| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 引言 | 第12-20页 |
| 1.1 蛹虫草概况 | 第12页 |
| 1.2 SNF1蛋白激酶的相关研究 | 第12-16页 |
| 1.2.1 SNF1蛋白激酶的结构 | 第13页 |
| 1.2.2 SNF1蛋白激酶活性的调控 | 第13-14页 |
| 1.2.3 SNF1蛋白激酶在酵母中的功能研究 | 第14-15页 |
| 1.2.4 SNF1蛋白激酶在丝状真菌中的功能研究现状 | 第15-16页 |
| 1.3 研究目的及研究内容 | 第16-18页 |
| 1.4 技术路线 | 第18-20页 |
| 第二章 材料与方法 | 第20-36页 |
| 2.1 实验质粒、菌株和培养条件 | 第20-21页 |
| 2.1.1 质粒 | 第20页 |
| 2.1.2 蛹虫草菌株和培养条件 | 第20页 |
| 2.1.3 细菌菌株和培养条件 | 第20页 |
| 2.1.4 培养基配方 | 第20-21页 |
| 2.2 CmSnf1基因的生物信息学分析 | 第21-22页 |
| 2.3 载体的构建 | 第22-29页 |
| 2.3.1 菌丝的培养与收集 | 第22页 |
| 2.3.2 蛹虫草基因组DNA的提取 | 第22页 |
| 2.3.3 敲除载体的构建 | 第22-27页 |
| 2.3.4 GFP融合蛋白载体和回补载体的构建 | 第27-29页 |
| 2.4 蛹虫草T-DNA转化 | 第29-30页 |
| 2.4.1 质粒转化农杆菌（冻融法） | 第29页 |
| 2.4.2 根癌农杆菌介导的丝状真菌遗传转化 | 第29-30页 |
| 2.4.3 蛹虫草基因组DNA的小量提取 | 第30页 |
| 2.5 表型分析 | 第30-32页 |
| 2.5.1 不同条件下生长特性的测定 | 第30-31页 |
| 2.5.2 产孢量和萌发率的测定 | 第31页 |
| 2.5.3 子实体生长情况 | 第31-32页 |
| 2.6 基因分析 | 第32-36页 |
| 2.6.1 饥饿处理 | 第32页 |
| 2.6.2 蛹虫草RNA的提取 | 第32-33页 |
| 2.6.3 cDNA的合成 | 第33-34页 |
| 2.6.4 实时荧光定量PCR（qRT-PCR） | 第34-36页 |
| 第三章 蛹虫草中CmSnf1基因的功能分析 | 第36-52页 |
| 3.1 CmSnf1基因的生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 3.2 蛹虫草CmSnf1基因敲除菌株和回补菌株的获得及分子验证 | 第37-39页 |
| 3.3 CmSnf1与蛹虫草的碳源利用有关 | 第39-43页 |
| 3.4 CmSnf1与蛹虫草的产孢量及孢子萌发有关 | 第43-44页 |
| 3.5 CmSnf1调控蛹虫草对活性氧的清除 | 第44-45页 |
| 3.6 CmSnf1与蛹虫草子实体的生长发育有关 | 第45-47页 |
| 3.7 CmSnf1参与调节蛹虫草细胞壁的完整性 | 第47-48页 |
| 3.8 CmSnf1基因影响SNF1通路基因的表达 | 第48-50页 |
| 3.9 CmSnf1基因影响细胞自噬相关基因的表达 | 第50-52页 |
| 第四章 讨论 | 第52-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 发表论文及专利 | 第68页 |
