摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩写词与英汉对照 | 第6-11页 |
第一章 引言 | 第11-21页 |
1.1 弓形虫棒状体蛋白 18(ROP18)的研究进展 | 第11-17页 |
1.1.1 弓形虫ROP18的发现与定位 | 第12-13页 |
1.1.2 ROP18的结构特征 | 第13-14页 |
1.1.3 ROP18的毒力调节机制 | 第14-17页 |
1.1.4 ROP18的应用研究 | 第17页 |
1.2 研究背景 | 第17-21页 |
第二章 弓形虫RH株ROP18重组CAV-2 载体的构建 | 第21-51页 |
2.1 材料 | 第21-26页 |
2.1.1 样品 | 第21页 |
2.1.2 菌种 | 第21页 |
2.1.3 载体 | 第21页 |
2.1.4 酶和试剂 | 第21-22页 |
2.1.5 主要仪器 | 第22-23页 |
2.1.6 培养基和溶液 | 第23-26页 |
2.1.7 引物 | 第26页 |
2.2 方法 | 第26-41页 |
2.2.1 ROP18目的基因的扩增与点突变 | 第26-33页 |
2.2.2 p?EGFP-ROP18重组质粒的构建 | 第33-35页 |
2.2.3 pVAX-ΔE3-ROP18重组质粒的构建 | 第35-38页 |
2.2.4 pPloy2-CAV2-ΔE3-ROP18重组质粒的构建 | 第38-41页 |
2.3 结果 | 第41-48页 |
2.3.1 克隆载体pGEM-ROP18的构建与鉴定结果 | 第41-44页 |
2.3.2 重组质粒p?EGFP-ROP18的构建与鉴定结果 | 第44-45页 |
2.3.3 重组质粒pVAX-ΔE3-ROP18的构建与鉴定结果 | 第45-46页 |
2.3.4 重组载体pPloy2-CAV2ΔE3-ROP18的构建与鉴定结果 | 第46-48页 |
2.4 讨论 | 第48-51页 |
第三章 CAV2ROP18重组病毒的获得与鉴定 | 第51-64页 |
3.1 材料 | 第51页 |
3.1.1 细胞、毒株 | 第51页 |
3.1.2 主要试剂 | 第51页 |
3.1.3 主要仪器 | 第51页 |
3.2 方法 | 第51-58页 |
3.2.1 CAV2ROP18重组病毒的获得 | 第51-56页 |
3.2.2 CAV2ROP18重组病毒的鉴定 | 第56-57页 |
3.2.3 CAV2ROP18重组病毒的滴度测定 | 第57-58页 |
3.3 结果 | 第58-61页 |
3.3.1 CAV2ROP18重组病毒的获得 | 第58页 |
3.3.2 CAV2ROP18重组病毒的鉴定 | 第58-61页 |
3.3.3 CAV2ROP18重组病毒的滴度测定 | 第61页 |
3.4 讨论 | 第61-64页 |
第四章 CAV2ROP18重组病毒的免疫研究 | 第64-83页 |
4.1 材料 | 第64-65页 |
4.1.1 病毒、实验动物及弓形虫虫株 | 第64页 |
4.1.2 主要试剂 | 第64页 |
4.1.3 溶液的配制 | 第64-65页 |
4.1.4 主要仪器及设备 | 第65页 |
4.2 方法 | 第65-72页 |
4.2.1 重组腺病毒及CAV-2 弱毒株的准备 | 第65页 |
4.2.2 昆明小鼠的免疫试验 | 第65-66页 |
4.2.3 抗体检测 | 第66-68页 |
4.2.4 淋巴细胞增殖试验 | 第68-69页 |
4.2.5 细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4 和IL-10的检测 | 第69-70页 |
4.2.6 CD3+CD4+CD8-和CD3+ CD4- CD8+ T细胞的流式分析 | 第70页 |
4.2.7 胞内细胞因子IFN-γ 和INF-α 的流式检测 | 第70-71页 |
4.2.8 实验小鼠感染弓形虫RH株及PRU株试验 | 第71-72页 |
4.3 结果 | 第72-80页 |
4.3.1 实验小鼠血清抗体检测结果 | 第72-74页 |
4.3.2 实验小鼠脾淋巴细胞增殖试验(MTT法) | 第74页 |
4.3.3 细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4 和IL-10的检测结果 | 第74-76页 |
4.3.4 流式细胞分析CD3+CD4+CD8-和CD3+ CD4- CD8+T细胞结果 | 第76-77页 |
4.3.5 胞内细胞因子IFN-γ 和INF-α 的流式分析结果 | 第77-79页 |
4.3.6 实验小鼠感染弓形虫RH株及PRU株试验 | 第79-80页 |
4.4 讨论 | 第80-83页 |
全文结论 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-93页 |
附录A RH株ROP18测序结果 | 第93-94页 |
附录B pPloy2-CAV2ΔE3-ROP18重组病毒载体构建流程图 | 第94-95页 |
附录C 攻读硕士学位期间论文发表及获奖情况 | 第95页 |