2.2.1 ROP18目的基因的扩增与点突变第26-33页
        2.2.2 p?EGFP-ROP18重组质粒的构建第33-35页
        2.2.3 pVAX-ΔE3-ROP18重组质粒的构建第35-38页
        2.2.4 pPloy2-CAV2-ΔE3-ROP18重组质粒的构建第38-41页
    2.3 结果第41-48页
        2.3.1 克隆载体pGEM-ROP18的构建与鉴定结果第41-44页
        2.3.2 重组质粒p?EGFP-ROP18的构建与鉴定结果第44-45页
        2.3.3 重组质粒pVAX-ΔE3-ROP18的构建与鉴定结果第45-46页
        2.3.4 重组载体pPloy2-CAV2ΔE3-ROP18的构建与鉴定结果第46-48页
    2.4 讨论第48-51页
第三章 CAV2ROP18重组病毒的获得与鉴定第51-64页
    3.1 材料第51页
        3.1.1 细胞、毒株第51页
        3.1.2 主要试剂第51页
        3.1.3 主要仪器第51页
    3.2 方法第51-58页
        3.2.1 CAV2ROP18重组病毒的获得第51-56页
        3.2.2 CAV2ROP18重组病毒的鉴定第56-57页
        3.2.3 CAV2ROP18重组病毒的滴度测定第57-58页
    3.3 结果第58-61页
        3.3.1 CAV2ROP18重组病毒的获得第58页
        3.3.2 CAV2ROP18重组病毒的鉴定第58-61页
        3.3.3 CAV2ROP18重组病毒的滴度测定第61页
    3.4 讨论第61-64页
第四章 CAV2ROP18重组病毒的免疫研究第64-83页
    4.1 材料第64-65页
        4.1.1 病毒、实验动物及弓形虫虫株第64页
        4.1.2 主要试剂第64页
        4.1.3 溶液的配制第64-65页
        4.1.4 主要仪器及设备第65页
    4.2 方法第65-72页
        4.2.1 重组腺病毒及CAV-2 弱毒株的准备第65页
        4.2.2 昆明小鼠的免疫试验第65-66页
        4.2.3 抗体检测第66-68页
        4.2.4 淋巴细胞增殖试验第68-69页
        4.2.5 细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4 和IL-10的检测第69-70页
        4.2.6 CD3+CD4+CD8-和CD3+ CD4- CD8+ T细胞的流式分析第70页
        4.2.7 胞内细胞因子IFN-γ 和INF-α 的流式检测第70-71页
        4.2.8 实验小鼠感染弓形虫RH株及PRU株试验第71-72页
    4.3 结果第72-80页
        4.3.1 实验小鼠血清抗体检测结果第72-74页
        4.3.2 实验小鼠脾淋巴细胞增殖试验(MTT法)第74页
        4.3.3 细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4 和IL-10的检测结果第74-76页
        4.3.4 流式细胞分析CD3+CD4+CD8-和CD3+ CD4- CD8+T细胞结果第76-77页
        4.3.5 胞内细胞因子IFN-γ 和INF-α 的流式分析结果第77-79页
        4.3.6 实验小鼠感染弓形虫RH株及PRU株试验第79-80页
    4.4 讨论第80-83页
全文结论第83-84页
致谢第84-86页
参考文献第86-93页
附录A RH株ROP18测序结果第93-94页
附录B pPloy2-CAV2ΔE3-ROP18重组病毒载体构建流程图第94-95页
附录C 攻读硕士学位期间论文发表及获奖情况第95页

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